重組表達(dá)原理:
基因克隆?:從?;蚪M中獲取CST3基因的編碼序列(對應(yīng)氨基酸31–148),插入含有啟動子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。
宿主表達(dá)?:將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG誘導(dǎo)下啟動蛋白表達(dá)。該系統(tǒng)成本低、表達(dá)效率高,適合大規(guī)模生產(chǎn)。
蛋白純化?:利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合,實現(xiàn)高純度(>95%)蛋白回收,再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
凍干保存?:加入海藻糖作為保護(hù)劑,凍干后可長期穩(wěn)定儲存,復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
產(chǎn)品概述:
人源重組VPS26(也稱為Vps26A),是一種通過重組DNA技術(shù)在大腸桿菌(E. coli)或真核表達(dá)系統(tǒng)中生產(chǎn)的、具有特定折疊結(jié)構(gòu)的人類蛋白。該重組蛋白通常為全長序列,其核心結(jié)構(gòu)由兩個彎曲的β折疊結(jié)構(gòu)域通過極性核心和柔性連接子相連,并具有類似阻滯蛋白(arrestin)的折疊結(jié)構(gòu)。它作為“逆向轉(zhuǎn)運(yùn)體”(Retromer)復(fù)合物的關(guān)鍵亞基,主要通過其C端結(jié)構(gòu)域上的特定環(huán)狀區(qū)域(氨基酸235-246)與VPS35蛋白結(jié)合,從而參與從內(nèi)體到反式高爾基網(wǎng)絡(luò)的受體回收運(yùn)輸過程。該蛋白在維持溶酶體酶受體的正確分選
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human VPS26
別名; FLJ12930, HB 58, HB58, Hbeta 58, Hbeta 58 homolog, Hbeta58, Hbeta58 homolog, hVPS 26, hVPS26, MGC94168, PEP 8A, PEP8A, Vacuolar protein sorting 26, Vacuolar protein sorting 26 A, Vacuolar protein sorting 26 homolog A, Vacuolar protein sorting 26 homolog A S. pombe, Vacuolar protein sorting 26 homolog A yeast, Vacuolar protein sorting 26 yeast, Vacuolar protein sorting 26 yeast homolog
宿主; E.Coli
表達(dá)區(qū)間; 1-327
分子量; 35.9 kDa
標(biāo)簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用前準(zhǔn)備:
離心處理?
凍干粉在運(yùn)輸過程中可能附著于管壁或管蓋,開蓋前應(yīng)先進(jìn)行離心,確保粉末沉降至管底。
建議條件:3000–3500 rpm 離心 5 分鐘
若無高速離心機(jī),可適當(dāng)延長低速離心時間
平衡溫度?
將凍干粉緩慢恢復(fù)至室溫(避免加熱加速溶解),防止因溫差導(dǎo)致管內(nèi)冷凝水影響蛋白穩(wěn)定性
溶解(Reconstitution)
溶解液選擇?
推薦使用無菌蒸餾水或 PBS(pH 7.4)進(jìn)行復(fù)溶
若用于細(xì)胞實驗,可選用含 0.1% BSA 的緩沖液以增強(qiáng)穩(wěn)定性
配制濃度?
將凍干粉溶解至終濃度 ?0.1–1.0 mg/mL?,此范圍適用于大多數(shù)實驗場景
濃度過高可能導(dǎo)致蛋白聚集,過低則易失活
混勻方式?
使用移液槍頭輕輕吹打數(shù)次,或上下輕柔顛倒混勻
嚴(yán)禁使用渦旋振蕩器?,以免破壞蛋白空間結(jié)構(gòu),導(dǎo)致活性喪失
公司正在出售的產(chǎn)品:
髓樣分化蛋白 | 細(xì)胞免疫熒光顯微鏡基礎(chǔ)酶聯(lián)免疫試劑盒(無一抗和二抗) |
E3連接酶抑制素受體2 | 細(xì)胞TNF BETA蛋白表達(dá)熒光定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
肉類尿素比色法定量pcr檢測試劑盒 | 載玻片細(xì)胞CASPASE-5蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡酶聯(lián)免疫試劑盒 |
組織HHV6-B(HUMAN HERPESVIRUS 6-B)病毒 | 10 倍 TPE分子生物級濃縮緩沖溶液 |
組織EPHB2激酶活性定量pcr檢測試劑盒(A/B/C) | 免疫球蛋白超家族成員5抗體 |
鈣調(diào)蛋白激酶激酶β | 蛋白磷酸酯酶-1B抗體 |
真菌/酵母細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性濾膜染色試劑盒 | 細(xì)胞單胺氧化酶(MAO)總活性熒光定量pcr檢測試劑盒 |
50毫升玻璃勻漿器 | 細(xì)胞NLK激酶活性定量pcr檢測試劑盒(A/B/C) |
轉(zhuǎn)錄接頭蛋白EP300 | 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4抗體 |
激活素受體樣激酶1 | ADCK1蛋白抗體 |
PE-Cy5標(biāo)記小鼠CD62L單克隆 | 快速周期調(diào)節(jié)蛋白E5抗體 |
突觸融合蛋白6單克隆 | Recombinant Human VPS26TRS31蛋白抗體 |
通用型HSV1(HERPES SIMPLX1)病毒定性檢測試劑盒 | IL-1相關(guān)Ig受體抗體 |
注意事項:
安全提示:僅限研究使用,避免接觸臨床樣本;操作時需佩戴防護(hù)裝備。
質(zhì)量控制:產(chǎn)品純度通過SDS-PAGE驗證,確保生物活性穩(wěn)定;避免使用含硫柳汞等有毒物質(zhì)的試劑。
兼容性:適用于多種實驗體系,但需優(yōu)化濃度以避免非特異性結(jié)合。
關(guān)鍵字: VPS26;35.9 kDa; 1-327;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù),包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學(xué)、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。