操作要點:

電泳條件?:使用15% SDS-PAGE凝膠,以提高對小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
?轉膜參數?:采用濕轉法,100 V、60–90分鐘(4°C),使用PVDF膜(需甲醇預活化)。
?抗體選擇?:
一抗:抗CST3多克隆抗體(如兔源抗體),推薦稀釋比為1:1000。
二抗:HRP標記的山羊抗兔IgG,稀釋比1:10,000。
?顯色方式?:ECL化學發(fā)光法,預期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內參建議?:由于CST3分子量較小,可選用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作為內參,避免條帶重疊。
產品概述:

作為醛酮還原酶家族(AKR1B)的成員,醛糖還原酶(AR)是多元醇代謝通路的限速酶,其核心功能是利用NADPH作為輔因子,催化葡萄糖還原為山梨醇。該酶在高血糖環(huán)境下活性顯著升高,導致山梨醇在細胞內積累,引發(fā)滲透性損傷,被認為是糖尿病視網膜病變、白內障及神經病變等并發(fā)癥的起始因素。此外,研究表明AR還參與催化多種醛類物質(如4-HNE)的還原,介導炎癥反應和氧化應激信號傳導,在肝纖維化、脊髓損傷修復及腫瘤進展中發(fā)揮重要作用。重組小鼠醛糖還原酶是開發(fā)醛糖還原酶抑制劑(ARI)、探索相關疾病發(fā)病機制及信號通路調
產品名 | Recombinant Mouse Aldose reductase | 分子量 | 34.7 kDa |
表達區(qū)間 | 1-316 | 貨號 | XG-DB3901 |
別名
ADR, AKR1B 1, Akr1b1, Aldehyde reductase, Aldehyde reductase 1, Aldo keto reductase family 1, member B1, Aldo-keto reductase family 1 member B1, aldo-keto reductase family 1, member B1 (aldose reductase), Aldose reductase, aldr 1, ALDR_HUMAN, aldr1, ALR2, AR, Lii5 2 CTCL tumor antigen, Low Km aldose reductase, MGC1804
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 1-316
分子量; 34.7 kDa
標簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用說明:

復溶方法?: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液(pH 7.4)溶解凍干粉,輕輕混勻至完全溶解。
?應用建議?:
?實驗用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測,作為抗原或標準品。
?濃度調整?: 根據實驗需求稀釋,避免高濃度導致非特異性結合。
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護目鏡,遵循實驗室生物安全規(guī)范。
重組表達原理:

基因克隆?:從?;蚪M中獲取CST3基因的編碼序列(對應氨基酸31–148),插入含有啟動子、篩選標記和His標簽序列的質粒載體。
?宿主表達?:將重組質粒轉化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG誘導下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高,適合大規(guī)模生產。
?蛋白純化?:利用His標簽與鎳柱親和層析結合,實現(xiàn)高純度(>95%)蛋白回收,再經透析或凝膠過濾去除雜質。
?凍干保存?:加入海藻糖作為保護劑,凍干后可長期穩(wěn)定儲存,復溶后保持天然構象和生物活性。
公司正在出售的產品:

絲裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2/3 | 組織樣品陽性染色試劑盒 |
FAM119A蛋白 | 載玻片細胞P21蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡酶聯(lián)免疫試劑盒 |
食物乳糖含量酶連續(xù)反應光譜法定量pcr檢測試劑盒 | 細胞TRAIL 蛋白表達熒光定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
細菌活力藍色熒光(DAPI)pcr檢測試劑盒 | Arf1鳥苷酸酶活性分析試劑盒 |
組織PKCα激酶活性定量pcr檢測試劑盒(A/B/C) | 內皮素轉化酶2抗體 |
肝黃素單加氧酶4 | 蛋白偶聯(lián)受體56抗體 |
溶酶體膜完整性(integrity)組織D釋放法pcr檢測試劑盒 | 組織甘肽S轉移酶(GSH ST)總活性比色法定量pcr檢測試劑盒 |
1% phosphotungstic acid 溶液 | 組織BMK激酶活性定量pcr檢測試劑盒(A/B/C) |
自噬相關蛋白12 | 誘捕受體3抗體 |
間隙連接蛋白29/GJE1 | 4型冰結構蛋白LS-12-like (Danio rerio) 蛋白抗體 |
PE標記人IL-10單克隆 | 酪蛋白硫酸轉移酶2抗體 |
AF750標記的甲胎蛋白單克隆 | Recombinant Mouse Aldose reductaseα/β水解酶4抗體 |
PH6-7顯色(BROMOTHYMOL BLUE)指示溶液 | KIAA0284蛋白抗體 |
重組蛋白生產流程:

通常包括以下幾個核心步驟:
基因克隆:首先,科學家需要獲取編碼目標蛋白的特定基因序列(目的基因)。
構建載體:將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中,這個載體就像是一個運輸工具,
能將目的基因送入宿主細胞并指導其表達。
轉入宿主:將構建好的重組載體導入選定的宿主細胞中,這個過程稱為“轉化”或“轉染”。
表達與培養(yǎng):宿主細胞在適宜的條件下進行大規(guī)模培養(yǎng),其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息,開始大量生產目標蛋白。
純化:通過一系列復雜的生物化學方法(如層析技術),將目標重組蛋白從宿主細胞的眾多混合物中分離出來,以獲得高純度的產品。
關鍵字: Aldose reductase;34.7 kDa; 1-316;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領域,利用互聯(lián)網、數據分析及自動化技術,包括實驗室固定資產、儀器設備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產品、技術服務、免疫學和分子學產品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產品領域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構通用性高、適應性好、模塊搭配靈活,能快速響應客戶需求的產品。