操作要點:

電泳條件?:使用15% SDS-PAGE凝膠,以提高對小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
?轉膜參數(shù)?:采用濕轉法,100 V、60–90分鐘(4°C),使用PVDF膜(需甲醇預活化)。
?抗體選擇?:
一抗:抗CST3多克隆抗體(如兔源抗體),推薦稀釋比為1:1000。
二抗:HRP標記的山羊抗兔IgG,稀釋比1:10,000。
?顯色方式?:ECL化學發(fā)光法,預期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內參建議?:由于CST3分子量較小,可選用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作為內參,避免條帶重疊。
產品概述:

作為高密度脂蛋白(HDL)的主要結構蛋白,APOA1在膽固醇逆向轉運中發(fā)揮核心作用,它通過激活卵磷脂膽固醇?;D移酶(LCAT)促進膽固醇從外周組織(如動脈壁)流出并轉運至肝臟進行代謝排泄,從而發(fā)揮抗動脈粥樣硬化的保護功能。此外,APOA1還參與調節(jié)炎癥反應、維持胰島素敏感性,并作為精子激活蛋白復合物(SPAP)的組分影響精子活力。該重組蛋白純度高(>95%),廣泛應用于脂質代謝、心血管疾病、非酒精性脂肪肝(NAFLD)及生殖生物學等領域的機制研究和藥物篩選。
產品名 | Recombinant Mouse Apolipoprotein A I | 分子量 | 26.3 kDa |
表達區(qū)間 | 25-264 | 貨號 | XG-DB3907 |
別名
Apo-AI, ApoA I, ApoA-I, APOA1, APOA1_HUMAN, Apolipoprotein A-I(1-242), Apolipoprotein A1, Apolipoprotein AI, Apolipoprotein of high density lipoprotein, ApolipoproteinAI, Brp14, high density lipoprotein uptake, Ltw1, Lvtw1, MGC117399, Sep1, Sep2
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 25-264
分子量; 26.3 kDa
標簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用說明:

復溶方法?: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液(pH 7.4)溶解凍干粉,輕輕混勻至完全溶解。
?應用建議?:
?實驗用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測,作為抗原或標準品。
?濃度調整?: 根據(jù)實驗需求稀釋,避免高濃度導致非特異性結合。
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護目鏡,遵循實驗室生物安全規(guī)范。
重組表達原理:

基因克隆?:從?;蚪M中獲取CST3基因的編碼序列(對應氨基酸31–148),插入含有啟動子、篩選標記和His標簽序列的質粒載體。
?宿主表達?:將重組質粒轉化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG誘導下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高,適合大規(guī)模生產。
?蛋白純化?:利用His標簽與鎳柱親和層析結合,實現(xiàn)高純度(>95%)蛋白回收,再經透析或凝膠過濾去除雜質。
?凍干保存?:加入海藻糖作為保護劑,凍干后可長期穩(wěn)定儲存,復溶后保持天然構象和生物活性。
公司正在出售的產品:

突觸結合蛋白4 | 酵母腺苷脫氨酶(ADA)定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
FAM188B2蛋白 | 冰凍切片組織PAR-2蛋白表達熒光顯微鏡酶聯(lián)免疫試劑盒 |
氨待測樣品處理試劑盒 | 細胞ERK蛋白表達流式細胞儀酶聯(lián)免疫試劑盒 |
細菌脂肪酶(LIPASE)活性定性染色試劑盒 | 藥品阿斯巴塘(aspartame)含量高效液相色譜法定量酶聯(lián)免疫試劑盒 |
組織己糖激酶(HEXOKINASE)酶偶聯(lián)反應比色法定量pcr檢測試劑盒 | 腦發(fā)育調節(jié)蛋白抗體 |
孤菲肽/痛敏肽 | 凋亡加強結構域蛋白11抗體 |
電擊法細胞融合試劑盒 | 冰凍切片游離毛地黃皂苷法(DIGITONIN)舒爾茨染色試劑盒 |
[γ32P]ATP激酶標記法PCR產物處理試劑盒 | 組織堿性磷酸酶活性比色法定量pcr檢測試劑盒 |
轉錄因子同源蛋白Nkx2.8 | 抑癌蛋白DLP1 |
甲卡西酮/2-(甲基氨基)-1-苯基-1-丙酮 | APC標記人CD1a單克隆抗體 |
PE標記小鼠CD80單克隆 | 磷酸化Crk p38抗體 |
AF680標記的轉錄因子Pax6 | Recombinant Mouse Apolipoprotein A I白細胞介素-12受體β2抗體 |
組織膠原蛋白(collagen)比色法定量檢測試劑盒 | H2B組蛋白家族成員W蛋白抗體(睪丸特異性) |
重組蛋白生產流程:

通常包括以下幾個核心步驟:
基因克?。菏紫?,科學家需要獲取編碼目標蛋白的特定基因序列(目的基因)。
構建載體:將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中,這個載體就像是一個運輸工具,
能將目的基因送入宿主細胞并指導其表達。
轉入宿主:將構建好的重組載體導入選定的宿主細胞中,這個過程稱為“轉化”或“轉染”。
表達與培養(yǎng):宿主細胞在適宜的條件下進行大規(guī)模培養(yǎng),其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息,開始大量生產目標蛋白。
純化:通過一系列復雜的生物化學方法(如層析技術),將目標重組蛋白從宿主細胞的眾多混合物中分離出來,以獲得高純度的產品。
關鍵字: Apolipoprotein A I;26.3 kDa; 25-264;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領域,利用互聯(lián)網、數(shù)據(jù)分析及自動化技術,包括實驗室固定資產、儀器設備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產品、技術服務、免疫學和分子學產品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產品領域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構通用性高、適應性好、模塊搭配靈活,能快速響應客戶需求的產品。