人卵巢成纖維細(xì)胞
產(chǎn)品信息：
英文名稱：Human Ovarian Fibroblast Cells
組織來源：卵巢組織
默認(rèn)種屬 人
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡介 公司實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測 公司實(shí)驗(yàn)室分離的人卵巢成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人卵巢成纖維細(xì)胞 | 組織來源 | 卵巢組織 |
英文名稱 | Human Ovarian Fibroblast Cells | 貨號 | A01X1393 |
細(xì)胞簡介：
人卵巢成纖維分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢，但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu)，而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官，它的外表有一層上皮組織，其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分，主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成；髓質(zhì)位于中央，由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的卵巢成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。卵巢成纖維細(xì)胞大多分布于卵巢表面，其主要特點(diǎn)和功能：①成纖維細(xì)胞在體外易于培養(yǎng)；②卵巢損傷后，成纖維細(xì)胞能修復(fù)和重塑卵巢；③能在卵巢炎癥時有效控制炎癥擴(kuò)散。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞培養(yǎng)操作：
消化培養(yǎng)法
此方法利用酶（如胰蛋白酶、膠原酶）將組織分散成單個細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)，形成細(xì)胞懸液進(jìn)行培養(yǎng)，細(xì)胞生長較快。
取材與剪切
同樣在無菌條件下獲取組織，并用Hanks液清洗干凈。
將組織剪切成更小的碎塊（約 1 mm3），以便酶更好地發(fā)揮作用。
酶消化
將組織塊轉(zhuǎn)移至容器中，加入適量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。
在 37℃ 條件下消化 20-40分鐘，期間可適當(dāng)搖動或吹打。消化程度需在顯微鏡下觀察，當(dāng)組織分散成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞時，立即終止消化。
終止與洗滌
加入含血清的培養(yǎng)液以終止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。
將細(xì)胞懸液通過篩網(wǎng)過濾，除去未消化的組織塊。然后以 1000 rpm 離心 5-10分鐘，棄去上清液。
接種與培養(yǎng)
用適量新鮮培養(yǎng)液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，并調(diào)整細(xì)胞密度至實(shí)驗(yàn)所需濃度（例如 5×10? cells/mL）。
將細(xì)胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中，放入 37℃、5% CO? 培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人補(bǔ)體C5a（C5a）PCR檢測試劑盒 | ZFP275 鋅指蛋白275抗體 |
大鼠微纖絲相關(guān)糖蛋白3(MFAP3)PCR檢測試劑盒 | FAM26E蛋白抗體 |
小鼠毒蕈堿型膽堿受體M2(CHRM2)PCR檢測試劑盒 | ATP依賴性解旋酶ATRX抗體 |
大鼠多巴胺D2受體配體(D2RL)PCR檢測試劑盒 | HOXD8 同源盒轉(zhuǎn)錄因子8抗體 |
褪黑素（MT）含量測試盒 | 細(xì)胞表面趨化因子受體1抗體 |
睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子受體α抗體 | Gemin 5 脊髓性肌萎縮癥蛋白Gemin5抗體 |
PTRHD1 PTRHD1蛋白抗體 | D-Hanks' 平衡鹽溶液，含酚紅500ml |
硫辛酰連接酶2抗體 | 綿羊5羥二十碳四烯酸(5-HETE)PCR檢測試劑盒免費(fèi)代測 |
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ZC3H4/C19orf7 19號染色體開放閱讀框7抗體 | 大鼠S100鈣結(jié)合蛋白A10(S100A10)PCR檢測試劑盒 |
EGFR5 表皮生長因子受體5抗體 | 人肌腱蛋白R(TN-R)核酸檢測試劑盒 |
MANSC1蛋白抗體 | 二、常用生化類試劑盒 |
PCNA(Nuclear Loading Control) 增殖細(xì)胞核抗原（核內(nèi)參）單克隆抗體 | 小鼠抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體核酸檢測試劑盒 |
神經(jīng)激肽U抗體 | Cadherin 10 鈣粘附分子10抗體 |
人肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞 | 人卵巢成纖維細(xì)胞Human Extrahepatic Bile Duct Epithelial Cells |
豬皮膚成纖維細(xì)胞 | Porcine ovarian endometrial cells |
實(shí)驗(yàn)注意點(diǎn)：
代數(shù)控制：盡量在低代數(shù)（如P3-P10）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以防止因傳代過多導(dǎo)致的遺傳漂移或功能衰退。
操作輕柔：原代細(xì)胞對環(huán)境變化敏感，解凍和傳代時需格外小心，避免機(jī)械損傷。
營養(yǎng)需求：它們往往需要更復(fù)雜的營養(yǎng)成分（如特定的生長因子、血清），普通的培養(yǎng)基可能無法滿足其生長需求。
關(guān)鍵字： 人卵巢成纖維細(xì)胞;卵巢組織;貼壁;
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