人軟骨細(xì)胞

產(chǎn)品信息：

英文名稱：Human Chondrocyte Cells

組織來源：軟骨組織

默認(rèn)種屬 人

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

方法簡介 公司實(shí)驗(yàn)室分離的人軟骨采用膠原酶-聯(lián)合消化制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測  公司實(shí)驗(yàn)室分離的人軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

 細(xì)胞簡介：

人軟骨分離自軟骨組織；軟骨組織由軟骨細(xì)胞、基質(zhì)及纖維構(gòu)成。軟骨組織再生能力強(qiáng)，這些增生的幼稚細(xì)胞形似纖維母細(xì)胞，以后逐漸變?yōu)檐浌悄讣?xì)胞，并形成軟骨基質(zhì)，細(xì)胞被埋在軟骨陷窩內(nèi)而變?yōu)殪o止的軟骨細(xì)胞。根據(jù)軟骨組織內(nèi)所含纖維成分的不同，可將軟骨分為透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種，其中以透明軟骨的分布較廣，結(jié)構(gòu)也較典型。軟骨細(xì)胞（chondrocyte）位于軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的軟骨細(xì)胞位于軟骨組織的表層，單個(gè)分布，體積較小，呈橢圓形，長軸與軟骨表面平行，越向深層的軟骨細(xì)胞體積之間增大呈圓形，細(xì)胞核圓形或卵圓形，染色淺，細(xì)胞質(zhì)弱嗜堿性，常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的軟骨細(xì)胞多2-8個(gè)成群分布于軟骨陷窩內(nèi)，這些軟骨細(xì)胞由同一個(gè)母細(xì)胞分裂增殖而成，稱為同源細(xì)胞群。電鏡下，軟骨細(xì)胞有突起和皺褶，細(xì)胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中，軟骨細(xì)胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細(xì)胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的軟骨細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2~3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

消化培養(yǎng)法

此方法利用酶（如胰蛋白酶、膠原酶）將組織分散成單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)，形成細(xì)胞懸液進(jìn)行培養(yǎng)，細(xì)胞生長較快。

取材與剪切

同樣在無菌條件下獲取組織，并用Hanks液清洗干凈。

將組織剪切成更小的碎塊（約 1 mm3），以便酶更好地發(fā)揮作用。

酶消化

將組織塊轉(zhuǎn)移至容器中，加入適量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。

在 37℃ 條件下消化 20-40分鐘，期間可適當(dāng)搖動(dòng)或吹打。消化程度需在顯微鏡下觀察，當(dāng)組織分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞時(shí)，立即終止消化。

終止與洗滌

加入含血清的培養(yǎng)液以終止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。

將細(xì)胞懸液通過篩網(wǎng)過濾，除去未消化的組織塊。然后以 1000 rpm 離心 5-10分鐘，棄去上清液。

接種與培養(yǎng)

用適量新鮮培養(yǎng)液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，并調(diào)整細(xì)胞密度至實(shí)驗(yàn)所需濃度（例如 5×10? cells/mL）。

將細(xì)胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中，放入 37℃、5% CO? 培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

代數(shù)控制：盡量在低代數(shù)（如P3-P10）進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以防止因傳代過多導(dǎo)致的遺傳漂移或功能衰退。

操作輕柔：原代細(xì)胞對(duì)環(huán)境變化敏感，解凍和傳代時(shí)需格外小心，避免機(jī)械損傷。

營養(yǎng)需求：它們往往需要更復(fù)雜的營養(yǎng)成分（如特定的生長因子、血清），普通的培養(yǎng)基可能無法滿足其生長需求。