大鼠骨骼肌細胞

產(chǎn)品信息：

英文名稱：Rat Skeletal Muscle Cells

組織來源：骨骼肌組織

默認種屬 大鼠

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

方法簡介 公司實驗室分離的大鼠骨骼肌采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測  公司實驗室分離的大鼠骨骼肌經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

 細胞簡介：

大鼠骨骼肌分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌，肌肉中的一種，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞，肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構和功能的器官，有豐富的血管、淋巴分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張，進行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方。肌細胞內(nèi)有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶（Ⅰ帶）及暗帶（A帶）。明帶染色較淺，而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間，有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段，叫做一個肌節(jié)。骨骼肌細胞也稱橫紋肌細胞，細胞呈纖維狀，不分支，有明顯橫紋，核很多，且都位于細胞膜下方，細胞多呈梭行，具有一定的方向性。骨骼肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網(wǎng)狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞培養(yǎng)操作：

消化培養(yǎng)法

此方法利用酶（如胰蛋白酶、膠原酶）將組織分散成單個細胞或細胞團，形成細胞懸液進行培養(yǎng)，細胞生長較快。

取材與剪切

同樣在無菌條件下獲取組織，并用Hanks液清洗干凈。

將組織剪切成更小的碎塊（約 1 mm3），以便酶更好地發(fā)揮作用。

酶消化

將組織塊轉(zhuǎn)移至容器中，加入適量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。

在 37℃ 條件下消化 20-40分鐘，期間可適當搖動或吹打。消化程度需在顯微鏡下觀察，當組織分散成細胞團或單個細胞時，立即終止消化。

終止與洗滌

加入含血清的培養(yǎng)液以終止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。

將細胞懸液通過篩網(wǎng)過濾，除去未消化的組織塊。然后以 1000 rpm 離心 5-10分鐘，棄去上清液。

接種與培養(yǎng)

用適量新鮮培養(yǎng)液重懸細胞沉淀，進行細胞計數(shù)，并調(diào)整細胞密度至實驗所需濃度（例如 5×10? cells/mL）。

將細胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中，放入 37℃、5% CO? 培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

代數(shù)控制：盡量在低代數(shù)（如P3-P10）進行實驗，以防止因傳代過多導致的遺傳漂移或功能衰退。

操作輕柔：原代細胞對環(huán)境變化敏感，解凍和傳代時需格外小心，避免機械損傷。

營養(yǎng)需求：它們往往需要更復雜的營養(yǎng)成分（如特定的生長因子、血清），普通的培養(yǎng)基可能無法滿足其生長需求。