MH7A細(xì)胞（人正常關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞）
| 一、細(xì)胞基本屬性 |
| 細(xì)胞名稱 | MH7A細(xì)胞（人正常關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞） |
| 細(xì)胞別稱 | MH7A |
| 商品貨號(hào) | LM8C1374 |
| 種屬來源 | 人 |
| 年齡性別 | 女；53歲 |
| 組織來源 | 滑膜 |
| 生長(zhǎng)特性 | 貼壁生長(zhǎng) |
| 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
| 背景簡(jiǎn)介 | - |
| 生物安全等級(jí) | - |
| 細(xì)胞規(guī)格 | 1×10^6cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝 |
| 支原體檢測(cè) | 無 |
| 培養(yǎng)基 | RPMI1640+10%FBS+1%Anti-Anti |
| 培養(yǎng)條件 | 氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃ |
| 凍存條件 | 無血清凍存液，液氮儲(chǔ)存 |
| 倍增時(shí)間 | ~24-30小時(shí) |
二、細(xì)胞接收后的處理
1) 收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于室溫放置約1h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2) 請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3) 貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在室溫中放置1h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的完全培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4) 細(xì)胞運(yùn)輸途中脫落操作方法：把脫落的細(xì)胞收集離心后棄上清，用PBS清洗一遍，離心棄上清，在離心管中加入1ml胰酶吹散消化20秒左右，加完全培養(yǎng)基終止消化后離心重新鋪平，剩下的貼壁細(xì)胞就按照正常貼壁細(xì)胞傳代方法操作。
5) 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
三、細(xì)胞培養(yǎng)操作
1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主將含有1 mL細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加4 mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000 rpm條件下離心3 min，棄去上清液，加1-2 mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入含適量培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6 cm皿中，加入約4 mL完全培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第三天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a) 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b) 加1 mL消化液（0.25%Trypsin-0.02%EDTA）于培養(yǎng)瓶中，使消化液浸潤(rùn)所有細(xì)胞，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中消化1 -3min（視細(xì)胞消化情況而定），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加2-3ml完全培養(yǎng)基終止消化。
關(guān)鍵字： MH7A;人正常關(guān)節(jié)滑膜成纖維細(xì)胞;MH7A細(xì)胞;MH 7A細(xì)胞;MH-7A細(xì)胞;
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