產品介紹：

大鼠神經生長因子(NGF)ELISA試劑盒是專為定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿、細胞上清及相關生物液體中神經生長因子（NGF）含量而設計的科研工具。該試劑盒采用雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA），具有高靈敏度、高特異性和良好的重復性，廣泛應用于神經科學、炎癥、免疫調節(jié)及疾病機制研究等領域的定量分析

檢測原理

微孔板預包被抗大鼠NGF抗體，樣本中的NGF與抗體結合后，加入生物素標記的檢測抗體和HRP標記的鏈霉親和素，形成夾心復合物。加入TMB顯色液，HRP催化TMB產生藍色產物，終止反應后變?yōu)辄S色，顏色深淺與NGF濃度成正比。用酶標儀在450nm波長測定吸光度，通過標準曲線計算樣品濃度。

主要組成

預包被抗體微孔板

NGF標準品

生物素化檢測抗體

HRP-鏈霉親和素

TMB顯色液

終止液

洗滌緩沖液

樣品稀釋液

樣本處理與保存

血清/血漿/組織勻漿/細胞上清：按說明書離心取上清，避免溶血和高血脂；樣本可分裝保存于-20℃或-80℃，避免反復凍融

保存條件：試劑盒2-8℃冷藏保存，標準品-20℃保存，有效期約6個月

試劑盒特點

靈敏度高：最低檢測限可達1.0-23.4 pg/mL（不同品牌有所差異）

特異性強：與大鼠其他相關蛋白無交叉反應

重復性好：板內和板間變異系數(shù)均小于15%

適用樣本類型廣：血清、血漿、組織、細胞等多種生物液體

注意事項

嚴格按說明書操作，避免污染

洗滌要充分

避免標本溶血

不用于臨床診斷，僅用于科研

試劑與樣本準備階段

溫度平衡（最容易被忽視的點）

 操作： 從冰箱取出的試劑盒（包括標準品、酶標試劑、樣品等）必須在室溫（18-25℃）下平衡 30 分鐘。

后果： 冷試劑直接使用會導致孔內溫差，產生冷凝水或非特異性背景，嚴重影響 OD 值。

試劑配制

洗滌液： 濃縮洗滌液如果在低溫下保存可能會有結晶析出。配制時必須確保結晶完全溶解并混勻。

現(xiàn)用現(xiàn)配： 酶標試劑和顯色液（如 TMB）對光和熱敏感，建議在使用前配制工作液，避免失效。

樣本處理

避免溶血： 血清樣本如果發(fā)生溶血（紅細胞破裂），會釋放過氧化物酶，導致假陽性或背景過高。

離心去雜質： 血液或細胞上清樣本在加樣前最好進行離心，去除沉淀和懸浮物，防止堵塞孔底或干擾讀數(shù)。

稀釋倍數(shù)： 如果樣本濃度過高，超出標準曲線范圍，必須進行預實驗確定稀釋倍數(shù)。計算結果時記得乘以稀釋倍數(shù)。

注意事項

避免樣本溶血和反復凍融，樣本如不能立即檢測建議分裝-20℃保存

試劑盒僅供科研使用，不用于臨床診斷

不同批號試劑不可混用，所有試劑使用前需搖勻

洗滌過程需徹底，避免交叉污染和板內干燥

顯色底物TMB需避光保存，使用前配制

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ELISA之所以被廣泛應用，主要歸功于以下幾個核心優(yōu)勢：

靈敏度高（抓得準）：

它利用酶的催化放大作用，能將微弱的信號放大，因此可以檢測到樣本中極低濃度的目標物質（甚至達到皮克級 pg/mL）。哪怕樣本里只有微量的病毒、激素或蛋白質，它也能“捕捉”到。

特異性強（瞄得準）：

基于抗原-抗體的特異性結合原理，試劑盒中的抗體通常只與目標物質反應，很少受樣本中其他雜質的干擾。這大大降低了假陽性率，結果準確可靠。

操作簡便且快速：

相比于一些復雜的儀器分析方法，ELISA的操作流程相對標準化。市面上的試劑盒通常是一套完整的組件，按照說明書進行加樣、孵育、洗板、顯色即可。整個過程通常在幾小時內就能完成。

高通量與適用性廣：

它通常采用96孔板或48孔板，一次實驗可以同時處理幾十個樣本，非常適合大規(guī)模的流行病學篩查或批量科研實驗。此外，它不僅能測蛋白，還能測抗體、激素、藥物殘留甚至農藥，應用領域覆蓋了醫(yī)學、食品安全和環(huán)境監(jiān)測。

安全穩(wěn)定：

不像放射免疫法那樣使用放射性同位素，ELISA使用的是酶標記，對人體和環(huán)境無輻射危害，且試劑保存時間較長。