大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β)ELISA試劑盒
產(chǎn)品簡介:
大鼠腫瘤壞死因子β(TNF-β) ELISA試劑盒是一種用于體外定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清液及其他生物液體樣本中TNF-β濃度的科研工具，廣泛應用于炎癥、免疫、腫瘤等相關研究。
英文名稱 | Rat TNF-β ELISA Kit | 產(chǎn)品類別 | Rat/大鼠Elisa試劑盒 |
貨號 | A116563 | 規(guī)格 | 48T/96T |
靈敏度 | 7.8125pg/mL | 檢測范圍 | 15.625pg/mL-500pg/mL |
檢測原理
試劑盒采用雙抗體夾心法ELISA技術——
微孔板預包被抗TNF-β抗體，與樣本中的TNF-β結(jié)合。
加入酶標檢測抗體，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物。
洗滌后加入底物（如TMB），顯色，顏色深淺與TNF-β濃度呈正相關。
用酶標儀在450 nm波長測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣本濃度。
2. 檢測范圍與靈敏度
檢測范圍常見為1 pg/ml-100 pg/ml或更寬，靈敏度可達1 pg/ml或更高。
部分試劑盒檢測下限可達2.72 pg/mL。
3. 樣本處理及要求
血清：室溫靜置2小時或4℃過夜，離心取上清，避免溶血。
血漿：EDTA或檸檬酸鈉抗凝，離心后取上清。
組織勻漿：用PBS研磨勻漿，離心取上清。
細胞培養(yǎng)上清：離心去除細胞碎片，取上清檢測。
所有樣本建議-20℃保存，避免反復凍融。
4. 試劑盒組成
常見組分包括：
預包被TNF-β抗體的微孔板
酶標檢測抗體
標準品（凍干品或液體）
洗滌液、顯色劑（TMB）、終止液
樣品稀釋液、封板膜、說明書等
5. 實驗步驟簡要
標準品和樣本加樣：設標準品孔和樣本孔，每孔加樣50-100μl。
溫育：37℃孵育30-60分鐘。
洗滌：棄去液體，洗滌5次，拍干。
顯色：每孔加底物溶液，37℃避光顯色10-15分鐘。
終止：加終止液，溶液變?yōu)辄S色。
讀數(shù)：酶標儀450 nm測定OD值，計算濃度。
6. 注意事項
試劑盒2-8℃保存，勿冷凍，避免反復凍融。
樣本收集后盡早檢測，避免降解。
洗滌液有結(jié)晶時，可溫水助溶。
避免交叉污染和主觀誤差，建議做復孔。
僅用于科研，不用于臨床診斷。
應用與服務
該試劑盒廣泛應用于生物醫(yī)學研究領域，如機制研究、疾病標志物檢測等。部分廠家提供免費代測服務和專業(yè)技術支持，方便用戶獲得準確可靠的實驗結(jié)果。
操作要點：
需嚴格遵守試劑盒說明書操作，建議做復孔及標準曲線。
洗滌過程至關重要，洗滌不充分會影響結(jié)果準確性。
所有試劑使用前需恢復至室溫，避免批號混用。
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如何驗證試劑盒的特異性？（實操建議）：
稀釋線性實驗 (Linearity)：
操作： 將高濃度的陽性樣本用稀釋液進行梯度稀釋（如1:2, 1:4, 1:8...）。
預期： 測得的濃度值與稀釋倍數(shù)應呈良好的線性關系（相關系數(shù) R2 ≥ 0.98）。如果線性不好，說明樣本基質(zhì)中有干擾物影響了特異性結(jié)合。
干擾實驗 (Interference Test)：
操作： 在已知濃度的目標抗原溶液中，加入高濃度的潛在干擾物（如高濃度的脂質(zhì)或結(jié)構類似物），檢測其對結(jié)果的影響。
預期： 若檢測值與理論值偏差在±10%以內(nèi)，說明抗干擾能力強，特異性好。
回收實驗 (Recovery Test)：
操作： 在樣本中加入已知量的標準品，檢測總含量，計算回收率。
預期： 回收率在80%-120%之間，說明試劑盒能準確識別目標，不受樣本背景干擾。
注意事項
試劑盒組分應按說明儲存，使用前平衡至室溫。
實驗中需避免交叉污染，建議使用一次性吸頭。
充分混勻?qū)嶒灲Y(jié)果至關重要。
試劑盒僅供研究使用，不可用于臨床診斷。
顯色液需避光保存，終止液為2M硫酸，操作時需安全防護。
關鍵字： 大鼠腫瘤壞死因子β ;TNF-β;ELISA試劑盒;
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