產(chǎn)品介紹：
一、試劑盒基本信息
檢測目標(biāo)：大鼠脂聯(lián)素（Adiponectin/Acrp30），一種由脂肪細(xì)胞分泌的激素蛋白，參與糖脂代謝調(diào)控。
方法學(xué)：雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），特異性結(jié)合目標(biāo)蛋白，通過酶標(biāo)儀定量檢測。
適用樣本：血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿液等（需避免溶血或反復(fù)凍融）。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠Adiponectin/Acrp30elisa試劑盒 | 英文名稱 | RatAdiponectin/Acrp30 ELISA Kit |
規(guī)格 | 48T/96T | 貨號 | A129793 |
二、核心組成
預(yù)包被板：96孔微孔板，包被抗大鼠Adiponectin抗體。
標(biāo)準(zhǔn)品：重組大鼠Adiponectin系列濃度（通常0.5–50 ng/mL），用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
檢測抗體：生物素標(biāo)記的二抗，與目標(biāo)蛋白結(jié)合。
顯色系統(tǒng)：鏈霉親和素-HRP（辣根過氧化物酶）和TMB底物，反應(yīng)終止后顯黃色。
其他：洗滌緩沖液、終止液、封板膜等輔助試劑。
三、關(guān)鍵特點(diǎn)
高靈敏度：檢測下限可達(dá)0.1 ng/mL，適合低濃度樣本。
特異性強(qiáng)：不與大鼠其他脂肪因子（如Leptin）交叉反應(yīng)。
重復(fù)性好：板內(nèi)和板間變異系數(shù)（CV）通常<10%。
快速檢測：操作時間約3–4小時（具體依品牌而定）。
四、典型實驗流程
樣本準(zhǔn)備：離心去除顆粒物，稀釋至線性范圍內(nèi)（避免過度稀釋）。
加樣孵育：標(biāo)準(zhǔn)品和樣本加入預(yù)包被板，37℃孵育1小時。
洗滌：去除未結(jié)合物質(zhì)，重復(fù)3–5次。
顯色與終止：加入TMB底物避光反應(yīng)，硫酸終止后450 nm測OD值。
數(shù)據(jù)分析：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本濃度。
五、應(yīng)用場景
代謝研究：肥胖、糖尿病、胰島素抵抗模型中脂聯(lián)素水平變化。
藥物開發(fā)：評估藥物對脂肪代謝的調(diào)控作用。
基礎(chǔ)科研：探究脂聯(lián)素在炎癥、心血管疾病中的機(jī)制。
六、注意事項
樣本處理：避免反復(fù)凍融，分裝保存于-80℃。
標(biāo)準(zhǔn)曲線：每次實驗需新鮮配制，確保準(zhǔn)確性。
干擾因素：高脂血癥樣本可能需額外稀釋。
ELISA試劑盒的主要優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)
維度 優(yōu)勢 (Pros) 劣勢 (Cons)
檢測性能 靈敏度極高，特異性強(qiáng)，結(jié)果準(zhǔn)確 可能存在交叉反應(yīng)，易受干擾物影響
操作體驗 流程標(biāo)準(zhǔn)化，無需昂貴設(shè)備，適合高通量檢測 步驟多且繁瑣，耗時較長，對操作技巧有要求
經(jīng)濟(jì)成本 適合大批量樣本檢測，長期看性價比尚可 單次試劑成本較高，且不同批次可能存在差異
應(yīng)用范圍 可檢測血清、血漿、細(xì)胞上清等多種樣本 對樣本質(zhì)量（如是否溶血）敏感
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試劑與樣本準(zhǔn)備階段
溫度平衡（最容易被忽視的點(diǎn)）
操作： 從冰箱取出的試劑盒（包括標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)試劑、樣品等）必須在室溫（18-25℃）下平衡 30 分鐘。
后果： 冷試劑直接使用會導(dǎo)致孔內(nèi)溫差，產(chǎn)生冷凝水或非特異性背景，嚴(yán)重影響 OD 值。
試劑配制
洗滌液： 濃縮洗滌液如果在低溫下保存可能會有結(jié)晶析出。配制時必須確保結(jié)晶完全溶解并混勻。
現(xiàn)用現(xiàn)配： 酶標(biāo)試劑和顯色液（如 TMB）對光和熱敏感，建議在使用前配制工作液，避免失效。
樣本處理
避免溶血： 血清樣本如果發(fā)生溶血（紅細(xì)胞破裂），會釋放過氧化物酶，導(dǎo)致假陽性或背景過高。
離心去雜質(zhì)： 血液或細(xì)胞上清樣本在加樣前最好進(jìn)行離心，去除沉淀和懸浮物，防止堵塞孔底或干擾讀數(shù)。
稀釋倍數(shù)： 如果樣本濃度過高，超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，必須進(jìn)行預(yù)實驗確定稀釋倍數(shù)。計算結(jié)果時記得乘以稀釋倍數(shù)。
關(guān)鍵字： 大鼠;Adiponectin/Acrp30;ELISA試劑盒;
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