產(chǎn)品介紹：

大鼠Apolipo protein ELISA試劑盒是專用于體外定量檢測(cè)大鼠血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中載脂蛋白（Apolipoprotein, Apo）含量的試劑盒，僅限科研使用，不用于臨床診斷。

檢測(cè)原理

采用雙抗體夾心法（Sandwich ELISA）。用抗大鼠載脂蛋白特異性抗體預(yù)包被酶標(biāo)板，樣本中的載脂蛋白與抗體結(jié)合后，加入生物素化檢測(cè)抗體和酶標(biāo)二抗，形成免疫復(fù)合物。洗滌后加入TMB顯色底物，辣根過氧化物酶催化顯色，顏色深淺與載脂蛋白濃度呈正相關(guān)。終止反應(yīng)后，用酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度。

主要組成

預(yù)包被抗體的酶標(biāo)板

載脂蛋白標(biāo)準(zhǔn)品

生物素化檢測(cè)抗體

酶標(biāo)二抗（如HRP-鏈霉親和素）

顯色底物（TMB）

終止液

洗滌液

樣品稀釋液

密封膜/封板膜

樣本類型

血清、血漿（EDTA/肝素抗凝）、組織勻漿（如肝臟）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等

性能參數(shù)

檢測(cè)范圍：如5–500 ng/mL（不同亞型和品牌有差異）

靈敏度：最低檢測(cè)限1–10 ng/mL

特異性：僅識(shí)別大鼠載脂蛋白，避免與其他物種交叉反應(yīng)

重復(fù)性：板內(nèi)和板間變異系數(shù)通常小于10%

回收率：≥90%1

保存與有效期

試劑盒2–8 ℃冷藏保存，有效期6個(gè)月至1年，具體以產(chǎn)品批次和品牌為準(zhǔn)。

操作要點(diǎn)

樣本和試劑平衡至室溫后使用

洗滌液現(xiàn)用現(xiàn)稀釋，充分洗滌酶標(biāo)板

顯色時(shí)間和溫度需嚴(yán)格控制

建議所有樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做復(fù)孔

不同批號(hào)試劑勿混用

防止交叉污染和樣本反復(fù)凍融

ELISA試劑盒的主要優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)

維度  優(yōu)勢(shì) (Pros) 劣勢(shì) (Cons)

檢測(cè)性能   靈敏度極高，特異性強(qiáng)，結(jié)果準(zhǔn)確  可能存在交叉反應(yīng)，易受干擾物影響

操作體驗(yàn)   流程標(biāo)準(zhǔn)化，無(wú)需昂貴設(shè)備，適合高通量檢測(cè)   步驟多且繁瑣，耗時(shí)較長(zhǎng)，對(duì)操作技巧有要求

經(jīng)濟(jì)成本   適合大批量樣本檢測(cè)，長(zhǎng)期看性價(jià)比尚可   單次試劑成本較高，且不同批次可能存在差異

應(yīng)用范圍   可檢測(cè)血清、血漿、細(xì)胞上清等多種樣本   對(duì)樣本質(zhì)量（如是否溶血）敏感

公司正在出售的產(chǎn)品：

溫度平衡（最容易被忽視的點(diǎn)）

 操作： 從冰箱取出的試劑盒（包括標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)試劑、樣品等）必須在室溫（18-25℃）下平衡 30 分鐘。

后果： 冷試劑直接使用會(huì)導(dǎo)致孔內(nèi)溫差，產(chǎn)生冷凝水或非特異性背景，嚴(yán)重影響 OD 值。

試劑配制

洗滌液： 濃縮洗滌液如果在低溫下保存可能會(huì)有結(jié)晶析出。配制時(shí)必須確保結(jié)晶完全溶解并混勻。

現(xiàn)用現(xiàn)配： 酶標(biāo)試劑和顯色液（如 TMB）對(duì)光和熱敏感，建議在使用前配制工作液，避免失效。

樣本處理

避免溶血： 血清樣本如果發(fā)生溶血（紅細(xì)胞破裂），會(huì)釋放過氧化物酶，導(dǎo)致假陽(yáng)性或背景過高。

離心去雜質(zhì)： 血液或細(xì)胞上清樣本在加樣前最好進(jìn)行離心，去除沉淀和懸浮物，防止堵塞孔底或干擾讀數(shù)。

稀釋倍數(shù)： 如果樣本濃度過高，超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，必須進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)確定稀釋倍數(shù)。計(jì)算結(jié)果時(shí)記得乘以稀釋倍數(shù)。