產(chǎn)品介紹：
人Catalase ELISA試劑盒用于定量檢測人血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清液等生物樣本中的過氧化氫酶（Catalase, CAT）含量。過氧化氫酶是生物體內(nèi)重要的抗氧化酶，負責催化過氧化氫分解為水和氧氣，保護細胞免受氧化損傷。該試劑盒廣泛應(yīng)用于氧化應(yīng)激相關(guān)疾病、細胞抗氧化能力等研究領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱 | 人Catalaseelisa試劑盒 | 英文名稱 | Human Catalase ELISA Kit |
規(guī)格 | 48T/96T | 貨號 | A129696 |
檢測原理
雙抗體夾心法ELISA：酶標板預(yù)包被抗人CAT抗體，樣本中的CAT與生物素化檢測抗體結(jié)合，再加入HRP標記的鏈霉親和素，催化TMB底物顯色，顏色深淺與CAT濃度呈正相關(guān)，酶標儀450 nm讀取OD值。
主要組成
預(yù)包被抗體酶標板（96/48孔）
CAT標準品（凍干粉或液體，需稀釋）
生物素化檢測抗體
HRP標記鏈霉親和素
TMB顯色液、終止液
洗滌液、樣本稀釋液、封板膜等輔助試劑
檢測流程
加樣：標準品/樣本與檢測抗體、HRP-鏈霉親和素依次加入孔內(nèi)，孵育。
洗滌：洗去未結(jié)合物質(zhì)。
顯色：加入TMB避光反應(yīng)，終止液終止反應(yīng)。
讀數(shù)：酶標儀450 nm測定吸光度。
性能指標
檢測范圍：常見為0.312-20 ng/mL（不同品牌有所差異）
靈敏度：最小可檢測濃度約0.121 ng/mL
特異性：僅與人CAT特異結(jié)合，無明顯交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)和板間變異系數(shù)通常＜10%
樣本與保存
樣本類型：血清、血漿（EDTA/肝素抗凝）、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等，避免防腐劑及反復(fù)凍融
試劑盒保存：2-8℃冷藏，切勿凍存，遠離強光和氧化劑
注意事項
不同批號試劑禁止混用，標準品需現(xiàn)配現(xiàn)用
洗滌、加樣需充分，避免交叉污染
實驗前樣本需平衡至室溫，標準曲線需每次實驗同步制作
僅用于科研，不可用于臨床診斷
ELISA試劑盒的主要優(yōu)點缺點
維度 優(yōu)勢 (Pros) 劣勢 (Cons)
檢測性能 靈敏度極高，特異性強，結(jié)果準確 可能存在交叉反應(yīng)，易受干擾物影響
操作體驗 流程標準化，無需昂貴設(shè)備，適合高通量檢測 步驟多且繁瑣，耗時較長，對操作技巧有要求
經(jīng)濟成本 適合大批量樣本檢測，長期看性價比尚可 單次試劑成本較高，且不同批次可能存在差異
應(yīng)用范圍 可檢測血清、血漿、細胞上清等多種樣本 對樣本質(zhì)量（如是否溶血）敏感
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試劑與樣本準備階段
溫度平衡（最容易被忽視的點）
操作： 從冰箱取出的試劑盒（包括標準品、酶標試劑、樣品等）必須在室溫（18-25℃）下平衡 30 分鐘。
后果： 冷試劑直接使用會導致孔內(nèi)溫差，產(chǎn)生冷凝水或非特異性背景，嚴重影響 OD 值。
試劑配制
洗滌液： 濃縮洗滌液如果在低溫下保存可能會有結(jié)晶析出。配制時必須確保結(jié)晶完全溶解并混勻。
現(xiàn)用現(xiàn)配： 酶標試劑和顯色液（如 TMB）對光和熱敏感，建議在使用前配制工作液，避免失效。
樣本處理
避免溶血： 血清樣本如果發(fā)生溶血（紅細胞破裂），會釋放過氧化物酶，導致假陽性或背景過高。
離心去雜質(zhì)： 血液或細胞上清樣本在加樣前最好進行離心，去除沉淀和懸浮物，防止堵塞孔底或干擾讀數(shù)。
稀釋倍數(shù)： 如果樣本濃度過高，超出標準曲線范圍，必須進行預(yù)實驗確定稀釋倍數(shù)。計算結(jié)果時記得乘以稀釋倍數(shù)。
關(guān)鍵字： 人;Catalase;ELISA試劑盒;
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