產(chǎn)品介紹：
人血小板反應(yīng)素-1（Thrombospondin-1, THBS-1）ELISA試劑盒用于定量檢測(cè)人體樣本（如血清、血漿等）中的THBS-1水平。THBS-1是一種多功能的細(xì)胞外基質(zhì)糖蛋白，參與細(xì)胞黏附、遷移、血管生成及炎癥反應(yīng)等多種生物學(xué)過(guò)程，在心血管疾病、腫瘤及纖維化疾病中具有重要的研究?jī)r(jià)值。
產(chǎn)品名稱 | 人Thrombospondin-1elisa試劑盒 | 英文名稱 | Human Thrombospondin-1 ELISA Kit |
規(guī)格 | 48T/96T | 貨號(hào) | A129764 |
檢測(cè)原理
雙抗體夾心法ELISA：微孔板預(yù)包被抗人THBS-1抗體，樣本中的THBS-1與生物素標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合，再與HRP標(biāo)記的鏈霉親和素反應(yīng)，加入TMB底物后顯色，顏色深淺與THBS-1濃度呈正相關(guān)，酶標(biāo)儀在450 nm波長(zhǎng)處讀數(shù)。
主要組成
預(yù)包被酶標(biāo)板（96/48孔）
THBS-1標(biāo)準(zhǔn)品（多個(gè)濃度梯度）
生物素化檢測(cè)抗體
HRP標(biāo)記鏈霉親和素
底物溶液（TMB）、終止液（硫酸）
洗滌緩沖液、樣本稀釋液、封板膜等輔助試劑
檢測(cè)流程
加樣：標(biāo)準(zhǔn)品/樣本+生物素化檢測(cè)抗體+HRP標(biāo)記鏈霉親和素
洗滌：每孔加滿洗滌液，重復(fù)5次
顯色：加入底物溶液，避光反應(yīng)10-15分鐘
終止：加入終止液
讀數(shù)：酶標(biāo)儀450 nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值
性能指標(biāo)
檢測(cè)范圍：通常為0.78-50 ng/mL（具體以說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)）
靈敏度：最小可檢測(cè)濃度小于26.39 pg/mL
特異性：僅與人類THBS-1反應(yīng)，不與其他相關(guān)蛋白顯著交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異系數(shù)≤10%，板間變異系數(shù)≤15%
臨床與研究意義
心血管疾病研究：THBS-1參與血管生成、血栓形成及動(dòng)脈粥樣硬化等過(guò)程，檢測(cè)其水平有助于評(píng)估心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)及進(jìn)展。
腫瘤研究：THBS-1在腫瘤血管生成及轉(zhuǎn)移中具有雙重作用，其表達(dá)水平變化可為腫瘤診斷和預(yù)后評(píng)估提供參考。
纖維化疾病研究：THBS-1在肝纖維化、肺纖維化等疾病中促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)沉積，檢測(cè)其水平有助于研究纖維化機(jī)制。
樣本要求
血清/血漿：避免溶血和反復(fù)凍融。
其他樣本：如細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿，需經(jīng)適當(dāng)處理和稀釋。
注意事項(xiàng)
試劑盒需2-8℃保存，有效期一般為6個(gè)月。
實(shí)驗(yàn)前平衡至室溫，嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)操作。
建議設(shè)空白對(duì)照、標(biāo)準(zhǔn)曲線和樣本復(fù)孔，確保結(jié)果準(zhǔn)確可靠。
試劑與樣本準(zhǔn)備階段
溫度平衡（最容易被忽視的點(diǎn)）
操作： 從冰箱取出的試劑盒（包括標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)試劑、樣品等）必須在室溫（18-25℃）下平衡 30 分鐘。
后果： 冷試劑直接使用會(huì)導(dǎo)致孔內(nèi)溫差，產(chǎn)生冷凝水或非特異性背景，嚴(yán)重影響 OD 值。
試劑配制
洗滌液： 濃縮洗滌液如果在低溫下保存可能會(huì)有結(jié)晶析出。配制時(shí)必須確保結(jié)晶完全溶解并混勻。
現(xiàn)用現(xiàn)配： 酶標(biāo)試劑和顯色液（如 TMB）對(duì)光和熱敏感，建議在使用前配制工作液，避免失效。
樣本處理
避免溶血： 血清樣本如果發(fā)生溶血（紅細(xì)胞破裂），會(huì)釋放過(guò)氧化物酶，導(dǎo)致假陽(yáng)性或背景過(guò)高。
離心去雜質(zhì)： 血液或細(xì)胞上清樣本在加樣前最好進(jìn)行離心，去除沉淀和懸浮物，防止堵塞孔底或干擾讀數(shù)。
稀釋倍數(shù)： 如果樣本濃度過(guò)高，超出標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，必須進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)確定稀釋倍數(shù)。計(jì)算結(jié)果時(shí)記得乘以稀釋倍數(shù)。
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ELISA試劑盒的主要優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)
維度 優(yōu)勢(shì) (Pros) 劣勢(shì) (Cons)
檢測(cè)性能 靈敏度極高，特異性強(qiáng)，結(jié)果準(zhǔn)確 可能存在交叉反應(yīng)，易受干擾物影響
操作體驗(yàn) 流程標(biāo)準(zhǔn)化，無(wú)需昂貴設(shè)備，適合高通量檢測(cè) 步驟多且繁瑣，耗時(shí)較長(zhǎng)，對(duì)操作技巧有要求
經(jīng)濟(jì)成本 適合大批量樣本檢測(cè)，長(zhǎng)期看性價(jià)比尚可 單次試劑成本較高，且不同批次可能存在差異
應(yīng)用范圍 可檢測(cè)血清、血漿、細(xì)胞上清等多種樣本 對(duì)樣本質(zhì)量（如是否溶血）敏感
關(guān)鍵字： 人;Thrombospondin-1;ELISA試劑盒;
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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、 華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。
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