兔E-cadherin/CD324/CDHelisa試劑盒
產(chǎn)品簡介:
兔E-cadherin/CD324/CDH ELISA試劑盒是專為定量檢測兔樣本（如血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等）中E-cadherin（CD324/CDH1）蛋白含量而設計的試劑盒。E-cadherin是一種鈣依賴型細胞粘附分子，主要參與細胞間粘附及組織結(jié)構(gòu)維持，其表達異常與腫瘤發(fā)生、轉(zhuǎn)移及預后密切相關(guān)。
英文名稱 | Rabbit E-cadherin/CD324/CDH ELISA Kit | 產(chǎn)品類別 | Rabbit/兔Elisa試劑盒 |
貨號 | A129949 | 規(guī)格 | 48T/96T |
檢測原理
采用雙抗體夾心ELISA法：酶標板上預包被抗兔E-cadherin特異性抗體，樣本中的E-cadherin與抗體結(jié)合后，加入酶標二抗，形成“固相抗體-抗原-酶標抗體”復合物，通過底物顯色，顏色深淺與E-cadherin濃度成正比。
試劑盒組成（典型）
預包被E-cadherin抗體的酶標板
E-cadherin標準品
酶標抗體（如HRP標記）
樣本稀釋液
洗滌液
顯色底物（TMB）
終止液
操作步驟
樣本準備：按需做復孔，樣本建議提前平衡至室溫。
加樣：加入標準品和待測樣本，37℃孵育1-2小時。
洗滌：洗板3-5次，去除未結(jié)合物質(zhì)。
加酶標二抗：37℃孵育45-60分鐘。
顯色與終止：加入底物避光反應，終止液終止反應。
讀數(shù)：酶標儀450 nm測定吸光度，依據(jù)標準曲線計算E-cadherin濃度。
注意事項
嚴格按說明書操作，避免交叉污染和非特異性結(jié)合。
樣本避免反復凍融，未用完的板條密封冷藏（2-8℃）。
試劑盒不同批號組分不可混用，標準品建議一次性使用。
血漿、血清及組織樣本需規(guī)范處理，避免溶血和雜質(zhì)干擾。
應用領域
用于兔腫瘤、炎癥、組織損傷修復等疾病機制研究。
支持細胞生物學、病理學及免疫學等多領域科研實驗。
常見問題解答 (FAQ)
Q1: 為什么要做“復孔”？
A: 建議每個樣本（包括標準品）都做復孔（2-3個孔）。這樣可以計算平均值，減少操作誤差，提高數(shù)據(jù)的可信度。
Q2: 樣本需要稀釋嗎？
A: 是的。如果樣本濃度過高，超出了標準曲線的檢測范圍，需要根據(jù)預實驗結(jié)果進行適當稀釋。計算最終濃度時，記得乘以稀釋倍數(shù)。
Q3: 結(jié)果出現(xiàn)“花板”（背景不均）怎么辦？
A: 可能原因包括：洗板不干凈、溫育溫度不均、加樣時產(chǎn)生氣泡、或者試劑（如底物）受光照分解。請檢查洗板機是否堵塞，確保溫育箱溫度恒定。
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如何驗證試劑盒的特異性？（實操建議）：
稀釋線性實驗 (Linearity)：
操作： 將高濃度的陽性樣本用稀釋液進行梯度稀釋（如1:2, 1:4, 1:8...）。
預期： 測得的濃度值與稀釋倍數(shù)應呈良好的線性關(guān)系（相關(guān)系數(shù) R2 ≥ 0.98）。如果線性不好，說明樣本基質(zhì)中有干擾物影響了特異性結(jié)合。
干擾實驗 (Interference Test)：
操作： 在已知濃度的目標抗原溶液中，加入高濃度的潛在干擾物（如高濃度的脂質(zhì)或結(jié)構(gòu)類似物），檢測其對結(jié)果的影響。
預期： 若檢測值與理論值偏差在±10%以內(nèi)，說明抗干擾能力強，特異性好。
回收實驗 (Recovery Test)：
操作： 在樣本中加入已知量的標準品，檢測總含量，計算回收率。
預期： 回收率在80%-120%之間，說明試劑盒能準確識別目標，不受樣本背景干擾。
關(guān)鍵字： 兔; E-cadherin/CD324/CD;ELISA試劑盒;
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