產品介紹:

兔Endoglin ELISA試劑盒用于定量測定兔血清、血漿、組織勻漿、細胞上清等樣本中Endoglin(ENG/sCD105)的含量。Endoglin是一種在血管內皮細胞和某些腫瘤細胞上高表達的跨膜糖蛋白,參與血管生成、細胞增殖和遷移等過程,在腫瘤生長和轉移中起重要作用。
產品名稱 | 兔Endoglinelisa試劑盒 | 英文名稱 | Rabbit Endoglin ELISA Kit |
規(guī)格 | 48T/96T | 貨號 | A129947 |
檢測原理
采用雙抗體夾心法:用純化的兔Endoglin抗體包被微孔板,加入待測樣本,再與酶標抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,加入底物TMB顯色,顏色深淺與Endoglin含量呈正相關。

試劑盒組成

酶標包被板
標準品
酶標抗體
樣品稀釋液
洗滌液
顯色劑A液和B液
終止液
說明書
操作步驟

標準品稀釋與加樣:按說明書進行標準品倍比稀釋,樣本與標準品分別加樣到相應孔中。
溫育:37℃孵育30分鐘。
洗滌:棄去液體并拍干,每孔加滿洗滌液,重復5次。
加酶標抗體:每孔加入50μl酶標抗體,37℃孵育30分鐘。
洗滌:同上。
顯色與終止:每孔加入顯色劑A液和B液各50μl,37℃避光顯色10分鐘,加終止液。
測定:酶標儀450nm測OD值,根據(jù)標準曲線計算樣品濃度。
注意事項

樣本采集后盡快提取和檢測,避免反復凍融。
嚴格按照說明書操作,確保結果準確性。
主要優(yōu)點缺點

維度 優(yōu)勢 (Pros) 劣勢 (Cons)
檢測性能 靈敏度極高,特異性強,結果準確 可能存在交叉反應,易受干擾物影響
操作體驗 流程標準化,無需昂貴設備,適合高通量檢測 步驟多且繁瑣,耗時較長,對操作技巧有要求
經濟成本 適合大批量樣本檢測,長期看性價比尚可 單次試劑成本較高,且不同批次可能存在差異
應用范圍 可檢測血清、血漿、細胞上清等多種樣本 對樣本質量(如是否溶血)敏感
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試劑與樣本準備階段
溫度平衡(最容易被忽視的點)
操作: 從冰箱取出的試劑盒(包括標準品、酶標試劑、樣品等)必須在室溫(18-25℃)下平衡 30 分鐘。
后果: 冷試劑直接使用會導致孔內溫差,產生冷凝水或非特異性背景,嚴重影響 OD 值。
試劑配制
洗滌液: 濃縮洗滌液如果在低溫下保存可能會有結晶析出。配制時必須確保結晶完全溶解并混勻。
現(xiàn)用現(xiàn)配: 酶標試劑和顯色液(如 TMB)對光和熱敏感,建議在使用前配制工作液,避免失效。
樣本處理
避免溶血: 血清樣本如果發(fā)生溶血(紅細胞破裂),會釋放過氧化物酶,導致假陽性或背景過高。
離心去雜質: 血液或細胞上清樣本在加樣前最好進行離心,去除沉淀和懸浮物,防止堵塞孔底或干擾讀數(shù)。
稀釋倍數(shù): 如果樣本濃度過高,超出標準曲線范圍,必須進行預實驗確定稀釋倍數(shù)。計算結果時記得乘以稀釋倍數(shù)。
關鍵字: 兔;Endoglin ;ELISA試劑盒;
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