兔Endothelin-1elisa試劑盒
產(chǎn)品簡介:
英文名稱 | Rabbit Endothelin-1 ELISA Kit | 產(chǎn)品類別 | Rabbit/兔Elisa試劑盒 |
貨號(hào) | A129948 | 規(guī)格 | 48T/96T |
兔Endothelin-1 ELISA試劑盒是一種用于定量檢測(cè)兔血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等生物樣本中內(nèi)皮素-1（ET-1）含量的專用試劑盒，廣泛應(yīng)用于心血管疾病、內(nèi)皮功能障礙、高血壓及腫瘤等科研領(lǐng)域。
1. 檢測(cè)原理
采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（Sandwich ELISA）：
酶標(biāo)板微孔預(yù)先包被抗兔ET-1特異性抗體；
樣本中的ET-1與固相抗體結(jié)合，加入酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體后形成免疫復(fù)合物；
加入顯色底物（如TMB），酶催化反應(yīng)使溶液顯色，顏色深淺與ET-1濃度成正比；
用酶標(biāo)儀在450 nm波長下測(cè)定吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。
2. 主要組成
預(yù)包被微孔板（96孔或48孔）
酶標(biāo)檢測(cè)抗體（HRP-抗ET-1）
標(biāo)準(zhǔn)品（用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線）
樣品稀釋液、洗滌液、底物液、終止液
封板膜、說明書
3. 檢測(cè)步驟（簡要）
將標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本加入微孔，37℃孵育1小時(shí)；
洗滌微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)；
加入酶標(biāo)抗體，37℃孵育1小時(shí)；
再次洗滌，加入底物液，避光顯色；
加終止液，酶標(biāo)儀讀數(shù)，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。
4. 保存與注意事項(xiàng)
試劑盒一般2-8℃保存，有效期6個(gè)月，避免反復(fù)凍融和陽光直射；
樣本如需長期保存，建議分裝后于-20℃或-80℃冷凍；
檢測(cè)前需將試劑恢復(fù)至室溫，嚴(yán)格按說明書操作，避免交叉污染。
5. 應(yīng)用領(lǐng)域
心血管及內(nèi)皮功能研究：檢測(cè)兔在不同病理或生理狀態(tài)下ET-1的表達(dá)水平；
腫瘤、高血壓和組織缺血等疾病機(jī)制研究；
藥物開發(fā)與療效評(píng)價(jià)、疾病進(jìn)展監(jiān)測(cè)等。
常見問題解答 (FAQ)
Q1: 為什么要做“復(fù)孔”？
A: 建議每個(gè)樣本（包括標(biāo)準(zhǔn)品）都做復(fù)孔（2-3個(gè)孔）。這樣可以計(jì)算平均值，減少操作誤差，提高數(shù)據(jù)的可信度。
Q2: 樣本需要稀釋嗎？
A: 是的。如果樣本濃度過高，超出了標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢測(cè)范圍，需要根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行適當(dāng)稀釋。計(jì)算最終濃度時(shí)，記得乘以稀釋倍數(shù)。
Q3: 結(jié)果出現(xiàn)“花板”（背景不均）怎么辦？
A: 可能原因包括：洗板不干凈、溫育溫度不均、加樣時(shí)產(chǎn)生氣泡、或者試劑（如底物）受光照分解。請(qǐng)檢查洗板機(jī)是否堵塞，確保溫育箱溫度恒定。
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如何驗(yàn)證試劑盒的特異性？（實(shí)操建議）：
稀釋線性實(shí)驗(yàn) (Linearity)：
操作： 將高濃度的陽性樣本用稀釋液進(jìn)行梯度稀釋（如1:2, 1:4, 1:8...）。
預(yù)期： 測(cè)得的濃度值與稀釋倍數(shù)應(yīng)呈良好的線性關(guān)系（相關(guān)系數(shù) R2 ≥ 0.98）。如果線性不好，說明樣本基質(zhì)中有干擾物影響了特異性結(jié)合。
干擾實(shí)驗(yàn) (Interference Test)：
操作： 在已知濃度的目標(biāo)抗原溶液中，加入高濃度的潛在干擾物（如高濃度的脂質(zhì)或結(jié)構(gòu)類似物），檢測(cè)其對(duì)結(jié)果的影響。
預(yù)期： 若檢測(cè)值與理論值偏差在±10%以內(nèi)，說明抗干擾能力強(qiáng)，特異性好。
回收實(shí)驗(yàn) (Recovery Test)：
操作： 在樣本中加入已知量的標(biāo)準(zhǔn)品，檢測(cè)總含量，計(jì)算回收率。
預(yù)期： 回收率在80%-120%之間，說明試劑盒能準(zhǔn)確識(shí)別目標(biāo)，不受樣本背景干擾。
關(guān)鍵字： 兔;Endothelin-1;ELISA試劑盒;
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