兔GROelisa試劑盒
產(chǎn)品簡介:
兔GRO ELISA試劑盒是一種用于定量檢測兔血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清液等生物樣本中生長調(diào)節(jié)致癌基因(GRO,也稱CXCL1/MGSA)表達水平的專用試劑盒,廣泛應(yīng)用于炎癥、腫瘤、免疫及組織損傷等領(lǐng)域的科研實驗。
英文名稱 | Rabbit GRO ELISA Kit | 產(chǎn)品類別 | Rabbit/兔Elisa試劑盒 |
貨號 | A130063 | 規(guī)格 | 48T/96T |

1. 檢測原理
采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(Sandwich ELISA):
酶標(biāo)板微孔預(yù)先包被抗兔GRO特異性抗體;
樣本中的GRO與固相抗體結(jié)合,加入酶標(biāo)記的檢測抗體后形成免疫復(fù)合物;
加入顯色底物(如TMB),酶催化反應(yīng)使溶液顯色,顏色深淺與GRO濃度成正比;
用酶標(biāo)儀在450 nm波長測定吸光度,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本濃度。
2. 主要組成
預(yù)包被微孔板(96孔或48孔)
酶標(biāo)檢測抗體(HRP-抗GRO)
標(biāo)準(zhǔn)品(用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線)
樣品稀釋液、洗滌液、底物液、終止液
封板膜、說明書
3. 檢測步驟(簡要)
將標(biāo)準(zhǔn)品和待測樣本加入微孔,37℃孵育1小時;
洗滌微孔板,去除未結(jié)合物質(zhì);
加入酶標(biāo)抗體,37℃孵育1小時;
再次洗滌,加入底物液,避光顯色;
加終止液,酶標(biāo)儀讀數(shù),依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本濃度。
4. 保存與注意事項
試劑盒一般2-8℃保存,有效期6個月,避免反復(fù)凍融和陽光直射;
樣本如需長期保存,建議分裝后于-20℃或-80℃冷凍;
檢測前需將試劑恢復(fù)至室溫,嚴(yán)格按說明書操作,避免交叉污染。
5. 應(yīng)用領(lǐng)域
炎癥與腫瘤研究:檢測兔在不同病理或生理狀態(tài)下GRO的表達水平;
免疫調(diào)節(jié)、組織損傷及修復(fù)、癌癥機制研究;
藥物開發(fā)與療效評價、疾病進展監(jiān)測等。
常見問題解答 (FAQ)
Q1: 為什么要做“復(fù)孔”?
A: 建議每個樣本(包括標(biāo)準(zhǔn)品)都做復(fù)孔(2-3個孔)。這樣可以計算平均值,減少操作誤差,提高數(shù)據(jù)的可信度。
Q2: 樣本需要稀釋嗎?
A: 是的。如果樣本濃度過高,超出了標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢測范圍,需要根據(jù)預(yù)實驗結(jié)果進行適當(dāng)稀釋。計算最終濃度時,記得乘以稀釋倍數(shù)。
Q3: 結(jié)果出現(xiàn)“花板”(背景不均)怎么辦?
A: 可能原因包括:洗板不干凈、溫育溫度不均、加樣時產(chǎn)生氣泡、或者試劑(如底物)受光照分解。請檢查洗板機是否堵塞,確保溫育箱溫度恒定。
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如何驗證試劑盒的特異性?(實操建議):
稀釋線性實驗 (Linearity):
操作: 將高濃度的陽性樣本用稀釋液進行梯度稀釋(如1:2, 1:4, 1:8...)。
預(yù)期: 測得的濃度值與稀釋倍數(shù)應(yīng)呈良好的線性關(guān)系(相關(guān)系數(shù) R2 ≥ 0.98)。如果線性不好,說明樣本基質(zhì)中有干擾物影響了特異性結(jié)合。
干擾實驗 (Interference Test):
操作: 在已知濃度的目標(biāo)抗原溶液中,加入高濃度的潛在干擾物(如高濃度的脂質(zhì)或結(jié)構(gòu)類似物),檢測其對結(jié)果的影響。
預(yù)期: 若檢測值與理論值偏差在±10%以內(nèi),說明抗干擾能力強,特異性好。
回收實驗 (Recovery Test):
操作: 在樣本中加入已知量的標(biāo)準(zhǔn)品,檢測總含量,計算回收率。
預(yù)期: 回收率在80%-120%之間,說明試劑盒能準(zhǔn)確識別目標(biāo),不受樣本背景干擾。
關(guān)鍵字: 兔;GRO;ELISA試劑盒;
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