兔HSP70elisa試劑盒
產(chǎn)品簡介:
兔HSP70 ELISA試劑盒是專為定量檢測兔血清、血漿、組織勻漿、細胞上清等樣本中熱休克蛋白70（HSP70）含量而設計的科研工具。該試劑盒采用雙抗體夾心法ELISA原理，具有高靈敏度、高特異性和良好的重復性，廣泛應用于細胞應激、免疫學、腫瘤及代謝等研究領域。
英文名稱 | Rabbit HSP70 ELISA Kit | 產(chǎn)品類別 | Rabbit/兔Elisa試劑盒 |
貨號 | A130070 | 規(guī)格 | 48T/96T |
英文名稱：Rabbit Heat Shock Protein 70 (HSP-70) ELISA Kit
檢測樣本類型：血清、血漿（EDTA/檸檬酸鹽/肝素）、組織勻漿、細胞上清、尿液等
規(guī)格：96T/48T（可檢測約90或46個樣本，含標準品孔）
保存條件：2–8℃冷藏，避光保存
有效期：6個月
檢測原理
采用雙抗體夾心法ELISA：
酶標板預先包被抗兔HSP70特異性抗體；
加入待測樣本或標準品，樣本中的HSP70與抗體結合；
洗滌后加入酶標檢測抗體，形成“固相抗體-抗原-酶標抗體”復合物；
顯色反應后，酶標儀450nm測定吸光度，通過標準曲線計算HSP70濃度。
主要組成
組分 規(guī)格（96T） 說明
預包被酶標板 1塊（96孔） 抗體包被，即用型
標準品 6瓶（凍干品） 用于標準曲線
酶標抗體 1瓶（120μL） HRP標記，需稀釋
樣本稀釋液 1×20ml 即用型
洗滌緩沖液 1×20ml（濃縮） 使用前稀釋25倍
底物A、B 各10ml 避光保存，現(xiàn)配現(xiàn)用
終止液 1×10ml 強酸，小心操作
封板膜 1張 一次性使用，防污染
樣本處理
血清/血漿/組織勻漿/細胞上清：采集后1000×g離心10–20分鐘，取上清立即檢測或–70℃保存，避免反復凍融。
注意事項：避免溶血與高血脂樣本，操作需嚴格遵循說明書。
性能指標
檢測范圍：0.156-10 ng/mL（不同品牌有所差異）
靈敏度：最低可檢測0.057 ng/mL
特異性：不與其它熱休克蛋白或細胞因子發(fā)生交叉反應
重復性：板內變異<10%，板間變異<15%
線性相關性：R2≥0.92
操作要點
所有試劑使用前需平衡至室溫（20–25℃）；
標準品和樣本建議做復孔；
顯色反應避光進行，終止后15分鐘內讀數(shù)；
標準曲線采用四參數(shù)Logistic回歸或線性擬合；
濃度結果如進行了樣本稀釋，需乘以稀釋倍數(shù)。
常見問題解答 (FAQ)
Q1: 為什么要做“復孔”？
A: 建議每個樣本（包括標準品）都做復孔（2-3個孔）。這樣可以計算平均值，減少操作誤差，提高數(shù)據(jù)的可信度。
Q2: 樣本需要稀釋嗎？
A: 是的。如果樣本濃度過高，超出了標準曲線的檢測范圍，需要根據(jù)預實驗結果進行適當稀釋。計算最終濃度時，記得乘以稀釋倍數(shù)。
Q3: 結果出現(xiàn)“花板”（背景不均）怎么辦？
A: 可能原因包括：洗板不干凈、溫育溫度不均、加樣時產(chǎn)生氣泡、或者試劑（如底物）受光照分解。請檢查洗板機是否堵塞，確保溫育箱溫度恒定。
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如何驗證試劑盒的特異性？（實操建議）：
稀釋線性實驗 (Linearity)：
操作： 將高濃度的陽性樣本用稀釋液進行梯度稀釋（如1:2, 1:4, 1:8...）。
預期： 測得的濃度值與稀釋倍數(shù)應呈良好的線性關系（相關系數(shù) R2 ≥ 0.98）。如果線性不好，說明樣本基質中有干擾物影響了特異性結合。
干擾實驗 (Interference Test)：
操作： 在已知濃度的目標抗原溶液中，加入高濃度的潛在干擾物（如高濃度的脂質或結構類似物），檢測其對結果的影響。
預期： 若檢測值與理論值偏差在±10%以內，說明抗干擾能力強，特異性好。
回收實驗 (Recovery Test)：
操作： 在樣本中加入已知量的標準品，檢測總含量，計算回收率。
預期： 回收率在80%-120%之間，說明試劑盒能準確識別目標，不受樣本背景干擾。
關鍵字： 兔;HSP70 ;ELISA試劑盒;
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