兔HSP70elisa試劑盒
產(chǎn)品簡介:
兔HSP70 ELISA試劑盒是專為定量檢測兔血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清等樣本中熱休克蛋白70（HSP70）含量而設(shè)計的科研工具。該試劑盒采用雙抗體夾心法ELISA原理，具有高靈敏度、高特異性和良好的重復(fù)性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞應(yīng)激、免疫學(xué)、腫瘤及代謝等研究領(lǐng)域。
英文名稱 | Rabbit HSP70 ELISA Kit | 產(chǎn)品類別 | Rabbit/兔Elisa試劑盒 |
貨號 | A130070 | 規(guī)格 | 48T/96T |
英文名稱：Rabbit Heat Shock Protein 70 (HSP-70) ELISA Kit
檢測樣本類型：血清、血漿（EDTA/檸檬酸鹽/肝素）、組織勻漿、細(xì)胞上清、尿液等
規(guī)格：96T/48T（可檢測約90或46個樣本，含標(biāo)準(zhǔn)品孔）
保存條件：2–8℃冷藏，避光保存
有效期：6個月
檢測原理
采用雙抗體夾心法ELISA：
酶標(biāo)板預(yù)先包被抗兔HSP70特異性抗體；
加入待測樣本或標(biāo)準(zhǔn)品，樣本中的HSP70與抗體結(jié)合；
洗滌后加入酶標(biāo)檢測抗體，形成“固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體”復(fù)合物；
顯色反應(yīng)后，酶標(biāo)儀450nm測定吸光度，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算HSP70濃度。
主要組成
組分 規(guī)格（96T） 說明
預(yù)包被酶標(biāo)板 1塊（96孔） 抗體包被，即用型
標(biāo)準(zhǔn)品 6瓶（凍干品） 用于標(biāo)準(zhǔn)曲線
酶標(biāo)抗體 1瓶（120μL） HRP標(biāo)記，需稀釋
樣本稀釋液 1×20ml 即用型
洗滌緩沖液 1×20ml（濃縮） 使用前稀釋25倍
底物A、B 各10ml 避光保存，現(xiàn)配現(xiàn)用
終止液 1×10ml 強(qiáng)酸，小心操作
封板膜 1張 一次性使用，防污染
樣本處理
血清/血漿/組織勻漿/細(xì)胞上清：采集后1000×g離心10–20分鐘，取上清立即檢測或–70℃保存，避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)：避免溶血與高血脂樣本，操作需嚴(yán)格遵循說明書。
性能指標(biāo)
檢測范圍：0.156-10 ng/mL（不同品牌有所差異）
靈敏度：最低可檢測0.057 ng/mL
特異性：不與其它熱休克蛋白或細(xì)胞因子發(fā)生交叉反應(yīng)
重復(fù)性：板內(nèi)變異<10%，板間變異<15%
線性相關(guān)性：R2≥0.92
操作要點(diǎn)
所有試劑使用前需平衡至室溫（20–25℃）；
標(biāo)準(zhǔn)品和樣本建議做復(fù)孔；
顯色反應(yīng)避光進(jìn)行，終止后15分鐘內(nèi)讀數(shù)；
標(biāo)準(zhǔn)曲線采用四參數(shù)Logistic回歸或線性擬合；
濃度結(jié)果如進(jìn)行了樣本稀釋，需乘以稀釋倍數(shù)。
常見問題解答 (FAQ)
Q1: 為什么要做“復(fù)孔”？
A: 建議每個樣本（包括標(biāo)準(zhǔn)品）都做復(fù)孔（2-3個孔）。這樣可以計算平均值，減少操作誤差，提高數(shù)據(jù)的可信度。
Q2: 樣本需要稀釋嗎？
A: 是的。如果樣本濃度過高，超出了標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢測范圍，需要根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行適當(dāng)稀釋。計算最終濃度時，記得乘以稀釋倍數(shù)。
Q3: 結(jié)果出現(xiàn)“花板”（背景不均）怎么辦？
A: 可能原因包括：洗板不干凈、溫育溫度不均、加樣時產(chǎn)生氣泡、或者試劑（如底物）受光照分解。請檢查洗板機(jī)是否堵塞，確保溫育箱溫度恒定。
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如何驗(yàn)證試劑盒的特異性？（實(shí)操建議）：
稀釋線性實(shí)驗(yàn) (Linearity)：
操作： 將高濃度的陽性樣本用稀釋液進(jìn)行梯度稀釋（如1:2, 1:4, 1:8...）。
預(yù)期： 測得的濃度值與稀釋倍數(shù)應(yīng)呈良好的線性關(guān)系（相關(guān)系數(shù) R2 ≥ 0.98）。如果線性不好，說明樣本基質(zhì)中有干擾物影響了特異性結(jié)合。
干擾實(shí)驗(yàn) (Interference Test)：
操作： 在已知濃度的目標(biāo)抗原溶液中，加入高濃度的潛在干擾物（如高濃度的脂質(zhì)或結(jié)構(gòu)類似物），檢測其對結(jié)果的影響。
預(yù)期： 若檢測值與理論值偏差在±10%以內(nèi)，說明抗干擾能力強(qiáng)，特異性好。
回收實(shí)驗(yàn) (Recovery Test)：
操作： 在樣本中加入已知量的標(biāo)準(zhǔn)品，檢測總含量，計算回收率。
預(yù)期： 回收率在80%-120%之間，說明試劑盒能準(zhǔn)確識別目標(biāo)，不受樣本背景干擾。
關(guān)鍵字： 兔;HSP70 ;ELISA試劑盒;
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