產(chǎn)品介紹:

兔ICAM-3 ELISA試劑盒用于定量檢測兔血清、血漿、組織勻漿、細胞培養(yǎng)上清等樣本中的細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)含量,采用雙抗體夾心法,具有高靈敏度和特異性。
產(chǎn)品名稱 | 兔ICAM-3elisa試劑盒 | 英文名稱 | Rabbit ICAM-3 ELISA Kit |
規(guī)格 | 48T/96T | 貨號 | A130068 |
1. 檢測原理
微孔板預包被抗兔ICAM-3抗體,樣本中的ICAM-3與抗體結(jié)合,再加入酶標檢測抗體,形成“抗體-抗原-酶標抗體”復合物。加入TMB底物顯色,顏色深淺與樣本中ICAM-3濃度成正相關(guān)。

2. 主要組成

預包被抗體的微孔板
酶標抗體
標準品
TMB顯色液
終止液
洗滌液
封板膜
3. 操作步驟

將標準品和樣本加入微孔,37℃孵育30-60分鐘
洗滌3-5次,拍干
加酶標抗體,37℃孵育60分鐘
洗滌,拍干
加TMB顯色液,避光反應(yīng)10-15分鐘
加終止液,酶標儀450nm讀數(shù)
4. 樣本處理與保存
血清、血漿、組織勻漿、細胞上清均可檢測
避免反復凍融,分裝后-20℃或-70℃保存
試劑盒2-8℃保存,標準品和酶標抗體避免凍融
5. 應(yīng)用領(lǐng)域

用于兔免疫調(diào)節(jié)、細胞粘附、炎癥反應(yīng)及腫瘤轉(zhuǎn)移等研究。
主要優(yōu)點缺點

維度 優(yōu)勢 (Pros) 劣勢 (Cons)
檢測性能 靈敏度極高,特異性強,結(jié)果準確 可能存在交叉反應(yīng),易受干擾物影響
操作體驗 流程標準化,無需昂貴設(shè)備,適合高通量檢測 步驟多且繁瑣,耗時較長,對操作技巧有要求
經(jīng)濟成本 適合大批量樣本檢測,長期看性價比尚可 單次試劑成本較高,且不同批次可能存在差異
應(yīng)用范圍 可檢測血清、血漿、細胞上清等多種樣本 對樣本質(zhì)量(如是否溶血)敏感
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試劑與樣本準備階段
溫度平衡(最容易被忽視的點)
操作: 從冰箱取出的試劑盒(包括標準品、酶標試劑、樣品等)必須在室溫(18-25℃)下平衡 30 分鐘。
后果: 冷試劑直接使用會導致孔內(nèi)溫差,產(chǎn)生冷凝水或非特異性背景,嚴重影響 OD 值。
試劑配制
洗滌液: 濃縮洗滌液如果在低溫下保存可能會有結(jié)晶析出。配制時必須確保結(jié)晶完全溶解并混勻。
現(xiàn)用現(xiàn)配: 酶標試劑和顯色液(如 TMB)對光和熱敏感,建議在使用前配制工作液,避免失效。
樣本處理
避免溶血: 血清樣本如果發(fā)生溶血(紅細胞破裂),會釋放過氧化物酶,導致假陽性或背景過高。
離心去雜質(zhì): 血液或細胞上清樣本在加樣前最好進行離心,去除沉淀和懸浮物,防止堵塞孔底或干擾讀數(shù)。
稀釋倍數(shù): 如果樣本濃度過高,超出標準曲線范圍,必須進行預實驗確定稀釋倍數(shù)。計算結(jié)果時記得乘以稀釋倍數(shù)。
關(guān)鍵字: 兔;ICAM-3;ELISA試劑盒;
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