兔MIP-3αelisa試劑盒
產(chǎn)品簡介:
兔MIP-3α ELISA試劑盒是一種專為定量檢測(cè)兔血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞上清液等生物樣本中巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)含量而設(shè)計(jì)的試劑盒,廣泛應(yīng)用于炎癥、免疫、腫瘤及感染等領(lǐng)域的科學(xué)研究。
英文名稱 | Rabbit MIP-3α ELISA Kit | 產(chǎn)品類別 | Rabbit/兔Elisa試劑盒 |
貨號(hào) | A130077 | 規(guī)格 | 48T/96T |
1. 檢測(cè)原理
采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(Sandwich ELISA):
酶標(biāo)板微孔預(yù)先包被抗兔MIP-3α特異性抗體;
樣本中的MIP-3α與固相抗體結(jié)合,加入酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體后形成免疫復(fù)合物;
加入顯色底物(如TMB),酶催化反應(yīng)使溶液顯色,顏色深淺與MIP-3α濃度成正比;
用酶標(biāo)儀在450 nm波長測(cè)定吸光度,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。

2. 主要組成
預(yù)包被微孔板(96孔或48孔)
酶標(biāo)檢測(cè)抗體(HRP-抗MIP-3α)
標(biāo)準(zhǔn)品(用于繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線)
樣品稀釋液、洗滌液、底物液、終止液
封板膜、說明書
3. 檢測(cè)步驟(簡要)
將標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣本加入微孔,37℃孵育1小時(shí);
洗滌微孔板,去除未結(jié)合物質(zhì);
加入酶標(biāo)抗體,37℃孵育1小時(shí);
再次洗滌,加入底物液,避光顯色;
加終止液,酶標(biāo)儀讀數(shù),依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。
4. 保存與注意事項(xiàng)
試劑盒2-8℃保存,有效期6個(gè)月,避免反復(fù)凍融和陽光直射;
樣本如需長期保存,建議分裝后于-20℃或-80℃冷凍;
檢測(cè)前需將試劑恢復(fù)至室溫,嚴(yán)格按說明書操作,避免交叉污染。
應(yīng)用領(lǐng)域
免疫調(diào)節(jié)、炎癥與腫瘤機(jī)制研究
感染性疾病及相關(guān)因子檢測(cè)
藥物開發(fā)與療效評(píng)價(jià)等領(lǐng)域。
總結(jié):
兔MIP-3α ELISA試劑盒是研究兔MIP-3α表達(dá)及炎癥、免疫等相關(guān)疾病機(jī)制的高效、特異工具,操作簡便,靈敏度高,結(jié)果可靠,適合科研用戶在免疫、炎癥、腫瘤等領(lǐng)域開展應(yīng)用。
常見問題解答 (FAQ)
Q1: 為什么要做“復(fù)孔”?
A: 建議每個(gè)樣本(包括標(biāo)準(zhǔn)品)都做復(fù)孔(2-3個(gè)孔)。這樣可以計(jì)算平均值,減少操作誤差,提高數(shù)據(jù)的可信度。
Q2: 樣本需要稀釋嗎?
A: 是的。如果樣本濃度過高,超出了標(biāo)準(zhǔn)曲線的檢測(cè)范圍,需要根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行適當(dāng)稀釋。計(jì)算最終濃度時(shí),記得乘以稀釋倍數(shù)。
Q3: 結(jié)果出現(xiàn)“花板”(背景不均)怎么辦?
A: 可能原因包括:洗板不干凈、溫育溫度不均、加樣時(shí)產(chǎn)生氣泡、或者試劑(如底物)受光照分解。請(qǐng)檢查洗板機(jī)是否堵塞,確保溫育箱溫度恒定。
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如何驗(yàn)證試劑盒的特異性?(實(shí)操建議):
稀釋線性實(shí)驗(yàn) (Linearity):
操作: 將高濃度的陽性樣本用稀釋液進(jìn)行梯度稀釋(如1:2, 1:4, 1:8...)。
預(yù)期: 測(cè)得的濃度值與稀釋倍數(shù)應(yīng)呈良好的線性關(guān)系(相關(guān)系數(shù) R2 ≥ 0.98)。如果線性不好,說明樣本基質(zhì)中有干擾物影響了特異性結(jié)合。
干擾實(shí)驗(yàn) (Interference Test):
操作: 在已知濃度的目標(biāo)抗原溶液中,加入高濃度的潛在干擾物(如高濃度的脂質(zhì)或結(jié)構(gòu)類似物),檢測(cè)其對(duì)結(jié)果的影響。
預(yù)期: 若檢測(cè)值與理論值偏差在±10%以內(nèi),說明抗干擾能力強(qiáng),特異性好。
回收實(shí)驗(yàn) (Recovery Test):
操作: 在樣本中加入已知量的標(biāo)準(zhǔn)品,檢測(cè)總含量,計(jì)算回收率。
預(yù)期: 回收率在80%-120%之間,說明試劑盒能準(zhǔn)確識(shí)別目標(biāo),不受樣本背景干擾。
關(guān)鍵字: 兔;MIP-3α;ELISA試劑盒;
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