串珠鐮刀菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱(chēng) | 串珠鐮刀菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱(chēng) | Fusarium verticillioides Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR3997 |
產(chǎn)品特點(diǎn)
即開(kāi)即用：用戶(hù)僅需提供樣品DNA模板，無(wú)需額外配制主反應(yīng)混合液。
高靈敏度與特異性：采用染料法熒光定量PCR技術(shù)，可精準(zhǔn)檢測(cè)串珠鐮刀菌核酸。
標(biāo)準(zhǔn)化操作：預(yù)混反應(yīng)體系，減少人為誤差。
試劑盒組成
2×qPCR MagicMix（含熒光染料）：500 μL/管（棕色管）
熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液：1 mL/瓶（黃蓋）
串珠鐮刀菌特異性引物混合物：100 μL/管（白蓋）
陽(yáng)性對(duì)照（1×10^8 拷貝/μL）：50 μL/管（紅蓋）
使用手冊(cè)：1份
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 樣本制備
建議使用配套基因組DNA提取試劑盒，具體方法參見(jiàn)提取試劑盒說(shuō)明書(shū)。
2. 試劑配制與加樣
解凍所有試劑，短暫離心后混勻。
按每反應(yīng)孔加入10 μL 2×qPCR MagicMix、0.8 μL引物混合物、0.2 μL模板稀釋液，最后加入2 μL模板DNA（陰性對(duì)照用無(wú)菌水，陽(yáng)性對(duì)照用試劑盒提供標(biāo)準(zhǔn)品）。
3. PCR擴(kuò)增
程序設(shè)置：預(yù)變性95℃ 5分鐘；40個(gè)循環(huán)（95℃ 15秒，60℃ 30秒，72℃ 30秒）；熔解曲線分析。
4. 結(jié)果分析
定量檢測(cè)：通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線（陽(yáng)性對(duì)照Ct值）計(jì)算待測(cè)樣本拷貝數(shù)。
熔解曲線應(yīng)呈現(xiàn)單一峰，確保擴(kuò)增特異性。
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)分區(qū)操作（樣本處理、試劑配制、擴(kuò)增區(qū)），避免交叉污染。
反應(yīng)液需避光保存，加樣時(shí)避免氣泡。
使用一次性耗材，實(shí)驗(yàn)后消毒工作臺(tái)（75%酒精或紫外照射）。
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