鼠疫耶爾森菌 plagene探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 鼠疫耶爾森菌 plagene探針?lè)晒舛縋CR試劑盒 | 英文名稱 | Yersinia pestis plagene Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR4640 |
產(chǎn)品概述
本產(chǎn)品是基于探針?lè)晒舛?/span>PCR技術(shù)開(kāi)發(fā)的專門用于檢測(cè)鼠疫耶爾森菌(Yersinia pestis)的試劑盒。鼠疫耶爾森菌又稱鼠疫桿菌，是引起鼠疫的病原體，屬于我國(guó)法定的甲類傳染病病原體，具有高度傳染性和致病性。
產(chǎn)品特點(diǎn)
即開(kāi)即用型：用戶只需提供待測(cè)DNA模板即可進(jìn)行檢測(cè)
高靈敏度：引物和探針經(jīng)過(guò)優(yōu)化設(shè)計(jì)，檢測(cè)靈敏度顯著提高
特異性強(qiáng)：針對(duì)鼠疫耶爾森菌高度保守基因區(qū)域設(shè)計(jì)，避免與其他病原體交叉反應(yīng)
質(zhì)量控制：提供陽(yáng)性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性結(jié)果
雙重應(yīng)用：既可用于定性檢測(cè)，也可用于定量分析，定量線性范圍達(dá)5個(gè)數(shù)量級(jí)
穩(wěn)定保存：-20℃條件下可保存一年
產(chǎn)品規(guī)格
產(chǎn)品規(guī)格：50次反應(yīng)（20μL體系/次）
保存條件：-20℃避光保存
有效期：12個(gè)月
試劑盒組分
2×Probe qPCR預(yù)混液
熒光PCR專用模板稀釋液
鼠疫耶爾森菌特異性qPCR引物混合液
鼠疫耶爾森菌特異性qPCR探針
陽(yáng)性對(duì)照(1×10?拷貝/μL)
實(shí)驗(yàn)操作流程
樣本DNA制備
使用常規(guī)DNA提取方法純化樣品DNA
建議設(shè)置樣品制備陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照
標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（定量檢測(cè)時(shí)需進(jìn)行）
標(biāo)記6個(gè)離心管(7-2號(hào))
每管加入45μL稀釋液
從高濃度到低濃度進(jìn)行10倍系列稀釋，獲得6個(gè)梯度濃度的標(biāo)準(zhǔn)品
所有操作需在獨(dú)立區(qū)域進(jìn)行，避免交叉污染
反應(yīng)體系配制（20μL體系）
| 成分 | 體積 |
|------|------|
| 2×Probe qPCR預(yù)混液 | 10μL |
| 引物混合液 | 2μL |
| 探針 | 0.5μL |
| 模板DNA | 2μL |
| 無(wú)核酸酶水 | 補(bǔ)至20μL |
PCR擴(kuò)增程序
預(yù)變性：95℃ 5分鐘
擴(kuò)增循環(huán)(40個(gè)循環(huán))：
95℃ 15秒
60℃ 1分鐘（采集熒光信號(hào)）
數(shù)據(jù)分析
結(jié)果判讀
定量分析
以標(biāo)準(zhǔn)品濃度的對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)，Ct值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
根據(jù)樣品Ct值計(jì)算待測(cè)DNA濃度
定性分析
陽(yáng)性對(duì)照：Ct值<30，有明顯指數(shù)增長(zhǎng)曲線
陰性對(duì)照：Ct值>40或無(wú)Ct值
樣品判定：
Ct值<38：陽(yáng)性
Ct值>40：陰性
38≤Ct值≤40：建議復(fù)檢
注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品僅限科研使用，不可用于臨床診斷
操作時(shí)需嚴(yán)格分區(qū)，避免污染
陽(yáng)性對(duì)照需單獨(dú)存放，防止污染其他組分
建議在專業(yè)實(shí)驗(yàn)室由受過(guò)培訓(xùn)的人員操作
不同儀器可能需要優(yōu)化反應(yīng)條件
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關(guān)鍵字： 鼠疫耶爾森菌 plagene;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
派瑞曼pyram?是上海博湖生物科技有限公司（Shanghai Bohu Biological Technology Co., Ltd.，China）的產(chǎn)品品牌。
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