煙草花葉病毒探針?lè)晒舛?/span>RT-PCR試劑盒

商品屬性

產(chǎn)品概述

本試劑盒用于檢測(cè)煙草花葉病毒（Tobacco Mosaic Virus, TMV）的RNA，采用探針?lè)晒舛縍T-PCR技術(shù)，具有高靈敏度和特異性，適用于科研領(lǐng)域的定性或定量分析。

產(chǎn)品組成

| 成分編號(hào) | 成分名稱 | 規(guī)格 |

| 試劑一 | 探針?lè)╭RT-PCR緩沖液 | 500 μL |

| 試劑二 | 探針?lè)╭RT-PCR酶混合液 | 50/100 μL |

| 試劑三 | 熒光PCR專用模板稀釋液 | 1 mL |

| 試劑四 | PCR引物-探針混合液 | 50/100 μL |

| 試劑五 | PCR陽(yáng)性對(duì)照（1×10?/1×10?拷貝/μL） | 50 μL |

| 使用手冊(cè) | 詳細(xì)操作指南 | 1份 |

儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。

實(shí)驗(yàn)流程

1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品制備（10倍梯度稀釋）

標(biāo)記6/7個(gè)離心管（如7-2號(hào)或6-1號(hào)）。

每管加入45 μL稀釋液，依次用陽(yáng)性對(duì)照進(jìn)行梯度稀釋（如1×10?→1×10?→…→1×102拷貝/μL）。

稀釋需在獨(dú)立區(qū)域操作，避免交叉污染。

2. 樣品RNA提取

建議設(shè)置N+2個(gè)樣本（含陽(yáng)性對(duì)照PC和陰性對(duì)照NC）。

使用兼容的RNA提取試劑盒或本試劑盒配套的核酸釋放劑（部分產(chǎn)品提供試用裝）。

3. qRT-PCR反應(yīng)體系（20 μL）

| 成分 | 樣品管（N+2） | 陰性對(duì)照 | 標(biāo)準(zhǔn)曲線管 |

| qRT-PCR緩沖液 | 10 μL | 10 μL | 10 μL |

| 酶混合液 | 2 μL | 2 μL | 2 μL |

| 引物-探針混合液 | 2-3 μL | 2-3 μL | 2-3 μL |

| RNA模板/標(biāo)準(zhǔn)品/水 | 5-7 μL | 5-7 μL水 | 5-7 μL標(biāo)準(zhǔn)品 |

4. PCR擴(kuò)增程序

| 步驟 | 溫度 | 時(shí)間 |

| 逆轉(zhuǎn)錄 | 42-50℃ | 10-30 min |

| 預(yù)變性 | 94-95℃ | 3-10 min |

| 擴(kuò)增（40-45循環(huán)） | 95℃ | 15 sec |

| | 60℃ | 1 min（采集FAM信號(hào)） |

數(shù)據(jù)分析

定量檢測(cè)：以陽(yáng)性對(duì)照log濃度為橫軸、Ct值為縱軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算待測(cè)樣本濃度。

定性檢測(cè)：

陰性對(duì)照Ct≥40，陽(yáng)性對(duì)照Ct≤39且呈典型擴(kuò)增曲線。

待測(cè)樣本Ct≤39為陽(yáng)性，≥40為陰性；39-40間需復(fù)測(cè)。

注意事項(xiàng)

嚴(yán)格分區(qū)操作（樣本處理、試劑配制、擴(kuò)增），避免污染。

使用帶濾芯槍頭，反應(yīng)液避光保存，避免氣泡。

實(shí)驗(yàn)后用10%次氯酸或75%酒精消毒臺(tái)面及移液器。

所有廢棄物按生物安全規(guī)范處理。

公司正在出售的產(chǎn)品