產(chǎn)品概述

本試劑盒采用探針法熒光定量PCR技術(shù)，專用于玉竹（Rhizoma polygonati odorati）的快速、高靈敏鑒定。適用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷。

產(chǎn)品特點(diǎn)

即開即用：用戶僅需提供樣品DNA/RNA模板。

高靈敏性與特異性：引物及探針針對(duì)玉竹高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，避免與其他微生物核酸交叉反應(yīng)。

雙重檢測(cè)功能：支持定性與定量分析，定量線性范圍達(dá)5個(gè)數(shù)量級(jí)（10^1–10^6拷貝/μL）。

內(nèi)置對(duì)照：提供無(wú)傳染性陽(yáng)性對(duì)照（1×10^8拷貝/μL），便于區(qū)分假陰性結(jié)果。

兼容性：適配多數(shù)市售DNA/RNA提取試劑盒。

規(guī)格與成分

| 編號(hào) | 成分 | 規(guī)格（50次反應(yīng)） |

| 試劑一 | 2×Probe qPCR MagicMix | 500 μL |

| 試劑二 | 玉竹qPCR引物混合液 | 100 μL |

| 試劑三 | 熒光PCR專用模板稀釋液 | 1 mL |

| 試劑四 | 玉竹qPCR探針（FAM標(biāo)記） | 50 μL |

| 試劑五 | 陽(yáng)性對(duì)照（1×10^8拷貝/μL）| 50 μL |

| 附 件 | 使用說(shuō)明書 | 1份 |

運(yùn)輸與保存

運(yùn)輸條件：低溫運(yùn)輸（-20℃冰袋）。

保存條件：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。

實(shí)驗(yàn)步驟

標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（10倍梯度稀釋）

標(biāo)記6管，依次加入45 μL稀釋液。

首管加入5 μL陽(yáng)性對(duì)照，震蕩混勻得10^7拷貝/μL標(biāo)準(zhǔn)品，依次稀釋至10^2拷貝/μL。

樣品制備

設(shè)置N+2個(gè)樣本（含陰/陽(yáng)性對(duì)照），推薦使用柱式提取法純化DNA/RNA。

PCR反應(yīng)體系（20 μL/管）

| 成分 | 樣品管 | 陰性對(duì)照 | 標(biāo)準(zhǔn)曲線管 |

| 2×Probe qPCR MagicMix | 10 μL | 10 μL | 10 μL |

| 引物混合液 | 2 μL | 2 μL | 2 μL |

| 探針 | 1 μL | 1 μL | 1 μL |

| 模板DNA/RNA | 7 μL | — | — |

| 超純水 | — | 7 μL | — |

| 標(biāo)準(zhǔn)品 | — | — | 7 μL |

PCR程序

| 步驟 | 溫度 | 時(shí)間 |

| 預(yù)變性 | 95℃ | 3 min |

| 40循環(huán)（擴(kuò)增） | 95℃ | 15 sec |

| | 60℃ | 1 min（采集熒光） |

數(shù)據(jù)分析

定量檢測(cè)：以標(biāo)準(zhǔn)曲線log值為橫軸，Ct值為縱軸，計(jì)算樣本濃度。

定性檢測(cè)：

陰性：Ct≥40；陽(yáng)性：Ct≤35（35–40需復(fù)測(cè)）。

陽(yáng)性對(duì)照需Ct≤30且擴(kuò)增曲線典型。

注意事項(xiàng)

分區(qū)操作：樣本處理、試劑配制、擴(kuò)增需獨(dú)立區(qū)域，避免污染。

質(zhì)量控制：每次實(shí)驗(yàn)需包含陰/陽(yáng)性對(duì)照。

廢棄物處理：實(shí)驗(yàn)后使用10%次氯酸或75%乙醇消毒臺(tái)面及器材。

局限性：結(jié)果受樣本保存、提取效率及病原體變異影響，需結(jié)合其他檢測(cè)方法驗(yàn)證。

聲明：本產(chǎn)品僅限科研使用。

公司正在出售的產(chǎn)品