馬鈴薯源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 馬鈴薯源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Potato-derived Component Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR4813 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒基于探針法熒光定量PCR技術(shù)，專用于檢測樣品中馬鈴薯（Solanum tuberosum）源性成分的核酸。通過特異性引物和探針設(shè)計，結(jié)合實時熒光信號監(jiān)測，實現(xiàn)高靈敏度、高特異性的定性和定量分析，適用于食品、加工制品及科研樣本的檢測。
產(chǎn)品組成
探針法qRT-PCR緩沖液（500 μL）
探針法qRT-PCR酶混合液（50 μL）
熒光PCR專用模板稀釋液（1 mL）
PCR引物-探針干粉（50次反應(yīng)）
PCR陽性對照（10^7拷貝/μL，50 μL）
技術(shù)參數(shù)
檢測方法：探針法熒光定量PCR（TaqMan探針）
檢測范圍：定性及定量（線性范圍≥5個數(shù)量級）
反應(yīng)體系：20 μL/反應(yīng)，共50次檢測
靈敏度：可檢測低至10拷貝/μL的靶標核酸
特異性：與常見微生物及植物源性成分無交叉反應(yīng)
操作流程
1. 標準曲線制備（定量檢測需執(zhí)行）
使用陽性對照進行10倍梯度稀釋（10^6~10^1拷貝/μL），獨立操作避免污染。
2. 樣本DNA提取
推薦使用商業(yè)化DNA提取試劑盒，需設(shè)置陰/陽性對照。
3. PCR反應(yīng)設(shè)置
按比例混合試劑，加入模板DNA，設(shè)置擴增程序：
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 10 min（如需）
預(yù)變性：95℃ 10 min
擴增循環(huán)：95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec（40循環(huán)，F(xiàn)AM通道采集信號）
4. 數(shù)據(jù)分析
定量分析：以標準曲線計算樣本拷貝數(shù)。
定性分析：Ct≤39為陽性，Ct≥40為陰性，39<Ct<40需復(fù)測。
樣本要求與保存
樣本類型：食品、加工品、原料等。
保存條件：短期-20℃，長期-70℃（避免反復(fù)凍融＞3次）；運輸需2~8℃冰袋。
注意事項
分區(qū)操作（樣本處理、試劑配制、擴增），避免交叉污染。
使用帶濾芯吸頭，實驗后徹底清潔臺面（10%次氯酸或75%乙醇）。
試劑解凍后需渦旋混勻并離心，避光保存。
陽性對照需獨立稀釋區(qū)操作，防止氣溶膠污染。
局限性
檢測結(jié)果受樣本質(zhì)量、提取效率及操作規(guī)范影響。
基因突變或重組可能導(dǎo)致假陰性；污染可能導(dǎo)致假陽性。
有效期與儲存
有效期：12個月（-20℃避光保存）。
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