產(chǎn)品介紹:

核心技術(shù)參數(shù)與性能
檢測(cè)原理:
基于TaqMan探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)。
針對(duì)牛巴氏桿菌(Pasteurella multocida)的特異性基因序列設(shè)計(jì)引物和探針,進(jìn)行體外擴(kuò)增檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 牛巴氏桿菌(PB)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
產(chǎn)品分類 | 熒光PCR |
規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | AP3708 |
檢測(cè)范圍與靈敏度:
檢測(cè)范圍: 通常為 2×103 ~ 1×10? copies/mL。
最低檢測(cè)限: 大多數(shù)試劑盒可達(dá) 1×103 copies/mL,具有極高的靈敏度。
特異性:
特異性強(qiáng),不與其他常見的動(dòng)物病原菌(如大腸桿菌、沙門氏菌等)發(fā)生交叉反應(yīng)。
檢測(cè)類型:
可用于核酸的定性檢測(cè)(判斷陰陽(yáng)性)或定量檢測(cè)(計(jì)算病毒載量)。
3. 試劑盒組成與操作關(guān)鍵點(diǎn)

典型試劑組成:
反應(yīng)液: 含引物和探針(25T規(guī)格通常為500μL×1管)。
酶液: Taq酶等(25T規(guī)格通常為25μL×1管)。
陽(yáng)性質(zhì)控品: 用于驗(yàn)證試劑盒有效性(通常為10E8拷貝/μL)。
陰性質(zhì)控品: 無(wú)菌水,用于排除污染。
操作流程簡(jiǎn)述:
樣本處理: 采集病牛的血液、組織(肺、肝、脾)或鼻腔拭子,提取基因組DNA。
試劑配制: 將反應(yīng)液與酶液按比例混合,分裝到PCR管中。
加樣: 分別加入提取好的DNA模板、陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照。
PCR擴(kuò)增: 在熒光定量PCR儀上運(yùn)行程序(通常包括預(yù)變性、變性、退火延伸等步驟)。
結(jié)果分析:
陽(yáng)性: Ct值小于等于35(或40,視說(shuō)明書而定),且有典型的擴(kuò)增曲線。
陰性: Ct值大于等于40,且無(wú)擴(kuò)增曲線。
4. 采購(gòu)與使用注意事項(xiàng)

儲(chǔ)存條件: 所有組分需在 -20℃ 條件下保存,避免反復(fù)凍融。
有效期: 通常為 12個(gè)月。
用途限制: 絕大多數(shù)此類產(chǎn)品標(biāo)注為“僅供科研使用”或“獸醫(yī)體外診斷”,不能用于臨床治療。
防污染: 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需嚴(yán)格分區(qū)操作,防止擴(kuò)增產(chǎn)物污染環(huán)境導(dǎo)致假陽(yáng)性。
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通用操作流程與注意事項(xiàng):

1. 樣本制備
使用核酸提取試劑盒純化DNA/RNA,需設(shè)置陽(yáng)性、陰性對(duì)照。
關(guān)鍵點(diǎn):避免交叉污染,陽(yáng)性對(duì)照單獨(dú)存放。
2. 反應(yīng)體系配置
常規(guī)PCR:引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。
qPCR:需額外加入探針或染料。
3. 擴(kuò)增程序
常規(guī)PCR:
預(yù)變性→循環(huán)擴(kuò)增→延伸
qPCR:
預(yù)變性→循環(huán)擴(kuò)增(熒光采集)
4. 結(jié)果判讀
常規(guī)PCR:電泳觀察條帶大?。ㄈ珀?yáng)性對(duì)照需出現(xiàn)預(yù)期條帶)。
qPCR:Ct值≤35為陽(yáng)性,陰性對(duì)照無(wú)信號(hào)。
關(guān)鍵字: 牛巴氏桿菌;PB ;核酸檢測(cè)試劑盒;熒光PCR;
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