產品介紹:

核心技術參數與性能
檢測原理:
基于實時熒光定量PCR(qPCR)技術,通常采用TaqMan探針法。
針對小反芻獸疫病毒(PPRV)的保守基因區(qū)域(如N基因、F基因或P基因)設計特異性引物和探針。
產品名稱 | 小反芻獸疫病毒(PPRV)核酸檢測試劑盒(熒光PCR法) |
產品分類 | 熒光PCR |
規(guī)格 | 50T |
貨號 | AP3736 |
檢測范圍與靈敏度:
檢測范圍: 通常為 2×103 ~ 1×10? copies/mL。
最低檢測限: 大多數試劑盒可達 1×103 copies/mL,部分產品靈敏度可達 4 copies/μL。
分型能力:
通用型試劑盒: 檢測所有PPRV毒株(野毒株+疫苗株)。
分型試劑盒: 可區(qū)分疫苗株(如Nigeria 75/1)與野毒株,通常采用雙重熒光PCR技術(不同熒光通道標記)。
標準操作流程 (SOP) 關鍵點

樣本類型:
適用標本: 病羊的全血(EDTA抗凝)、血清、組織(如脾臟、淋巴結)、眼鼻拭子或口咽刮取物。
核酸提?。?/span>
需自備病毒RNA提取試劑盒。PPRV為單股負鏈RNA病毒,提取后需反轉錄為cDNA再進行PCR擴增(部分試劑盒含反轉錄酶)。
試劑配制與加樣:
對照設置: 必須設置陰性對照(無菌水)和陽性對照(試劑盒提供,通常為質?;驕缁畈《荆?。
反應體系: 通常為20μL或25μL體系。
熒光PCR擴增:
熒光通道: 選擇 FAM 通道(或根據試劑盒說明書指定的染料)。
程序設置(參考):
預變性:95℃ 3-5min
循環(huán)反應(40-45個循環(huán)):95℃ 10-15sec -> 55℃-60℃ 30-40sec(收集熒光)。
結果判定:
陽性: Ct值 ≤ 35-40,且擴增曲線呈典型的“S”型指數增長。
陰性: Ct值 ≥ 40,且無典型擴增曲線。
采購與使用注意事項

儲存條件: 大多數試劑盒需在 -20℃ 條件下避光保存,避免反復凍融。
有效期: 一般為 12個月。
僅限科研/檢測: 絕大多數此類產品標注為“僅用于科研實驗”或“獸醫(yī)體外診斷”,嚴禁用于臨床醫(yī)療或人用。
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通用操作流程與注意事項:

1. 樣本制備
使用核酸提取試劑盒純化DNA/RNA,需設置陽性、陰性對照。
關鍵點:避免交叉污染,陽性對照單獨存放。
2. 反應體系配置
常規(guī)PCR:引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。
qPCR:需額外加入探針或染料。
3. 擴增程序
常規(guī)PCR:
預變性→循環(huán)擴增→延伸
qPCR:
預變性→循環(huán)擴增(熒光采集)
4. 結果判讀
常規(guī)PCR:電泳觀察條帶大?。ㄈ珀栃詫φ招璩霈F預期條帶)。
qPCR:Ct值≤35為陽性,陰性對照無信號。
關鍵字: 小反芻獸疫病毒;PPRV ;核酸檢測試劑盒;熒光PCR法;
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