產(chǎn)品介紹：

這是一種用于檢測犬瘟熱病毒（Canine Distemper Virus, CDV）的高靈敏度分子診斷試劑，廣泛應用于寵物醫(yī)院、獸醫(yī)診斷實驗室及毛皮動物養(yǎng)殖業(yè)（狐、貉、貂等）。

1. 核心用途與背景 ??

針對疾?。喝翢幔?/span>Canine Distemper, CD），一種由副黏病毒科病毒引起的急性、高度接觸性傳染病。死亡率高達30%~80%，可感染犬科（犬、狼、狐）、鼬科（貂、雪貂）、浣熊科等多種食肉動物。

檢測靶標：試劑盒通常針對CDV基因組中的保守序列設計引物和探針。常見的靶標基因包括：

N基因（核衣殼蛋白基因）：最常用，保守性強，適合廣譜檢測。

H基因（血凝素蛋白基因）或F基因（融合蛋白基因）：用于特定毒株分型或疫苗株鑒別。

適用樣本：適用于全血（抗凝）、鼻咽拭子、眼分泌物、尿液、組織病料（肺、脾、淋巴結(jié)等）。

2. 檢測原理與技術(shù) ??

技術(shù)方法：實時熒光定量RT-PCR法（TaqMan探針法）。

原理：由于CDV是RNA病毒，試劑盒通常包含逆轉(zhuǎn)錄（RT）步驟。在反應體系中，首先將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，隨后在Taq酶作用下進行PCR擴增。特異性TaqMan探針（標記FAM熒光素）在擴增過程中被切斷，釋放熒光信號，儀器實時監(jiān)測熒光值變化。

一步法 vs 兩步法：市面上主流為一步法試劑盒，即逆轉(zhuǎn)錄和PCR擴增在同一反應管中進行，操作簡便，污染風險低。

3. 主要性能參數(shù) ??

性能指標  參數(shù)詳情  備注

檢測限  102 - 103 拷貝/反應  靈敏度極高，可檢出早期感染

特異性  100%  不與犬細小病毒、犬冠狀病毒等其他犬類病原體交叉反應

檢測時間  約 60 - 90 分鐘  含逆轉(zhuǎn)錄及擴增過程

包裝規(guī)格  25T / 48T / 50T  T代表測試次數(shù)

儲存條件  -20℃  避光保存，避免反復凍融

有效期  12個月  具體以產(chǎn)品說明書為準

5. 結(jié)果判讀標準 ??

陽性（+）：

FAM熒光通道出現(xiàn)典型的S型擴增曲線。

Ct值 ≤ 35（部分廠家標準為38）。

結(jié)論：樣本中檢出犬瘟熱病毒核酸。

陰性（-）：

FAM通道無Ct值，或Ct值 > 38，且無指數(shù)增長期。

無效實驗：

陽性對照未擴增（Ct值 > 35）。

陰性對照出現(xiàn)擴增曲線。

溫馨提示

鑒別診斷：犬瘟熱臨床癥狀（如雙相熱、呼吸道癥狀、神經(jīng)癥狀）復雜，易與犬細小病毒病、傳染性肝炎等混淆，建議結(jié)合臨床癥狀和其他病原檢測綜合判斷。

疫苗干擾：弱毒疫苗接種后可能會在短時間內(nèi)導致PCR檢測呈陽性（通常Ct值較大），需結(jié)合免疫史判斷。若需區(qū)分野毒感染與疫苗免疫，可選用針對特定基因（如H基因）的分型試劑盒。

公司正在出售的產(chǎn)品：

通用操作流程與注意事項：

1. 樣本制備

使用核酸提取試劑盒純化DNA/RNA，需設置陽性、陰性對照。

關(guān)鍵點：避免交叉污染，陽性對照單獨存放。

2. 反應體系配置

常規(guī)PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。

qPCR：需額外加入探針或染料。

3. 擴增程序

常規(guī)PCR：

預變性→循環(huán)擴增→延伸

qPCR：

預變性→循環(huán)擴增（熒光采集）

4. 結(jié)果判讀

常規(guī)PCR：電泳觀察條帶大?。ㄈ珀栃詫φ招璩霈F(xiàn)預期條帶）。

qPCR：Ct值≤35為陽性，陰性對照無信號。