產(chǎn)品介紹：
這是一種用于檢測(cè)犬瘟熱病毒（Canine Distemper Virus, CDV）的高靈敏度分子診斷試劑，廣泛應(yīng)用于寵物醫(yī)院、獸醫(yī)診斷實(shí)驗(yàn)室及毛皮動(dòng)物養(yǎng)殖業(yè)（狐、貉、貂等）。
產(chǎn)品名稱 | 犬瘟熱病毒(CDV)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法) |
產(chǎn)品分類 | 熒光PCR |
規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | AP3738 |
1. 核心用途與背景 ??
針對(duì)疾?。喝翢幔?/span>Canine Distemper, CD），一種由副黏病毒科病毒引起的急性、高度接觸性傳染病。死亡率高達(dá)30%~80%，可感染犬科（犬、狼、狐）、鼬科（貂、雪貂）、浣熊科等多種食肉動(dòng)物。
檢測(cè)靶標(biāo)：試劑盒通常針對(duì)CDV基因組中的保守序列設(shè)計(jì)引物和探針。常見(jiàn)的靶標(biāo)基因包括：
N基因（核衣殼蛋白基因）：最常用，保守性強(qiáng)，適合廣譜檢測(cè)。
H基因（血凝素蛋白基因）或F基因（融合蛋白基因）：用于特定毒株分型或疫苗株鑒別。
適用樣本：適用于全血（抗凝）、鼻咽拭子、眼分泌物、尿液、組織病料（肺、脾、淋巴結(jié)等）。
2. 檢測(cè)原理與技術(shù) ??
技術(shù)方法：實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR法（TaqMan探針?lè)ǎ?/span>
原理：由于CDV是RNA病毒，試劑盒通常包含逆轉(zhuǎn)錄（RT）步驟。在反應(yīng)體系中，首先將病毒RNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，隨后在Taq酶作用下進(jìn)行PCR擴(kuò)增。特異性TaqMan探針（標(biāo)記FAM熒光素）在擴(kuò)增過(guò)程中被切斷，釋放熒光信號(hào)，儀器實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光值變化。
一步法 vs 兩步法：市面上主流為一步法試劑盒，即逆轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增在同一反應(yīng)管中進(jìn)行，操作簡(jiǎn)便，污染風(fēng)險(xiǎn)低。
3. 主要性能參數(shù) ??
性能指標(biāo) 參數(shù)詳情 備注
檢測(cè)限 102 - 103 拷貝/反應(yīng) 靈敏度極高，可檢出早期感染
特異性 100% 不與犬細(xì)小病毒、犬冠狀病毒等其他犬類病原體交叉反應(yīng)
檢測(cè)時(shí)間 約 60 - 90 分鐘 含逆轉(zhuǎn)錄及擴(kuò)增過(guò)程
包裝規(guī)格 25T / 48T / 50T T代表測(cè)試次數(shù)
儲(chǔ)存條件 -20℃ 避光保存，避免反復(fù)凍融
有效期 12個(gè)月 具體以產(chǎn)品說(shuō)明書為準(zhǔn)
5. 結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn) ??
陽(yáng)性（+）：
FAM熒光通道出現(xiàn)典型的S型擴(kuò)增曲線。
Ct值 ≤ 35（部分廠家標(biāo)準(zhǔn)為38）。
結(jié)論：樣本中檢出犬瘟熱病毒核酸。
陰性（-）：
FAM通道無(wú)Ct值，或Ct值 > 38，且無(wú)指數(shù)增長(zhǎng)期。
無(wú)效實(shí)驗(yàn)：
陽(yáng)性對(duì)照未擴(kuò)增（Ct值 > 35）。
陰性對(duì)照出現(xiàn)擴(kuò)增曲線。
溫馨提示
鑒別診斷：犬瘟熱臨床癥狀（如雙相熱、呼吸道癥狀、神經(jīng)癥狀）復(fù)雜，易與犬細(xì)小病毒病、傳染性肝炎等混淆，建議結(jié)合臨床癥狀和其他病原檢測(cè)綜合判斷。
疫苗干擾：弱毒疫苗接種后可能會(huì)在短時(shí)間內(nèi)導(dǎo)致PCR檢測(cè)呈陽(yáng)性（通常Ct值較大），需結(jié)合免疫史判斷。若需區(qū)分野毒感染與疫苗免疫，可選用針對(duì)特定基因（如H基因）的分型試劑盒。
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通用操作流程與注意事項(xiàng)：
1. 樣本制備
使用核酸提取試劑盒純化DNA/RNA，需設(shè)置陽(yáng)性、陰性對(duì)照。
關(guān)鍵點(diǎn)：避免交叉污染，陽(yáng)性對(duì)照單獨(dú)存放。
2. 反應(yīng)體系配置
常規(guī)PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。
qPCR：需額外加入探針或染料。
3. 擴(kuò)增程序
常規(guī)PCR：
預(yù)變性→循環(huán)擴(kuò)增→延伸
qPCR：
預(yù)變性→循環(huán)擴(kuò)增（熒光采集）
4. 結(jié)果判讀
常規(guī)PCR：電泳觀察條帶大?。ㄈ珀?yáng)性對(duì)照需出現(xiàn)預(yù)期條帶）。
qPCR：Ct值≤35為陽(yáng)性，陰性對(duì)照無(wú)信號(hào)。
關(guān)鍵字： 犬瘟熱病毒;CDV ;核酸檢測(cè)試劑盒;熒光PCR法;
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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、 華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。
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