產(chǎn)品介紹：

流行性造血器官壞死病毒（EHNV）核酸檢測試劑盒（熒光PCR法）是一種用于體外定性檢測樣本中流行性造血器官壞死病毒（Epizootic Hematopoietic Necrosis Virus, EHNV）核酸的診斷工具。該病毒屬于虹彩病毒科，是導致某些魚類（如赤鱸、虹鱒等）出現(xiàn)嚴重出血、貧血及高死亡率的主要病原之一。

檢測原理

該試劑盒通?；?/span>TaqMan探針法實時熒光定量PCR（qPCR）技術，部分產(chǎn)品也可能采用染料法。其檢測流程如下：

核酸提?。?/span> 從疑似感染魚類的組織樣本（如脾臟、腎臟、肝胰腺等）中提取總DNA。EHNV是一種DNA病毒。

熒光PCR擴增： 這是核心檢測環(huán)節(jié)。

引物與探針設計： 試劑盒中含有針對EHNV基因組保守區(qū)域（如主要衣殼蛋白基因或特異性序列）設計的特異性引物和熒光標記的探針（如FAM通道）。

內參系統(tǒng)（部分試劑盒）： 為了監(jiān)控樣本提取和擴增過程是否正常，部分先進試劑盒會設置內參系統(tǒng)（如HEX/VIC通道），同步檢測樣本中的內源性基因（如β-actin基因）。

信號檢測： 在PCR擴增過程中，如果樣本中含有EHNV DNA，探針會被特異性切斷，釋放出熒光信號。儀器實時監(jiān)測熒光信號的增長情況，從而判斷樣本中是否含有病毒核酸。

主要用途

該試劑盒主要用于以下幾個方面：

臨床疫病診斷： 輔助診斷由EHNV引起的魚類出血性、高致死性傳染病，幫助水產(chǎn)獸醫(yī)快速鎖定病因。

水產(chǎn)養(yǎng)殖監(jiān)測： 用于養(yǎng)殖場的日常監(jiān)測和疫情預警，及時發(fā)現(xiàn)帶毒魚群，防止疫情暴發(fā)。

進出口檢疫與生物安保： 用于進出口魚類及其產(chǎn)品的病毒檢疫，防止病毒的跨境傳播。

科研與流行病學調查： 廣泛應用于相關病毒學研究、疫苗研發(fā)及病毒流行趨勢的監(jiān)測。

方法優(yōu)勢

相較于傳統(tǒng)的病毒分離培養(yǎng)或普通PCR檢測，熒光PCR法具有顯著優(yōu)勢：

高特異性： 通過特異性引物和探針設計，只針對EHNV進行檢測，與其他魚類病毒（如IHNV、IPNV等）無交叉反應，結果準確可靠。

高靈敏度： 能夠檢測出樣本中極低含量的病毒核酸（部分產(chǎn)品檢測限可達10 copies/μL），有助于在感染早期或潛伏期做出準確判斷。

快速高效： 整個檢測過程通常在1-2小時內完成，適合對大量樣本進行快速、批量的高通量檢測。

操作安全： 采用閉管檢測模式，擴增后無需開蓋處理，大大降低了擴增產(chǎn)物污染導致假陽性結果的風險。

公司正在出售的產(chǎn)品：

通用操作流程與注意事項：

1. 樣本制備

使用核酸提取試劑盒純化DNA/RNA，需設置陽性、陰性對照。

關鍵點：避免交叉污染，陽性對照單獨存放。

2. 反應體系配置

常規(guī)PCR：引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA。

qPCR：需額外加入探針或染料。

3. 擴增程序

常規(guī)PCR：

預變性→循環(huán)擴增→延伸

qPCR：

預變性→循環(huán)擴增（熒光采集）

4. 結果判讀

常規(guī)PCR：電泳觀察條帶大?。ㄈ珀栃詫φ招璩霈F(xiàn)預期條帶）。

qPCR：Ct值≤35為陽性，陰性對照無信號。