重組表達(dá)原理：
基因克隆?：從?；蚪M中獲取CST3基因的編碼序列（對(duì)應(yīng)氨基酸31–148），插入含有啟動(dòng)子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。
?宿主表達(dá)?：將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG誘導(dǎo)下啟動(dòng)蛋白表達(dá)。該系統(tǒng)成本低、表達(dá)效率高，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
?蛋白純化?：利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合，實(shí)現(xiàn)高純度（>95%）蛋白回收，再經(jīng)透析或凝膠過(guò)濾去除雜質(zhì)。
?凍干保存?：加入海藻糖作為保護(hù)劑，凍干后可長(zhǎng)期穩(wěn)定儲(chǔ)存，復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
產(chǎn)品概述：
Recombinant Human GABARAP（人源GABA(A)受體相關(guān)蛋白重組蛋白）是一種在大腸桿菌中表達(dá)的、帶有N端His標(biāo)簽的重組蛋白，作為ATG8自噬相關(guān)蛋白家族成員，主要用于研究其在自噬體成熟、GABA(A)受體運(yùn)輸及神經(jīng)信號(hào)傳導(dǎo)中的分子機(jī)制。
產(chǎn)品名 | Recombinant Human GABARAP | 分子量 | 34.6 kDa |
表達(dá)區(qū)間 | 1-117 | 貨號(hào) | XG-DB2020 |
別名
ATG8A, FLC 3B, FLC3B, FLJ25768, GABA type A receptor associated protein, GABA(A) receptor associated protein, GABA(A) receptor-associated protein, GABARAP, GABARAP a, Gamma aminobutyric acid receptor associated protein, Gamma-aminobutyric acid receptor-associated protein, GBRAP_HUMAN, MGC120154, MGC120155, MM 46, MM46
宿主; E.Coli
表達(dá)區(qū)間; 1-117
分子量; 34.6 kDa
標(biāo)簽; N-terminal His-IF2DI Tag
純度; Greater than 90% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲(chǔ); The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
科研中使用時(shí)的注意事項(xiàng)：
如果你是在實(shí)驗(yàn)室使用重組蛋白，有幾個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)需要注意：
避免反復(fù)凍融：重組蛋白對(duì)溫度敏感，反復(fù)凍融會(huì)導(dǎo)致蛋白變性失活。建議收到產(chǎn)品后進(jìn)行分裝保存。
載體蛋白：有些重組蛋白制劑中會(huì)添加牛血清白蛋白（BSA）作為保護(hù)劑，以提高穩(wěn)定性。
但在某些特定實(shí)驗(yàn)（如動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)）中，如果不想引入外源動(dòng)物蛋白，就需要選擇“無(wú)載體”的產(chǎn)品。
活性：重組蛋白的價(jià)值在于其“生物活性”，購(gòu)買時(shí)需關(guān)注其比活性（Specific Activity）數(shù)據(jù)。
哪里發(fā)揮作用？：
重組蛋白技術(shù)是現(xiàn)代生物技術(shù)的基石，應(yīng)用范圍極廣：
?? 生物制藥（核心應(yīng)用）：
治療藥物：比如治療糖尿病的胰島素、治療貧血的促紅素、治療癌癥的單克隆抗體、以及血友病治療用的凝血因子。
疫苗：例如重組新冠疫苗，就是利用重組技術(shù)生產(chǎn)病毒的特定蛋白（如RBD蛋白）來(lái)激發(fā)免疫反應(yīng)。
最新突破：近期國(guó)內(nèi)在重組人血白蛋白領(lǐng)域取得了重大進(jìn)展，利用酵母或水稻生產(chǎn)的人血白蛋白已成功完成Ⅲ期臨床試驗(yàn)，
這有望替代傳統(tǒng)的血漿提取白蛋白，解決來(lái)源短缺和安全風(fēng)險(xiǎn)問(wèn)題。
?? 科研與診斷：
作為細(xì)胞因子或生長(zhǎng)因子，用于干細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞誘導(dǎo)分化。
作為抗原或酶，用于開發(fā)ELISA試劑盒、化學(xué)發(fā)光診斷等體外診斷（IVD）產(chǎn)品。
存儲(chǔ)條件：
凍干狀態(tài)?: 存儲(chǔ)于-20°C以下，可穩(wěn)定保存長(zhǎng)達(dá)12個(gè)月。
?復(fù)溶后?: 在2-8°C下可保存1個(gè)月，需保持無(wú)菌環(huán)境。
?注意事項(xiàng)?: 避免反復(fù)凍融，以防止蛋白降解或活性損失。
公司正在出售的產(chǎn)品：
甘油磷酸二酯酶磷酸結(jié)構(gòu)域4抗體 | PEST含核蛋白抗體 |
軸索過(guò)度生長(zhǎng)抑制因子B受體抗體 | 組織短鏈乙酰乙酰硫解酶（acetoacetyl-CoA thiolase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 |
絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶KPI2抗體 | 活體細(xì)胞半胱12（CASPASE-12）活性原位熒光染色檢測(cè)試劑盒 |
Endokinin-A/B抗體 | 冰凍切片組織CASPASE-2蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒 |
冰凍切片糖原高碘酸希爾（PAS）法染色試劑盒 | NF KAPPA B P65蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 |
細(xì)胞HHV6-A（HUMAN HERPESVIRUS 6-A）病毒 | 通用型1毫升1厘米光徑石英比色皿 |
組織WEE1激酶活性定量檢測(cè)試劑盒（A/B/C） | 絡(luò)絲蛋白抗體 |
體外非細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞色素P450亞酶2C9（TOBUTAMIDE）活性 | 蛋白酪氨酸磷酸酶2抗體 |
細(xì)胞基質(zhì)金屬（MMP-7）活性熒光定量檢測(cè)試劑盒 | 氧固醇結(jié)合蛋白樣3抗體 |
5’末端DNA探針同位素（[γ32P]ATP）激酶標(biāo)記試劑盒 | APC-Cy7標(biāo)記人CD33單克隆抗體 |
12號(hào)染色體開放閱讀框68抗體 | 離子型谷氨酸受體1抗體 |
雙參數(shù)細(xì)胞周期S期流式細(xì)胞分析試劑盒 | Recombinant Human GABARAP白三烯A4水解酶抗體 |
極光激酶A相互作用蛋白1抗體 | INTS4L1蛋白抗體 |
關(guān)鍵字： GABARAP;34.6 kDa; 1-117;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實(shí)驗(yàn)室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動(dòng)化技術(shù)，包括實(shí)驗(yàn)室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動(dòng)化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺(tái)。不斷為各行業(yè)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學(xué)、檢驗(yàn)檢測(cè)、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實(shí)驗(yàn)室完整解決方案。本著幫助用戶實(shí)現(xiàn)“讓科研場(chǎng)所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實(shí)驗(yàn)室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活，能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。