操作要點：
電泳條件?：使用15% SDS-PAGE凝膠，以提高對小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
?轉膜參數?：采用濕轉法，100 V、60–90分鐘（4°C），使用PVDF膜（需甲醇預活化）。
?抗體選擇?：
一抗：抗CST3多克隆抗體（如兔源抗體），推薦稀釋比為1:1000。
二抗：HRP標記的山羊抗兔IgG，稀釋比1:10,000。
?顯色方式?：ECL化學發(fā)光法，預期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內參建議?：由于CST3分子量較小，可選用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作為內參，避免條帶重疊。
產品概述：
Recombinant Human Hephaestin（重組人膜鐵氧化酶）是一種在大腸桿菌或哺乳動物細胞中表達的高純度重組蛋白，作為跨膜多銅氧化酶，它在催化亞鐵離子氧化以促進鐵從腸上皮細胞向轉鐵蛋白轉運中發(fā)揮核心作用，是研究鐵代謝機制、缺鐵性貧血病理及膜蛋白結構的重要工具。
產品名 | Recombinant Human Hephaestin | 分子量 | 17.2 kDa |
表達區(qū)間 | 968-1124 | 貨號 | XG-DB2206 |
別名
CPL, Heph, HEPH_HUMAN, Hephaestin
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 968-1124
分子量; 17.2 kDa
標簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用說明：
復溶方法?: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液（pH 7.4）溶解凍干粉，輕輕混勻至完全溶解。
?應用建議?:
?實驗用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測，作為抗原或標準品。
?濃度調整?: 根據實驗需求稀釋，避免高濃度導致非特異性結合。
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護目鏡，遵循實驗室生物安全規(guī)范。
重組表達原理：
基因克隆?：從?；蚪M中獲取CST3基因的編碼序列（對應氨基酸31–148），插入含有啟動子、篩選標記和His標簽序列的質粒載體。
?宿主表達?：將重組質粒轉化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG誘導下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高，適合大規(guī)模生產。
?蛋白純化?：利用His標簽與鎳柱親和層析結合，實現高純度（>95%）蛋白回收，再經透析或凝膠過濾去除雜質。
?凍干保存?：加入海藻糖作為保護劑，凍干后可長期穩(wěn)定儲存，復溶后保持天然構象和生物活性。
公司正在出售的產品：
干擾素-gamma受體2/干擾素-gamma受體β/IFN-γRβ抗體 | PE標記人CD47單克隆抗體 |
轉錄起始因子RAP30抗體 | 細菌剛果紅負性染色試劑盒 |
髓易位基因相關蛋白1抗體 | 核固紅復染試劑盒 |
EXOSC4蛋白抗體 | 冰凍切片組織PDGF-B蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 |
體液結構型內皮細胞一氧化氮合成酶（cNOS/NOS3/eNOS）活性熒光定量檢測試劑盒 | CASPASE-6蛋白表達西方雜交分析試劑盒 |
組織HPV7（HUMAN PAPILLOMAVIRUS-7）病毒定性檢測試劑盒 | 3’末端DNA探針同位素（[α32P]dATP）轉移酶標記試劑盒 |
細胞PKCε激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） | 免疫調節(jié)蛋白AIRE抗體 |
海鮮食物海藻糖比色法定量檢測試劑盒 | 蛋白酶激活復合物亞基1抗體 |
細胞C-MET激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） | 煙堿型乙酰膽堿受體α7抗體 |
動物硬組織可溶性膜蛋白相位分離制備試劑盒 | 6-磷酸山梨醇脫氫酶抗體 |
AF680標記的骨成型蛋白受體1A抗體 | 賴氨酸，天冬氨酸，谷氨酸，亮氨酸相關序列抗體 |
PROPIDIUM IODIDE簡易細胞核形態(tài)染色試劑盒 | Recombinant Human HephaestinZNFX1蛋白抗體 |
激肽釋放酶抑制劑抗體 | G蛋白信號轉導調節(jié)因子10抗體 |
重組蛋白生產流程：
通常包括以下幾個核心步驟：
基因克?。菏紫?，科學家需要獲取編碼目標蛋白的特定基因序列（目的基因）。
構建載體：將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中，這個載體就像是一個運輸工具，
能將目的基因送入宿主細胞并指導其表達。
轉入宿主：將構建好的重組載體導入選定的宿主細胞中，這個過程稱為“轉化”或“轉染”。
表達與培養(yǎng)：宿主細胞在適宜的條件下進行大規(guī)模培養(yǎng)，其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息，開始大量生產目標蛋白。
純化：通過一系列復雜的生物化學方法（如層析技術），將目標重組蛋白從宿主細胞的眾多混合物中分離出來，以獲得高純度的產品。
關鍵字： Hephaestin;17.2 kDa; 968-1124;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領域，利用互聯(lián)網、數據分析及自動化技術，包括實驗室固定資產、儀器設備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產品、技術服務、免疫學和分子學產品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產品領域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構通用性高、適應性好、模塊搭配靈活，能快速響應客戶需求的產品。