操作要點:

電泳條件?:使用15% SDS-PAGE凝膠,以提高對小分子量蛋白(~13.4 kDa)的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?:采用濕轉(zhuǎn)法,100 V、60–90分鐘(4°C),使用PVDF膜(需甲醇預(yù)活化)。
?抗體選擇?:
一抗:抗CST3多克隆抗體(如兔源抗體),推薦稀釋比為1:1000。
二抗:HRP標記的山羊抗兔IgG,稀釋比1:10,000。
?顯色方式?:ECL化學發(fā)光法,預(yù)期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議?:由于CST3分子量較小,可選用GAPDH(~37 kDa)或β-actin(~42 kDa)作為內(nèi)參,避免條帶重疊。
產(chǎn)品概述:

Recombinant Human IGF2(人胰島素樣生長因子2重組蛋白)是一種在大腸桿菌中高效表達的高純度重組蛋白,作為關(guān)鍵的有絲分裂原細胞因子,通過結(jié)合IGF-1受體促進多種組織(如骨骼、肌肉、神經(jīng))的細胞增殖與分化,在胚胎發(fā)育、代謝研究及腫瘤發(fā)生機制探索中扮演重要角色。
產(chǎn)品名 | Recombinant Human IGF2 | 分子量 | 7.3 kDa |
表達區(qū)間 | 25-91 | 貨號 | XG-DB2322 |
別名
C11orf43, IGF 2, IGF II, IGF-II, IGF2, IGF2_HUMAN, IGFII, INSIGF, Insulin like Growth Factor 2, insulin like growth factor 2 (somatomedin A), Insulin like growth factor II, Insulin like growth factor II precursor, Insulin like growth factor type 2, pp9974, Preptin, putative insulin like growth factor II associated protein, Somatomedin A, Somatomedin-A
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 25-91
分子量; 7.3 kDa
標簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用說明:

復(fù)溶方法?: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液(pH 7.4)溶解凍干粉,輕輕混勻至完全溶解。
?應(yīng)用建議?:
?實驗用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測,作為抗原或標準品。
?濃度調(diào)整?: 根據(jù)實驗需求稀釋,避免高濃度導(dǎo)致非特異性結(jié)合。
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護目鏡,遵循實驗室生物安全規(guī)范。
重組表達原理:

基因克隆?:從?;蚪M中獲取CST3基因的編碼序列(對應(yīng)氨基酸31–148),插入含有啟動子、篩選標記和His標簽序列的質(zhì)粒載體。
?宿主表達?:將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli(如BL21菌株),在IPTG誘導(dǎo)下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高,適合大規(guī)模生產(chǎn)。
?蛋白純化?:利用His標簽與鎳柱親和層析結(jié)合,實現(xiàn)高純度(>95%)蛋白回收,再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
?凍干保存?:加入海藻糖作為保護劑,凍干后可長期穩(wěn)定儲存,復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
公司正在出售的產(chǎn)品:

干擾素調(diào)節(jié)因子6抗體 | PE標記人HLA-DR單克隆抗體 |
自噬相關(guān)蛋白10抗體 | PH3-4顯色(METHYL ORANGE)指示溶液 |
脫氧核糖核酸酶2B抗體 | 透射電鏡(TEM)銅質(zhì)載網(wǎng) |
FAM118B蛋白抗體 | BCL2蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒 |
植物還原型甘肽(GSH)濃度高效液相色譜定量檢測試劑盒 | 石蠟切片組織TSH-BETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒 |
小量藍藻菌基因組DNA氯化銫萃取試劑盒 | Ral鳥苷酸酶活性分析試劑盒 |
細胞AX1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C) | 內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1抗體 |
啤酒糟β-葡聚糖含量熒光定量檢測試劑盒 | 電壓門控離子通道蛋白TPGS1抗體 |
細胞Src激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C) | 誘導(dǎo)協(xié)同刺激分子配體CD275抗體 |
磷酸二酯酶1A(Phosphodiesterase 1A) | 4-羥基壬烯醛抗體 |
AF680標記的磷脂酸磷酸酶2b抗體 | 磷酸二酯酶6α抗體 |
植物樣品亞細胞結(jié)構(gòu)分離試劑盒 | Recombinant Human IGF2β晶體體蛋白A4/βA4-crystallin抗體 |
間隙連接蛋白26/GJB2抗體 | KIAA0753蛋白抗體 |
重組蛋白生產(chǎn)流程:
通常包括以下幾個核心步驟:
基因克?。菏紫?,科學家需要獲取編碼目標蛋白的特定基因序列(目的基因)。
構(gòu)建載體:將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中,這個載體就像是一個運輸工具,
能將目的基因送入宿主細胞并指導(dǎo)其表達。
轉(zhuǎn)入宿主:將構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入選定的宿主細胞中,這個過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達與培養(yǎng):宿主細胞在適宜的條件下進行大規(guī)模培養(yǎng),其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息,開始大量生產(chǎn)目標蛋白。
純化:通過一系列復(fù)雜的生物化學方法(如層析技術(shù)),將目標重組蛋白從宿主細胞的眾多混合物中分離出來,以獲得高純度的產(chǎn)品。
關(guān)鍵字: IGF2;7.3 kDa; 25-91;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù),包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學和分子學產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。