操作要點(diǎn)：
電泳條件?：使用15% SDS-PAGE凝膠，以提高對(duì)小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?：采用濕轉(zhuǎn)法，100 V、60–90分鐘（4°C），使用PVDF膜（需甲醇預(yù)活化）。
?抗體選擇?：
一抗：抗CST3多克隆抗體（如兔源抗體），推薦稀釋比為1:1000。
二抗：HRP標(biāo)記的山羊抗兔IgG，稀釋比1:10,000。
?顯色方式?：ECL化學(xué)發(fā)光法，預(yù)期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議?：由于CST3分子量較小，可選用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作為內(nèi)參，避免條帶重疊。
產(chǎn)品概述：
Recombinant Human IL-36 alpha（重組人白介素-36α）是一種在大腸桿菌中表達(dá)的高純度科研蛋白，作為IL-1細(xì)胞因子家族的促炎成員，它通過結(jié)合IL-36R受體激活NF-κB和MAPK信號(hào)通路，在銀屑病等炎癥性疾病的發(fā)病機(jī)制及免疫調(diào)節(jié)研究中具有重要價(jià)值。
產(chǎn)品名 | Recombinant Human IL36 alpha | 分子量 | 17.3 kDa |
表達(dá)區(qū)間 | 1-158 | 貨號(hào) | XG-DB2369 |
別名
FIL1, FIL1 epsilon, FIL1(EPSILON), FIL1E, IL 1 epsilon, IL 1F6, IL 1H1, IL-1 epsilon, IL-1F6, IL1E, IL1F6, IL1F6_HUMAN, IL1RP2, IL36 alpha, IL36A, Interleukin 1 epsilon, Interleukin 1 family member 6, Interleukin 1 family member 6 (epsilon), Interleukin 36 alpha, Interleukin-1 epsilon, Interleukin-1 family member 6, MGC129552, MGC129553, MGC151479, MGC151481, OTTMUSP00000012798, RP23-176J12.4
宿主; E.Coli
表達(dá)區(qū)間; 1-158
分子量; 17.3 kDa
標(biāo)簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲(chǔ); The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用說明：
復(fù)溶方法?: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液（pH 7.4）溶解凍干粉，輕輕混勻至完全溶解。
?應(yīng)用建議?:
?實(shí)驗(yàn)用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測，作為抗原或標(biāo)準(zhǔn)品。
?濃度調(diào)整?: 根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求稀釋，避免高濃度導(dǎo)致非特異性結(jié)合。
?安全提示?: 操作時(shí)需佩戴手套和護(hù)目鏡，遵循實(shí)驗(yàn)室生物安全規(guī)范。
重組表達(dá)原理：
基因克隆?：從?；蚪M中獲取CST3基因的編碼序列（對(duì)應(yīng)氨基酸31–148），插入含有啟動(dòng)子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。
?宿主表達(dá)?：將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG誘導(dǎo)下啟動(dòng)蛋白表達(dá)。該系統(tǒng)成本低、表達(dá)效率高，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
?蛋白純化?：利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合，實(shí)現(xiàn)高純度（>95%）蛋白回收，再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
?凍干保存?：加入海藻糖作為保護(hù)劑，凍干后可長期穩(wěn)定儲(chǔ)存，復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
公司正在出售的產(chǎn)品：
干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白3抗體 | PE標(biāo)記小鼠CD24單克隆抗體 |
轉(zhuǎn)錄因子WSTF抗體 | 植物甘露糖6-磷酸異構(gòu)酶（mannose－6－phosphate isomerase；MPI）電泳分析試劑盒 |
同源異型盒基因HOXA5蛋白抗體 | 冰凍切片制片處理OCT包埋液 |
FAM13C1蛋白抗體 | 石蠟切片組織COLLAGEN III蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒 |
石蠟切片神經(jīng)組織金屬鋅蒂姆（TIMM）染色試劑盒 | 細(xì)胞IGF 蛋白表達(dá)熒光定量檢測試劑盒 |
裂解液IX：真菌/酵母細(xì)胞超強(qiáng)裂解液 | RNA探針聚合酶標(biāo)記試劑盒 |
組織TRKB激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） | 囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)的蛋白B |
飲料果糖激酶法定量檢測試劑盒 | 蛋白質(zhì)磷酸酶2調(diào)節(jié)亞基5D/PP2A-B56-δ抗體 |
細(xì)胞CHK2激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） | 異質(zhì)核糖核蛋白H抗體 |
細(xì)胞可溶性膜蛋白（粗提）制備試劑盒 | APC-Cy5.5標(biāo)記小鼠CD19單克隆抗體 |
FITC標(biāo)記人CD45單克隆抗體 | 淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)酸受體抗體 |
超氧化物歧化酶（SOD）細(xì)菌裂解樣品制備試劑盒 | Recombinant Human IL36 alphaα輔助因子44抗體 |
甲狀旁腺激素相關(guān)蛋白抗體 | G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子5抗體 |
重組蛋白生產(chǎn)流程：
通常包括以下幾個(gè)核心步驟：
基因克?。菏紫?，科學(xué)家需要獲取編碼目標(biāo)蛋白的特定基因序列（目的基因）。
構(gòu)建載體：將目的基因插入到一個(gè)被稱為“載體”的DNA分子中，這個(gè)載體就像是一個(gè)運(yùn)輸工具，
能將目的基因送入宿主細(xì)胞并指導(dǎo)其表達(dá)。
轉(zhuǎn)入宿主：將構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入選定的宿主細(xì)胞中，這個(gè)過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達(dá)與培養(yǎng)：宿主細(xì)胞在適宜的條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)，其自身的遺傳系統(tǒng)會(huì)讀取重組載體上的基因信息，開始大量生產(chǎn)目標(biāo)蛋白。
純化：通過一系列復(fù)雜的生物化學(xué)方法（如層析技術(shù)），將目標(biāo)重組蛋白從宿主細(xì)胞的眾多混合物中分離出來，以獲得高純度的產(chǎn)品。
關(guān)鍵字： IL36 alpha;17.3 kDa; 1-158;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實(shí)驗(yàn)室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動(dòng)化技術(shù)，包括實(shí)驗(yàn)室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動(dòng)化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺(tái)。不斷為各行業(yè)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學(xué)、檢驗(yàn)檢測、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實(shí)驗(yàn)室完整解決方案。本著幫助用戶實(shí)現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實(shí)驗(yàn)室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活，能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。