操作要點：
電泳條件?：使用15% SDS-PAGE凝膠，以提高對小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?：采用濕轉(zhuǎn)法，100 V、60–90分鐘（4°C），使用PVDF膜（需甲醇預(yù)活化）。
?抗體選擇?：
一抗：抗CST3多克隆抗體（如兔源抗體），推薦稀釋比為1:1000。
二抗：HRP標(biāo)記的山羊抗兔IgG，稀釋比1:10,000。
?顯色方式?：ECL化學(xué)發(fā)光法，預(yù)期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議?：由于CST3分子量較小，可選用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作為內(nèi)參，避免條帶重疊。
產(chǎn)品概述：
Recombinant Human Xg blood group 是一種在大腸桿菌中表達(dá)的重組人源蛋白，作為XG血型系統(tǒng)的抗原（Xga），主要用于科研中作為標(biāo)記物研究X染色體連鎖性狀及血液學(xué)相關(guān)機制。
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human Xg blood group
別名; Glycoprotein Xg, MGC118758, MGC118759, MGC118760, MGC118761, PBDX, Protein PBDX, XG, XG glycoprotein, XG_HUMAN
宿主; E.Coli
表達(dá)區(qū)間; 22-142
分子量; 13.2 kDa
標(biāo)簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% as determined by SDS-PAGE
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用說明：
復(fù)溶方法?: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液（pH 7.4）溶解凍干粉，輕輕混勻至完全溶解。
?應(yīng)用建議?:
?實驗用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測，作為抗原或標(biāo)準(zhǔn)品。
?濃度調(diào)整?: 根據(jù)實驗需求稀釋，避免高濃度導(dǎo)致非特異性結(jié)合。
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護(hù)目鏡，遵循實驗室生物安全規(guī)范。
重組表達(dá)原理：
基因克隆?：從?；蚪M中獲取CST3基因的編碼序列（對應(yīng)氨基酸31–148），插入含有啟動子、篩選標(biāo)記和His標(biāo)簽序列的質(zhì)粒載體。
?宿主表達(dá)?：將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG誘導(dǎo)下啟動蛋白表達(dá)。該系統(tǒng)成本低、表達(dá)效率高，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
?蛋白純化?：利用His標(biāo)簽與鎳柱親和層析結(jié)合，實現(xiàn)高純度（>95%）蛋白回收，再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
?凍干保存?：加入海藻糖作為保護(hù)劑，凍干后可長期穩(wěn)定儲存，復(fù)溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
公司正在出售的產(chǎn)品：
骨/軟骨蛋白多糖1抗體 | PRELP蛋白抗體 |
轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子C/EBP β抗體 | 12號染色體開放閱讀框42抗體 |
肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶FKBP10抗體 | 細(xì)胞脂蛋白脂酶活性比色法定量檢測試劑盒 |
跨膜蛋白204抗體 | 限制性片段長度多態(tài)性（RFLP）基因分析試劑專題 |
組織鈣（CALPAIN）活性熒光定量檢測試劑盒 | 細(xì)胞EGFR 蛋白表達(dá)比色法定量檢測試劑盒 |
細(xì)胞磷脂酶B（Phospholipase B）活性比色法定量檢測試劑盒 | 細(xì)胞總高氯酸萘醌（PAN）染色試劑盒 |
明膠法小鼠胚胎干細(xì)胞繁殖試劑盒 | 癌/睪丸抗原105抗體 |
同位素標(biāo)記放射活性離心柱檢測試劑盒 | Kelch樣蛋白17抗體 |
細(xì)胞色素P450亞酶CYP3A（END）活性比色法定量檢測試劑盒 | F-box蛋白相關(guān)蛋白11抗體 |
組織O鏈接硫酸酯化糖胺多糖（O-sGAG）含量阿爾新藍(lán)（alcian blue）比色法定量檢測試劑盒 | 毛細(xì)管形態(tài)發(fā)生蛋白1抗體 |
TRP高效液相色譜電化學(xué)定量檢測試劑盒 | 單純皰疹病毒HSV1 GE包膜蛋白抗體 |
石蠟切片組織BCL2蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 | Recombinant Human Xg blood group胰島細(xì)胞自身抗原相關(guān)蛋白PTPRN2抗體 |
環(huán)指蛋白39抗體 | APC標(biāo)記人CD33單克隆抗體 |
重組蛋白生產(chǎn)流程：
通常包括以下幾個核心步驟：
基因克?。菏紫?，科學(xué)家需要獲取編碼目標(biāo)蛋白的特定基因序列（目的基因）。
構(gòu)建載體：將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中，這個載體就像是一個運輸工具，
能將目的基因送入宿主細(xì)胞并指導(dǎo)其表達(dá)。
轉(zhuǎn)入宿主：將構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入選定的宿主細(xì)胞中，這個過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達(dá)與培養(yǎng)：宿主細(xì)胞在適宜的條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)，其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息，開始大量生產(chǎn)目標(biāo)蛋白。
純化：通過一系列復(fù)雜的生物化學(xué)方法（如層析技術(shù)），將目標(biāo)重組蛋白從宿主細(xì)胞的眾多混合物中分離出來，以獲得高純度的產(chǎn)品。
關(guān)鍵字： Xg blood group;13.2 kDa; 22-142;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù)，包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學(xué)、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活，能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。