操作要點：
電泳條件?：使用15% SDS-PAGE凝膠，以提高對小分子量蛋白（~13.4 kDa）的分辨率。
?轉(zhuǎn)膜參數(shù)?：采用濕轉(zhuǎn)法，100 V、60–90分鐘（4°C），使用PVDF膜（需甲醇預活化）。
?抗體選擇?：
一抗：抗CST3多克隆抗體（如兔源抗體），推薦稀釋比為1:1000。
二抗：HRP標記的山羊抗兔IgG，稀釋比1:10,000。
?顯色方式?：ECL化學發(fā)光法，預期條帶位于?~13.4 kDa?處。
?內(nèi)參建議?：由于CST3分子量較小，可選用GAPDH（~37 kDa）或β-actin（~42 kDa）作為內(nèi)參，避免條帶重疊。
產(chǎn)品概述：
它全稱為重組人酰基輔酶A合成酶家族成員5（Recombinant Human Acyl-CoA Synthetase Medium-Chain Family Member 5），通常用于科學研究，以幫助科學家研究該蛋白的結(jié)構(gòu)、功能及其在代謝等生物過程中的作用。
產(chǎn)品名稱; Recombinant Human ACSM5
別名; Acsm5, ACSM5_HUMAN, Acyl CoA synthetase medium chain family member 5, Acyl coenzyme A synthetase ACSM5, mitochondrial, Acyl-coenzyme A synthetase ACSM5, FLJ20581, MACS3, mitochondrial
宿主; E.Coli
表達區(qū)間; 80-315
分子量; 46.7kDa
標簽; N-terminal His-IF2DI Tag
純度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
應用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲; The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
使用說明：
復溶方法?: 使用無菌蒸餾水或PBS緩沖液（pH 7.4）溶解凍干粉，輕輕混勻至完全溶解。
?應用建議?:
?實驗用途?: 適用于Western Blot、ELISA等檢測，作為抗原或標準品。
?濃度調(diào)整?: 根據(jù)實驗需求稀釋，避免高濃度導致非特異性結(jié)合。
?安全提示?: 操作時需佩戴手套和護目鏡，遵循實驗室生物安全規(guī)范。
重組表達原理：
基因克隆?：從牛基因組中獲取CST3基因的編碼序列（對應氨基酸31–148），插入含有啟動子、篩選標記和His標簽序列的質(zhì)粒載體。
?宿主表達?：將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. coli（如BL21菌株），在IPTG誘導下啟動蛋白表達。該系統(tǒng)成本低、表達效率高，適合大規(guī)模生產(chǎn)。
?蛋白純化?：利用His標簽與鎳柱親和層析結(jié)合，實現(xiàn)高純度（>95%）蛋白回收，再經(jīng)透析或凝膠過濾去除雜質(zhì)。
?凍干保存?：加入海藻糖作為保護劑，凍干后可長期穩(wěn)定儲存，復溶后保持天然構(gòu)象和生物活性。
公司正在出售的產(chǎn)品：
鈣激活鉀通道蛋白β4抗體 | PE anti-mouse I-Ab |
腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子2抗體 | 細胞角蛋白14t重組兔單克隆抗體 |
髓過氧化物酶抗體 | 體液CMV（CYTOMEGALOVIRUS）病毒定量PCR擴增檢測試劑盒 |
跨膜接頭蛋白SIT抗體 | 組蛋白H2B-K12乙?；瘷z測試劑盒 |
組織INSULIN R激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） | 載玻片細胞NF KAPPA B P65蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 |
細胞PAK1激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） | 組織一氧化氮（NO）活性熒光定量檢測試劑盒 |
10150 | TRIM50C蛋白抗體 |
721型分光光度儀1毫升1厘米光徑玻璃比色皿 | G蛋白偶聯(lián)受體83抗體 |
飲料果膠化學比色法定量檢測試劑盒 | FITC標記人CD33單克隆抗體 |
通用型黃瓜花葉病毒（Cucumber Mosaic Virus；CMV） | 磷酸脂磷酸水解酶1抗體 |
細胞HHV6（HUMAN HERPESVIRUS 6）病毒 | 蛋白酶體PSMα5抗體 |
載玻片細胞CASPASE-6蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 | Recombinant Human ACSM5亞甲基四氫葉酸脫氫酶2抗體 |
環(huán)指蛋白45/自分泌運動因子受體抗體 | 9號染色體開放閱讀框78抗體 |
重組蛋白生產(chǎn)流程：
通常包括以下幾個核心步驟：
基因克?。菏紫?，科學家需要獲取編碼目標蛋白的特定基因序列（目的基因）。
構(gòu)建載體：將目的基因插入到一個被稱為“載體”的DNA分子中，這個載體就像是一個運輸工具，
能將目的基因送入宿主細胞并指導其表達。
轉(zhuǎn)入宿主：將構(gòu)建好的重組載體導入選定的宿主細胞中，這個過程稱為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達與培養(yǎng)：宿主細胞在適宜的條件下進行大規(guī)模培養(yǎng)，其自身的遺傳系統(tǒng)會讀取重組載體上的基因信息，開始大量生產(chǎn)目標蛋白。
純化：通過一系列復雜的生物化學方法（如層析技術(shù)），將目標重組蛋白從宿主細胞的眾多混合物中分離出來，以獲得高純度的產(chǎn)品。
關(guān)鍵字： ACSM5;46.7kDa; 80-315;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù)，包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產(chǎn)品、技術(shù)服務、免疫學和分子學產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應性好、模塊搭配靈活，能快速響應客戶需求的產(chǎn)品。