產(chǎn)品介紹：

豬源性成分(Porcine)核酸檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)是一種用于定性檢測(cè)各類樣品中豬源性特異性DNA的分子生物學(xué)產(chǎn)品。該方法基于實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Real-time PCR）技術(shù)，通過擴(kuò)增和檢測(cè)豬基因組中高度保守的特異性DNA片段，為食品、飼料及生物制品中是否含有豬源性成分提供準(zhǔn)確、靈敏的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)依據(jù)。

該檢測(cè)在肉類摻假鑒別、清真/素食食品合規(guī)性監(jiān)控、動(dòng)物疫病防控以及進(jìn)出口檢驗(yàn)檢疫等領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

基本原理

該試劑盒的核心原理是實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR），具體流程如下：

DNA提?。簭拇郎y(cè)樣品（如肉類、肉制品、飼料、藥品、明膠膠囊等）中提取總基因組DNA。

熒光PCR擴(kuò)增：利用針對(duì)豬基因組保守區(qū)域設(shè)計(jì)的特異性引物和熒光標(biāo)記的探針（如TaqMan探針），對(duì)提取的DNA進(jìn)行擴(kuò)增。

實(shí)時(shí)檢測(cè)與判讀：在擴(kuò)增過程中，隨著目標(biāo)DNA片段的指數(shù)級(jí)增加，熒光信號(hào)也隨之增強(qiáng)。儀器實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)，當(dāng)信號(hào)強(qiáng)度超過設(shè)定閾值（Ct值）時(shí)，判定為陽性，表明樣品中含有豬源性成分。

目前市面上的主流試劑盒主要分為兩類：

單重檢測(cè)：僅針對(duì)豬源性成分進(jìn)行檢測(cè)。

雙重/多重檢測(cè)：在檢測(cè)豬源性成分的同時(shí)，加入一個(gè)內(nèi)參基因（如真核生物18S rRNA基因）進(jìn)行同步檢測(cè)，用于監(jiān)控整個(gè)DNA提取和擴(kuò)增過程是否有效，防止假陰性結(jié)果的出現(xiàn)。

檢測(cè)靶標(biāo)與特異性

靶標(biāo)基因：引物和探針通常針對(duì)豬基因組中高度保守且拷貝數(shù)高的區(qū)域進(jìn)行設(shè)計(jì)，常見的靶標(biāo)包括：

線粒體細(xì)胞色素b基因（CYTB）：線粒體DNA在細(xì)胞中拷貝數(shù)極高，能顯著提高檢測(cè)的靈敏度，尤其適用于DNA已部分降解的深加工產(chǎn)品。

線粒體D-loop區(qū)：同樣具有高拷貝數(shù)的優(yōu)勢(shì)。

核基因（如PRE1或β-肌動(dòng)蛋白基因ACTB）：存在于細(xì)胞核中，每個(gè)單倍體基因組中僅有一個(gè)拷貝，特異性極強(qiáng)。

標(biāo)本類型與處理

高特異性：該方法能特異性地檢測(cè)豬源性DNA，與牛、羊、雞、鴨、兔、馬、驢等其他常見動(dòng)物的DNA無交叉反應(yīng)，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

標(biāo)本類型與處理

標(biāo)本類型：

食品：生鮮肉類、肉制品（香腸、火腿、罐頭）、加工食品（方便面調(diào)料包、肉松）、油脂等。

飼料：配合飼料、骨粉、肉骨粉等。

生物制品/藥品：疫苗、肝素鈉、明膠膠囊、胰酶等。

其他：化妝品原料、考古樣本等。

樣本處理：不同類型的樣本需要采用不同的前處理方法。肉類樣品通常需要進(jìn)行均質(zhì)化處理（絞碎混勻）；高脂肪樣品（如香腸）可能需要使用CTAB法等特殊方法提取DNA；深加工產(chǎn)品（如明膠、油脂）則需要使用專門的DNA提取試劑盒以確保DNA的有效回收。

應(yīng)用價(jià)值

豬源性成分核酸檢測(cè)在多個(gè)領(lǐng)域具有重要的應(yīng)用價(jià)值：

食品安全與肉類摻假鑒別：快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出食品中是否含有未標(biāo)注的豬源性成分，防止肉類摻假，保護(hù)消費(fèi)者權(quán)益。

清真/素食食品合規(guī)性監(jiān)控：對(duì)于有宗教信仰（如伊斯蘭教）或特殊飲食習(xí)慣（如素食者）的消費(fèi)者，該檢測(cè)是確保食品合規(guī)性的關(guān)鍵手段。

飼料安全與動(dòng)物疫病防控：檢測(cè)飼料中是否違規(guī)添加了豬源性動(dòng)物蛋白，防止因同源飼料引發(fā)的動(dòng)物疫病（如口蹄疫、非洲豬瘟）傳播。

進(jìn)出口檢驗(yàn)檢疫：作為國(guó)際貿(mào)易中的重要檢測(cè)指標(biāo)，確保進(jìn)出口產(chǎn)品符合目的國(guó)的法律法規(guī)要求。

藥品與生物制品安全：檢測(cè)疫苗、藥物輔料（如明膠膠囊）中是否含有豬源性成分，確保用藥安全，避免過敏或宗教禁忌問題。

?? 優(yōu)勢(shì)與局限性

優(yōu)勢(shì)

極高的靈敏度：檢測(cè)下限可低至0.1%甚至更低（部分產(chǎn)品可達(dá)10-100 copies/mL），能有效檢出樣品中微量的豬源性成分。

高特異性：結(jié)果客觀準(zhǔn)確，能有效區(qū)分豬與其他物種。

適用于深加工產(chǎn)品：由于線粒體DNA拷貝數(shù)高，即使樣品經(jīng)過高溫、高壓、輻照等深加工處理，DNA已部分降解，仍能被有效檢出。

快速高效：整個(gè)PCR過程（不含DNA提?。┩ǔＴ?.5-2小時(shí)內(nèi)完成，無需電泳，閉管檢測(cè)，降低了污染風(fēng)險(xiǎn)。

局限性

無法區(qū)分死/活細(xì)胞：核酸檢測(cè)陽性僅表示存在豬源性DNA，不能區(qū)分這些DNA是來自活細(xì)胞、死細(xì)胞還是加工殘留物。

實(shí)驗(yàn)室要求高：需要具備PCR實(shí)驗(yàn)室資質(zhì)和專業(yè)的技術(shù)人員，以嚴(yán)格防止擴(kuò)增產(chǎn)物的交叉污染。

DNA降解影響：如果樣品經(jīng)過極度劇烈的加工（如強(qiáng)酸強(qiáng)堿水解），導(dǎo)致DNA完全降解，則可能無法檢出。

?? 相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)與產(chǎn)品信息

國(guó)內(nèi)外均已發(fā)布相關(guān)的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，規(guī)范了檢測(cè)流程和方法。

國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：

GB/T 38164-2019：《動(dòng)物源性成分檢測(cè) 豬源性成分實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法》，適用于食品中豬源性成分的檢測(cè)。

GB/T 21101-2025：《飼料中豬源性成分的測(cè)定》，適用于飼料中豬源性成分的檢測(cè)，替代了舊版GB/T 21101-200。

國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)：

ISO/TS 20224-3:2020：《分子生物標(biāo)記物分析 通過實(shí)時(shí)PCR檢測(cè)食品和動(dòng)物飼料中的動(dòng)物源性材料 第3部分：豬DNA檢測(cè)方法》。

核心優(yōu)勢(shì)與技術(shù)要點(diǎn)：

高特異性

引物設(shè)計(jì)基于目標(biāo)基因保守區(qū)域，可區(qū)分高度同源序列（如病毒變異株）。

高靈敏度

檢測(cè)限低至10拷貝/反應(yīng)，適用于微量樣本。

高效擴(kuò)增

熱啟動(dòng)酶（如HotStarTaq）減少非特異性擴(kuò)增，30分鐘內(nèi)完成40個(gè)循環(huán)。

防污染設(shè)計(jì)

UNG酶系統(tǒng)降解殘留產(chǎn)物，避免交叉污染。

穩(wěn)定性提升

凍干預(yù)混技術(shù)實(shí)現(xiàn)常溫運(yùn)輸，操作便捷。

公司正在出售的產(chǎn)品：

注意事項(xiàng)：

防污染操作

需在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)獨(dú)立操作，使用帶濾芯吸頭及專用實(shí)驗(yàn)服。

陽性對(duì)照管理

濃度高達(dá)1×10?拷貝/μL，需單獨(dú)存放并避免污染其他試劑。

局限性

僅限科研使用，不可用于臨床診斷；

環(huán)境樣本中可能存在PCR抑制劑，需設(shè)置內(nèi)參對(duì)照。