產(chǎn)品介紹：
兔源性成分(Rabbit)核酸檢測試劑盒(熒光PCR法)是一種基于TaqMan探針技術(shù)的高特異性檢測工具，通過實(shí)時(shí)監(jiān)測熒光信號實(shí)現(xiàn)對食品、飼料及藥品中兔源性成分的精準(zhǔn)鑒定，檢出限可達(dá)0.1%，廣泛應(yīng)用于肉類真實(shí)性驗(yàn)證、阿膠制品檢測及動物源性成分鑒定。
產(chǎn)品名稱 | 兔源性成分(Rabbit)核酸檢測試劑盒(熒光PCR法) |
產(chǎn)品分類 | 熒光PCR |
規(guī)格 | 50T |
貨號 | AP3920 |
一、檢測原理與技術(shù)特點(diǎn)
該試劑盒采用TaqMan探針法實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，針對兔源性成分特異性基因（如線粒體DNA的D-loop區(qū)或CYTB基因）設(shè)計(jì)引物和熒光探針。在PCR擴(kuò)增過程中，當(dāng)探針與目標(biāo)DNA序列結(jié)合后，聚合酶在延伸時(shí)會降解探針，釋放出FAM熒光信號，通過實(shí)時(shí)監(jiān)測熒光強(qiáng)度變化，可實(shí)現(xiàn)對兔源性成分的定性檢測。部分試劑盒采用單重?zé)晒釶CR技術(shù)，專一性檢測兔源性成分，避免與其他畜禽物種發(fā)生交叉反應(yīng)。
二、產(chǎn)品性能與規(guī)格
性能指標(biāo) 參數(shù)說明
檢測方法 實(shí)時(shí)熒光PCR法（TaqMan探針法）
檢測限 通常為0.1%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)），部分產(chǎn)品檢測靈敏度可達(dá)103拷貝/毫升
特異性 專一性檢測兔源性成分，不與牛、羊、豬等其他畜禽物種發(fā)生交叉反應(yīng)
規(guī)格 48T/盒、50T/盒（不同品牌規(guī)格略有差異）
保存條件 -20℃±5℃避光保存，避免反復(fù)凍融
有效期 6-12個月（不同品牌和產(chǎn)品類型存在差異）
適用儀器 ABI 7500、Bio-Rad、Roche等系列熒光定量PCR檢測儀
三、操作流程與結(jié)果判讀
核心操作步驟
樣本處理：取0.1g均勻樣品，采用液氮研磨或均質(zhì)器均質(zhì)，使用磁珠法或離心柱法提取DNA
加樣：向反應(yīng)管中加入5μL提取的DNA模板，蓋緊管蓋，避免氣泡
試劑配制：將反應(yīng)液與酶液按比例混合，分裝至PCR反應(yīng)管
加樣：向反應(yīng)管中加入5μL提取的DNA模板，蓋緊管蓋，避免氣泡
PCR擴(kuò)增：使用熒光定量PCR儀，設(shè)置合適的循環(huán)參數(shù)
推薦PCR擴(kuò)增程序
步驟 循環(huán)數(shù) 溫度 時(shí)間
預(yù)變性 1 cycle 95℃ 10 min
變性 40 cycles 95℃ 15 sec
退火/延伸 40 cycles 60℃ 60 sec
結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)
陽性：Ct值≤35，擴(kuò)增曲線呈典型"S"型
陰性：Ct值>35或無Ct值，曲線為直線或輕微斜線
可疑樣品：35<Ct值≤40，需重新抽提核酸進(jìn)行驗(yàn)證
無效檢測：陰性對照出現(xiàn)擴(kuò)增曲線或陽性對照無擴(kuò)增曲線6
四、應(yīng)用場景與質(zhì)量控制
主要應(yīng)用場景
食品真實(shí)性驗(yàn)證：檢測宣稱"純兔肉"產(chǎn)品中是否摻入其他動物成分
藥品質(zhì)量控制：確保含兔成分藥品原料真實(shí)性
飼料安全監(jiān)測：防范飼料中非法添加兔源性成分
進(jìn)出口檢驗(yàn)：滿足國際貿(mào)易中動物源性成分標(biāo)識要求
質(zhì)量控制要點(diǎn)
必須設(shè)置陰陽性對照：每次實(shí)驗(yàn)需包含陰性對照(NTC)和陽性對照(PTC)
嚴(yán)格分區(qū)操作：試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)物理隔離
使用無核酸酶耗材：采用帶濾芯吸頭，不同區(qū)域使用獨(dú)立工具
樣本保存：避免反復(fù)凍融，運(yùn)輸時(shí)2-8℃冰袋保存
五、相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)與注意事項(xiàng)
現(xiàn)行相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)
GB/T 21102-2007《動物源性飼料中兔源性成分定性檢測方法 實(shí)時(shí)熒光PCR方法》
DB1302/T397—2014《動物產(chǎn)品中動物源性成分檢測方法 實(shí)時(shí)熒光PCR法》38
檢測方法局限性
當(dāng)樣本中兔源性成分含量低于檢出限（如低于0.1%）時(shí)，可能會產(chǎn)生假陰性結(jié)果
樣本在采集、運(yùn)輸、儲存過程中操作不當(dāng)易造成DNA降解，產(chǎn)生假陰性
實(shí)驗(yàn)過程中若發(fā)生交叉污染，則容易得到假陽性結(jié)果
核心優(yōu)勢與技術(shù)要點(diǎn)：
高特異性
引物設(shè)計(jì)基于目標(biāo)基因保守區(qū)域，可區(qū)分高度同源序列（如病毒變異株）。
高靈敏度
檢測限低至10拷貝/反應(yīng)，適用于微量樣本。
高效擴(kuò)增
熱啟動酶（如HotStarTaq）減少非特異性擴(kuò)增，30分鐘內(nèi)完成40個循環(huán)。
防污染設(shè)計(jì)
UNG酶系統(tǒng)降解殘留產(chǎn)物，避免交叉污染。
穩(wěn)定性提升
凍干預(yù)混技術(shù)實(shí)現(xiàn)常溫運(yùn)輸，操作便捷。
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注意事項(xiàng)：
防污染操作
需在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)獨(dú)立操作，使用帶濾芯吸頭及專用實(shí)驗(yàn)服。
陽性對照管理
濃度高達(dá)1×10?拷貝/μL，需單獨(dú)存放并避免污染其他試劑。
局限性
僅限科研使用，不可用于臨床診斷；
環(huán)境樣本中可能存在PCR抑制劑，需設(shè)置內(nèi)參對照。
關(guān)鍵字： 兔源性成分 ;Rabbit ; 熒光PCR法;核酸檢測試劑盒;
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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、 華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。
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