產(chǎn)品介紹：
口蹄疫病毒A型/O型（FMDV-A/-O）核酸檢測(cè)試劑盒（雙重?zé)晒釶CR法）是一種基于雙重實(shí)時(shí)熒光定量PCR（Duplex qPCR）技術(shù)的獸醫(yī)分子診斷產(chǎn)品。該試劑盒專門用于體外定性檢測(cè)偶蹄動(dòng)物（如豬、牛、羊）的臨床樣本中是否存在口蹄疫病毒A型（FMDV-A）和/或O型（FMDV-O）的特異性核酸。
產(chǎn)品名稱 | 口蹄疫病毒A型/O型（FMDV-A/-O）核酸檢測(cè)試劑盒(雙重?zé)晒釶CR法) | 貨號(hào) | AP3987 |
產(chǎn)品分類 | 熒光PCR | 規(guī)格 | 50T |
口蹄疫（FMD）是世界動(dòng)物衛(wèi)生組織（WOAH）規(guī)定的A類傳染病，具有高度傳染性，對(duì)畜牧業(yè)危害巨大。A型和O型是全球流行最廣泛的兩個(gè)血清型。該試劑盒通過在一個(gè)反應(yīng)體系中同時(shí)檢測(cè)兩種血清型，實(shí)現(xiàn)了對(duì)主要流行株的快速鑒別，為口蹄疫的早期快速診斷、疫情監(jiān)測(cè)及防控凈化提供了精準(zhǔn)、高效的工具。
檢測(cè)原理：雙重?zé)晒舛縋CR
該試劑盒的核心原理是利用TaqMan探針法，針對(duì)口蹄疫病毒的兩個(gè)血清型設(shè)計(jì)特異性的引物和探針，進(jìn)行同步擴(kuò)增和檢測(cè)：
靶標(biāo)基因選擇：
A型（FMDV-A）：通常靶向A型病毒的高度保守區(qū)域，如VP1基因（衣殼蛋白基因）或3D聚合酶基因。該區(qū)域具有A型特異性，用于區(qū)分其他血清型。
O型（FMDV-O）：通常靶向O型病毒的高度保守區(qū)域，如3D聚合酶基因或內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)（IRES）區(qū)域。
雙重檢測(cè)機(jī)制：
FAM通道：檢測(cè)A型口蹄疫病毒。若樣本中含有FMDV-A，F(xiàn)AM熒光信號(hào)會(huì)隨PCR擴(kuò)增而增強(qiáng)。
HEX/VIC通道：檢測(cè)O型口蹄疫病毒。若樣本中含有FMDV-O，HEX/VIC熒光信號(hào)會(huì)隨PCR擴(kuò)增而增強(qiáng)。
結(jié)果判定：通過分析兩個(gè)通道的擴(kuò)增曲線和Ct值，可以判斷樣本中是單一感染（僅A型或僅O型）還是混合感染（A型和O型同時(shí)存在）。
內(nèi)參系統(tǒng)：部分試劑盒會(huì)引入內(nèi)源性內(nèi)參（如β-actin基因），用于監(jiān)控樣本采集質(zhì)量及PCR反應(yīng)體系是否存在抑制物，防止假陰性。
核心組分與性能參數(shù)
PCR反應(yīng)預(yù)混液：包含Taq DNA聚合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶（RT）、dNTPs、Mg2?緩沖液、UNG酶（防污染）及兩組特異性引物探針混合物。
陰陽(yáng)性對(duì)照：
陽(yáng)性對(duì)照：含有FMDV-A和FMDV-O目標(biāo)片段的質(zhì)?；旌衔锘驕缁畈《疽海≒TC）。
陰性對(duì)照：無核酸酶的水（NTC）。
陽(yáng)性對(duì)照：含有FMDV-A和FMDV-O目標(biāo)片段的質(zhì)粒混合物或滅活病毒液（PTC）。
關(guān)鍵性能參數(shù)：
最低檢測(cè)限 (LOD)：通?？蛇_(dá) 1×103 copies/mL，部分產(chǎn)品靈敏度可達(dá) 500 copies/mL。
檢測(cè)范圍：通常為 2×103 ~ 1×10? copies/mL。
特異性：與其他常見豬/牛/羊病原體（如豬水泡病病毒、牛病毒性腹瀉病毒等）無交叉反應(yīng)。
檢測(cè)時(shí)間：從RNA提取到出結(jié)果通常僅需 2-3 小時(shí)。
規(guī)格：常見規(guī)格為 50T/盒。
臨床應(yīng)用與意義
偶蹄獸口蹄疫的早期診斷：在動(dòng)物出現(xiàn)發(fā)熱、口腔及蹄部水泡癥狀初期，通過檢測(cè)水泡液、上皮組織或血液中的病毒RNA，實(shí)現(xiàn)快速確診，為撲滅疫情爭(zhēng)取時(shí)間。
血清型鑒別與流行病學(xué)調(diào)查：快速區(qū)分A型和O型感染，了解流行毒株的分布，指導(dǎo)疫苗的精準(zhǔn)選擇（A型疫苗或O型疫苗）。
進(jìn)出口檢驗(yàn)檢疫：作為國(guó)際貿(mào)易中口蹄疫檢測(cè)的依據(jù)，符合WOAH（世界動(dòng)物衛(wèi)生組織）的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。
疫苗研發(fā)與質(zhì)量控制：用于檢測(cè)疫苗原液中的病毒含量及血清型特異性。
優(yōu)勢(shì)與局限性
特性 描述
高特異性 同時(shí)檢測(cè)A型和O型，能準(zhǔn)確區(qū)分不同血清型，避免交叉保護(hù)不足導(dǎo)致的免疫失敗。
高靈敏度 可檢測(cè)出極低含量的病毒RNA，優(yōu)于傳統(tǒng)的病毒分離培養(yǎng)法（需數(shù)天）。
快速高效 相比病毒分離（需24-48小時(shí)）和中和試驗(yàn)（需數(shù)天），qPCR檢測(cè)僅需數(shù)小時(shí)。
自動(dòng)化兼容 適用于主流熒光定量PCR儀（如ABI 7500、Bio-Rad CFX96等）。
局限性： 檢測(cè)結(jié)果受樣本采集時(shí)機(jī)（窗口期）及RNA提取質(zhì)量影響大；高度降解的樣本可能導(dǎo)致假陰性。
操作與解讀注意事項(xiàng)
樣本采集：
水泡液/上皮組織：是檢測(cè)口蹄疫病毒的最佳樣本，檢出率最高。
血液/血清：可用于檢測(cè)病毒血癥期的病毒RNA。
咽拭子：可用于檢測(cè)潛伏期或康復(fù)期的帶毒情況。
RNA提?。盒枋褂脤ｉT的病毒RNA提取試劑盒，避免基因組DNA污染。
防污染：PCR實(shí)驗(yàn)室必須嚴(yán)格分區(qū)，使用帶濾芯的吸頭，防止擴(kuò)增產(chǎn)物氣溶膠污染導(dǎo)致假陽(yáng)性。
結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)：
陽(yáng)性：FAM或HEX/VIC通道Ct值 ≤ 35-38（參照說明書），且擴(kuò)增曲線呈典型的“S”型指數(shù)增長(zhǎng)。
陰性：FAM和HEX/VIC通道均無擴(kuò)增曲線，或Ct值 > 38-。
混合感染：FAM和HEX/VIC通道均有明顯的擴(kuò)增曲線，提示樣本中同時(shí)存在A型和O型口蹄疫病毒。
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應(yīng)用場(chǎng)景與產(chǎn)品選擇建議
科研領(lǐng)域：
常規(guī)PCR試劑盒。
臨床診斷：
探針法qPCR試劑盒（如牛白血病病毒，靈敏度100拷貝/反應(yīng)）。
現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)：
恒溫?cái)U(kuò)增試劑盒（如LAMP法，90分鐘出結(jié)果）
關(guān)鍵字： 口蹄疫病毒A型/O型;FMDV-A/-O ;雙重?zé)晒?PCR 法;核酸檢測(cè)試劑盒;
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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.，China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、 華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué)，暨南大學(xué)，南京工業(yè)大學(xué)，曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。
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