重組蛋白是如何“誕生”的?
重組蛋白的生產(chǎn)過(guò)程就像是一場(chǎng)精密的分子手術(shù),主要分為以下幾個(gè)步驟:
基因克隆:科學(xué)家先找到并復(fù)制出決定該蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的“基因藍(lán)圖”(目的基因)。
構(gòu)建載體:將這段“基因藍(lán)圖”插入到一個(gè)被稱(chēng)為“載體”(通常是質(zhì)粒或病毒)的運(yùn)輸工具中。
轉(zhuǎn)入宿主:把這個(gè)攜帶了新指令的載體送入“工廠”(宿主細(xì)胞,如大腸桿菌、CHO細(xì)胞等)。
表達(dá)與純化:宿主細(xì)胞根據(jù)新指令大量生產(chǎn)蛋白質(zhì),最后科學(xué)家通過(guò)復(fù)雜的工藝將這些蛋白質(zhì)分離、純化出來(lái)。
產(chǎn)品概述:
Recombinant Human Cardiac Troponin I (cTnI) 是一種在大腸桿菌中重組表達(dá)的、帶His標(biāo)簽的人源心肌肌鈣蛋白I,作為心肌收縮的特異性調(diào)節(jié)蛋白和心肌損傷標(biāo)志物,主要用于科研以制備高親和力單克隆抗體、開(kāi)發(fā)診斷試劑盒及作為標(biāo)準(zhǔn)品用于心血管疾病研究。
產(chǎn)品名 | Recombinant Human Cardiac Troponin I | 分子量 | 22.9 kDa |
表達(dá)區(qū)間 | 2-210 | 貨號(hào) | XG-DB1458 |
別名
cardiac muscle, Cardiac troponin I, cardiomyopathy, dilated 2A (autosomal recessive), Cardiomyopathy, familial hypertrophic, 7, included, CMD1FF, CMD2A, CMH7, cTnI, Familial hypertrophic cardiomyopathy 7, MGC116817, RCM1, Tn1, Tni, TNN I3, TNNC 1, TNNC1, TNNI3, TNNI3_HUMAN, Troponin I, Troponin I cardiac, Troponin I cardiac muscle, Troponin I cardiac muscle isoform, Troponin I type 3 cardiac, troponin I
宿主; E.Coli
表達(dá)區(qū)間; 2-210
分子量; 22.9 kDa
標(biāo)簽; N-terminal His Tag
純度; Greater than 95% by SDS-PAGE gel analyses
應(yīng)用; Western Blot, ELISA
性狀; Lyophilized from a 0.2 μm filtered solution in 10 mM Hepes, 500 mM NaCl with 5% trehalose, pH7.4
溶解方法; Centrifuge the vial at 10,000 rpm for 1 minute, reconstitute at 200 μg/ml in sterile distilled water by gentle pipetting 2-3 times, don’t vortex
存儲(chǔ); The lyophilized protein is stable at -20 °C for up to 1 year. For extended storage, it is recommended to further dilute in working aliquots after reconstitution. The protein solution is stable at ≤ -20 °C for 3 months, or 2-7 days at 2-8 °C under sterile conditions.Avoid repeated freeze/thaw cycle.
核心應(yīng)用:
重組蛋白技術(shù)是現(xiàn)代生物技術(shù)、醫(yī)學(xué)研究和制藥工業(yè)的基石,應(yīng)用極為廣泛。
生物制藥
這是重組蛋白最核心和價(jià)值最高的應(yīng)用領(lǐng)域。許多過(guò)去只能從人或動(dòng)物體內(nèi)提取、來(lái)源稀少且昂貴的藥物,現(xiàn)在都可以通過(guò)重組技術(shù)大規(guī)模生產(chǎn)。例如:
細(xì)胞因子:如促紅素(治療貧血)、干擾素(抗病毒、抗腫瘤)、白細(xì)胞介素等。
激素:如重組人胰島素(治療糖尿?。?、人生長(zhǎng)激素。
凝血因子:用于治療血友病。
單克隆抗體:已成為腫瘤、自身免疫性疾病等領(lǐng)域最重要的治療藥物之一。
疫苗開(kāi)發(fā)
重組蛋白疫苗是一種重要的疫苗類(lèi)型。它通過(guò)基因工程在體外細(xì)胞中表達(dá)病毒的關(guān)鍵抗原蛋白(如新冠病毒的RBD蛋白),純化后制成疫苗。這類(lèi)疫苗不含活病毒,安全性高,且抗原成分精確、純度高。
科研與診斷
重組蛋白是生命科學(xué)研究中不可或缺的工具。
細(xì)胞培養(yǎng):作為生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子等添加劑,用于干細(xì)胞誘導(dǎo)、細(xì)胞分化等研究。
免疫學(xué)研究:作為抗原用于開(kāi)發(fā)ELISA等免疫檢測(cè)試劑盒,或用于產(chǎn)生抗體。
結(jié)構(gòu)與功能研究:幫助科學(xué)家研究蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、功能以及細(xì)胞信號(hào)通路。
公司正在出售的產(chǎn)品:
高爾基體膜相關(guān)蛋白7抗體 | PE標(biāo)記小鼠CD49d單克隆抗體 |
轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子RFX4抗體 | 細(xì)胞色素c氧化酶亞型2單克隆抗體 |
突觸泡蛋白2C抗體 | 組織5-羥色胺-N-乙?;D(zhuǎn)移酶(Serotonin N-Acetyltransferase)活性 |
磷酸化Ephrin B抗體 | 細(xì)胞培養(yǎng)液低密度脂蛋白(LDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量檢測(cè)試劑盒 |
組織基質(zhì)金屬(MMP-9)明膠法比色定量檢測(cè)試劑盒 | 細(xì)胞P27蛋白表達(dá)比色法定量檢測(cè)試劑盒 |
細(xì)胞CSF1R激酶活性定量檢測(cè)試劑盒(A/B/C) | 冰凍切片a-染色試劑盒 |
分離高爾基體純度雙酶法(GT/NCR)檢測(cè)試劑盒 | β內(nèi)酰胺酶抗體 |
高質(zhì)型ECL化學(xué)發(fā)光顯影試劑盒 | KHDRBS2蛋白抗體 |
動(dòng)物組織N-乙酰轉(zhuǎn)移酶2(NAT2)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒 | DHX15蛋白抗體 |
食物糖精(saccharin)含量比色法定量檢測(cè)試劑盒 | 磷酸化乙酰輔酶A羧化酶1ACCα抗體 |
TOP10細(xì)菌 | 蛋白磷酸酶3調(diào)節(jié)亞基B抗體 |
TSH-BETA蛋白表達(dá)西方雜交分析試劑盒 | Recombinant Human Cardiac Troponin I乙醛酸還原酶抗體 |
間隙連接蛋白30/GJB6抗體 | APC標(biāo)記人CD71單克隆抗體 |
重組蛋白生產(chǎn)流程:
通常包括以下幾個(gè)核心步驟:
基因克?。菏紫?,科學(xué)家需要獲取編碼目標(biāo)蛋白的特定基因序列(目的基因)。
構(gòu)建載體:將目的基因插入到一個(gè)被稱(chēng)為“載體”的DNA分子中,這個(gè)載體就像是一個(gè)運(yùn)輸工具,
能將目的基因送入宿主細(xì)胞并指導(dǎo)其表達(dá)。
轉(zhuǎn)入宿主:將構(gòu)建好的重組載體導(dǎo)入選定的宿主細(xì)胞中,這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為“轉(zhuǎn)化”或“轉(zhuǎn)染”。
表達(dá)與培養(yǎng):宿主細(xì)胞在適宜的條件下進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng),其自身的遺傳系統(tǒng)會(huì)讀取重組載體上的基因信息,開(kāi)始大量生產(chǎn)目標(biāo)蛋白。
純化:通過(guò)一系列復(fù)雜的生物化學(xué)方法(如層析技術(shù)),將目標(biāo)重組蛋白從宿主細(xì)胞的眾多混合物中分離出來(lái),以獲得高純度的產(chǎn)品。
關(guān)鍵字: Cardiac Troponin I;22.9 kDa; 2-210;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專(zhuān)注于實(shí)驗(yàn)室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域,利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動(dòng)化技術(shù),包括實(shí)驗(yàn)室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動(dòng)化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺(tái)。不斷為各行業(yè)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品,截止至2024年5月,西格生物已為生命科學(xué)、檢驗(yàn)檢測(cè)、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶(hù)提供實(shí)驗(yàn)室完整解決方案。本著幫助用戶(hù)實(shí)現(xiàn)“讓科研場(chǎng)所更智能、讓科研人員更專(zhuān)注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景,西格生物將繼續(xù)在實(shí)驗(yàn)室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力,更加重視本土化,建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活,能快速響應(yīng)客戶(hù)需求的產(chǎn)品。