產(chǎn)品介紹:
檢測原理與核心優(yōu)勢
該試劑盒采用的是恒溫?zé)晒鈾z測技術(shù)(通?;?/span>LAMP或類似原理)。
核心原理:針對NPTII基因的特異性保守序列設(shè)計(jì)多組特異性引物。在恒定溫度(通常為60-65℃)下,利用具有鏈置換活性的DNA聚合酶進(jìn)行核酸擴(kuò)增。反應(yīng)過程中,隨著DNA的大量合成,會產(chǎn)生熒光信號(通常通過熒光染料或探針實(shí)現(xiàn))。儀器實(shí)時(shí)監(jiān)測熒光信號的變化,從而判斷樣本中是否含有NPTII基因。
特異性:引物設(shè)計(jì)針對NPTII基因的特異片段,可有效區(qū)分轉(zhuǎn)基因成分與非轉(zhuǎn)基因背景。
產(chǎn)品名稱 | NPTII基因核酸檢測試劑盒(恒溫?zé)晒夥ǎ?/span> | 貨號 | AP3380 |
產(chǎn)品分類 | 熒光PCR | 規(guī)格 | 48T |
主要優(yōu)勢:
操作簡便:無需復(fù)雜的熱循環(huán)(不像傳統(tǒng)PCR需要反復(fù)升降溫),反應(yīng)程序簡單。
快速高效:通常在45-60分鐘內(nèi)即可完成檢測并得到結(jié)果。
高靈敏度:檢出限通??蛇_(dá)0.1%(相對于內(nèi)源基因),能夠檢測出極低含量的轉(zhuǎn)基因成分。
?? 產(chǎn)品性能指標(biāo)
根據(jù)同類產(chǎn)品的性能參數(shù),該試劑盒通常具備以下指標(biāo):
指標(biāo)項(xiàng)目 性能參數(shù)參考
檢測范圍 適用于食品、飼料、植物組織等樣品
最低檢測限 檢出限 0.1%(相對于內(nèi)源基因)
反應(yīng)時(shí)間 約 45 - 60 分鐘
適用儀器 恒溫?zé)晒鈾z測儀(如ZYD-S1, Genie II, ESE Tube Scanner等),部分熒光定量PCR儀(如ABI 7500, CFX96等)
?? 主要組分與儲存
試劑盒通常包含以下組分(以48T規(guī)格為例):
反應(yīng)液A (A-NPTII-I):通常包含反應(yīng)緩沖液、dNTPs、Mg2?等。
反應(yīng)液B (B-I):通常包含酶混合物(Bst DNA聚合酶等)。
顯色液/C液 (C-I):通常包含熒光染料。
陰性對照 (NG-I):無模板對照(NTC)。
陽性對照 (PG-NPTII-I):含有NPTII基因片段的質(zhì)?;駾NA。
儲存條件:所有組分應(yīng)于 -20℃ 條件下避光保存,運(yùn)輸過程需使用干冰或冰袋。避免反復(fù)凍融,使用前需完全解凍并混勻。
?? 標(biāo)準(zhǔn)操作流程
樣本處理與DNA提取
采集待檢測的植物組織、食品(如大豆、玉米制品)或飼料樣本。
參照《GB/T 19495.3-2004 轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測 核酸提取純化方法》或其他標(biāo)準(zhǔn)方法,提取樣本的基因組DNA作為模板。
試劑準(zhǔn)備
將試劑完全解凍,各組分在使用前需渦旋混勻,并瞬時(shí)離心。
計(jì)算所需反應(yīng)管數(shù)量(待檢樣品數(shù) + 陰性對照 + 陽性對照),并按比例配制預(yù)混液。
反應(yīng)體系配置與加樣
在冰上操作,將反應(yīng)液A、B、C按說明書比例混合,分裝到PCR管或八聯(lián)管中。
向反應(yīng)管中加入提取的DNA模板(或陰性/陽性對照)。
充分混勻,離心去除氣泡。
恒溫?cái)U(kuò)增與檢測
將反應(yīng)管放入恒溫?zé)晒鈾z測儀中。
設(shè)置反應(yīng)溫度(通常為60-63℃)和時(shí)間(通常為45-60分鐘),并選擇熒光通道進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測。
結(jié)果判讀
陽性:反應(yīng)曲線呈明顯的指數(shù)增長,且有清晰的平臺期,Ct值通常在30-36個(gè)循環(huán)內(nèi)。
陰性:無擴(kuò)增曲線或Ct值大于設(shè)定閾值(如40),曲線為直線或輕微斜線。
?? 注意事項(xiàng)
防止污染:由于靈敏度極高,實(shí)驗(yàn)應(yīng)嚴(yán)格分區(qū)(試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)),避免氣溶膠污染。反應(yīng)結(jié)束后嚴(yán)禁開蓋,應(yīng)直接丟棄入密封袋中處理。
操作規(guī)范:試劑配制和加樣步驟建議在冰上進(jìn)行,避免酶活性損失。反應(yīng)液對光敏感,應(yīng)避光保存和使用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
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Exportin 5 核輸出蛋白5抗體 | 大鼠補(bǔ)體片斷5a(C5a)核酸檢測試劑盒 |
流感A病毒神經(jīng)氨酸酶 (H5N6-NA) 單克隆抗體 | 山羊還原型谷胱甘肽(GSH)核酸檢測試劑盒 |
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大鼠妊娠相關(guān)血漿蛋白A(PAPP-A)PCR檢測試劑盒 | 小鼠苯丙氨酸(LPA)核酸檢測試劑盒 |
人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)PCR檢測試劑盒 | 豬淀粉樣前體蛋白(βAPP)核酸檢測試劑盒 |
應(yīng)用場景與產(chǎn)品選擇建議
科研領(lǐng)域:
常規(guī)PCR試劑盒。
臨床診斷:
探針法qPCR試劑盒(如牛白血病病毒,靈敏度100拷貝/反應(yīng))。
現(xiàn)場檢測:
恒溫?cái)U(kuò)增試劑盒(如LAMP法,90分鐘出結(jié)果)
關(guān)鍵字: NPTII;基因 ;核酸檢測試劑盒;恒溫?zé)晒夥?
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)是一家化學(xué)、生化和材料科學(xué)等領(lǐng)域的科研用研發(fā)產(chǎn)品的制造商和供應(yīng)商, 我們的產(chǎn)品在相當(dāng)寬的基礎(chǔ)科學(xué)領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用??蛻舭▽W(xué)術(shù)界、工業(yè)界和政府的研究和開發(fā)實(shí)驗(yàn)室以及制藥,生物技術(shù),化工/石化行業(yè)等具商業(yè)規(guī)模的企業(yè)。
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