大鼠羊膜間充質干細胞
產品信息：
產品名稱 大鼠羊膜間充質干細胞
組織來源 羊膜組織
種屬 大鼠
產品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
英文名稱 | Rat Amniotic Mesenchymal Stem Cells | 規(guī)格 | 5×105 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 貨號 | P-X1758 |
培養(yǎng)信息：
方法簡介：實驗室分離的大鼠羊膜間充質干細胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：實驗室分離的大鼠羊膜間充質干細胞經CD44免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱：大鼠羊膜間充質干細胞
組織來源：羊膜組織
產品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：包被條件
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠羊膜間充質干細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介 ：
大鼠羊膜間充質干細胞分離自胎盤羊膜組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯(lián)合長成的母子間交換物質的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當?shù)莫毩⑿?。胎盤還產生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合，以達到母子間物質的交換，這樣的結構稱假胎盤。羊膜是胎盤的最內層，與眼結膜組織結構相似，含有眼表上皮細胞，包括結膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質，其光滑，無血管、神經及淋巴，具有一定的彈性；在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質細胞組成，均具有多分化潛能，可轉化為神經元，且還有合成、釋放生物活性物質和神經營養(yǎng)因子的功能。
原代細胞分離：
組織樣本處理：取材后立即置于預冷的含抗生素的PBS或組織保存液中，避免樣本干燥和溫度變化；修剪時去除壞死、結締組織等雜質，盡量減小組織塊體積以提高消化效率。
消化方法選擇：
酶消化法：根據組織類型選對應酶（如胰蛋白酶用于上皮類組織、膠原酶用于結締組織豐富的組織），嚴格控制消化溫度（通常37℃）和時間，每隔5-10分鐘鏡下觀察，避免過度消化損傷細胞。
機械分離法：適合柔軟組織（如腦、肝臟），通過剪碎、吹打、過濾等方式分散細胞，操作時動作輕柔，減少細胞機械損傷。
細胞過濾與離心：用合適孔徑的細胞篩（如100-200目）過濾細胞懸液，去除未消化的組織塊；離心轉速通常為1000-1500rpm，時間5-10分鐘，避免高速離心導致細胞破裂。
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細胞消化與傳代：
方法一：利多卡因消化法
吸出培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞1次
添加1ml 12mM利多卡因消化液，輕輕轉動培養(yǎng)瓶使液體覆蓋瓶底，37℃溫浴3-5分鐘
顯微鏡下觀察到細胞回縮變圓后，加入5ml完全培養(yǎng)基稀釋消化液
輕輕吹打混勻細胞，1200rpm離心5分鐘，棄上清后用完全培養(yǎng)基重懸接種
方法二：胰酶消化法
若利多卡因消化效果不佳，可更換為0.25%胰蛋白酶-EDTA消化液，重復上述操作，消化時間控制在1-2分鐘
方法三：細胞刮取法
若細胞仍無法消化，加入3ml完全培養(yǎng)基終止消化，用無菌細胞刮輕輕刮取細胞（此方法易造成細胞機械損傷，不推薦）
關鍵字： 大鼠羊膜間充質干細胞;成纖維細胞樣;貼壁;
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