大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞
產(chǎn)品信息：
產(chǎn)品名稱 大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞
組織來源 子宮組織
種屬 大鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
英文名稱 | Rat Endometrial Mesenchymal Cells | 規(guī)格 | 5×105 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 貨號 | P-X1634 |
培養(yǎng)信息：
方法簡介：實驗室分離的大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：實驗室分離的大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱：大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞
組織來源：子宮組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：包被條件
培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞簡介 ：
大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時，可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜，由上皮（屬單層柱狀上皮，有分泌細胞和纖毛細胞二種）和固有膜（由結(jié)締組織構(gòu)成，其內(nèi)有大量的星形細胞，稱為基質(zhì)細胞）組成，子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層，功能層較厚，約占內(nèi)膜厚度的4/5；基底層較薄較致密，約占1/5，功能層可剝脫，而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動物子宮壁的最內(nèi)層，位于子宮腔面，在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官，子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
原代細胞實驗要點：
一、取材與分離
新鮮、無菌：組織離體越快越好，全程冰上操作。
去除雜質(zhì)：剔除脂肪、結(jié)締組織、血污，減少污染和消化干擾。
溫和消化：
控制酶濃度、溫度、時間
及時終止消化，避免細胞過度損傷
過篩過濾：去除組織塊，獲得單細胞懸液。
二、接種與培養(yǎng)
密度關(guān)鍵：原代細胞普遍怕稀，密度太低不貼壁、不長。
完全貼壁后再換液：剛接種別亂動。
專用培養(yǎng)基：
內(nèi)皮、上皮、平滑肌、神經(jīng)元等盡量用專用原代培養(yǎng)基
血清質(zhì)量影響極大，建議批次驗證
CO?、濕度、溫度嚴格穩(wěn)定，避免頻繁開關(guān)門。
三、傳代與凍存
不要等太滿：匯合度 70%–80% 就傳，不要等到堆積。
消化監(jiān)控：鏡下觀察細胞變圓、間隙變大立即終止。
凍存保護：
標準：90% 血清 + 10% DMSO
程序降溫，盡快轉(zhuǎn)入液氮
原代細胞凍存復(fù)蘇能力弱，盡量早凍、多凍。
四、污染與狀態(tài)判斷
一旦渾濁、pH 驟變、有顆粒：直接丟棄，不要救。
細胞狀態(tài)好：
形態(tài)均一、輪廓清晰
生長均勻、無局部堆積
出現(xiàn)分化、拉長、多核、空泡多：說明老化 / 狀態(tài)差，不建議繼續(xù)實驗。
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凍存復(fù)蘇：
凍存的梯度降溫：
逐步降溫：細胞凍存時，先在4℃放置30分鐘，再在-20℃放置1小時，隨后轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱過夜，最后放入液氮長期保存，避免溫度驟變導致細胞內(nèi)冰晶形成。
標記清晰：凍存管上需標記細胞名稱、代次、凍存日期和操作者姓名，避免后續(xù)復(fù)蘇時混淆。
復(fù)蘇的快速操作：
解凍后立即離心：細胞解凍后迅速轉(zhuǎn)移至含預(yù)熱培養(yǎng)基的離心管中，離心去除含DMSO的凍存液，減少DMSO對細胞的毒性。
復(fù)蘇后靜置培養(yǎng)：復(fù)蘇后的細胞接種后，24小時內(nèi)不要換液，讓細胞有足夠的時間恢復(fù)狀態(tài)，24小時后再更換新鮮培養(yǎng)基。
關(guān)鍵字： 大鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞;成纖維細胞樣;貼壁;
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