細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠視網(wǎng)膜血管周細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜微血管組織；周細(xì)胞(pericyte)又稱(chēng)Rouget細(xì)胞和壁細(xì)胞，是一種包圍全身毛細(xì)血管和靜脈中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞，可以收縮。周細(xì)胞嵌入毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的基膜中，通過(guò)物理接觸和旁分泌信號(hào)與內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞通訊，監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細(xì)胞的成熟過(guò)程。此外，周細(xì)胞還具有調(diào)控毛細(xì)血管血流量、細(xì)胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用，其多功能性是目前研究的熱點(diǎn)之一，所以對(duì)血管周細(xì)胞的生物學(xué)特征、標(biāo)記物、細(xì)胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料。周細(xì)胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細(xì)血管的血流量。周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間共同擁有一個(gè)基膜，基膜上有多種細(xì)胞連接，包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細(xì)血管直徑的雙向調(diào)控；毛細(xì)血管受損時(shí)，周細(xì)胞還可增殖，分化為內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。

產(chǎn)品信息：

方法簡(jiǎn)介：實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠視網(wǎng)膜血管周細(xì)胞采用膠原酶 - 中性蛋白酶聯(lián)合消化法及不銹鋼網(wǎng)篩過(guò)濾法制備而來(lái)制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞

組織來(lái)源：視網(wǎng)膜組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：包被條件

培養(yǎng)基含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率:每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%胰蛋白酶大鼠視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
原代細(xì)胞傳代：

傳代時(shí)機(jī)判斷

細(xì)胞匯合度達(dá)到80%-90%時(shí)進(jìn)行傳代，避免細(xì)胞過(guò)度匯合導(dǎo)致接觸抑制，影響增殖能力

觀察細(xì)胞狀態(tài)：細(xì)胞形態(tài)正常，無(wú)明顯漂浮、污染跡象

消化環(huán)節(jié)控制

消化前準(zhǔn)備：吸出舊培養(yǎng)基，用PBS輕輕沖洗細(xì)胞1-2次，去除血清（血清會(huì)抑制胰蛋白酶活性）

消化液選擇：同原代分離，根據(jù)細(xì)胞類(lèi)型選擇合適的消化酶，胰蛋白酶消化時(shí)間一般為1-5分鐘，膠原酶消化時(shí)間為10-30分鐘

消化終止：顯微鏡下觀察到細(xì)胞回縮變圓、間隙增大時(shí)，立即加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，血清濃度不低于10%

細(xì)胞吹打：用移液器輕輕吹打細(xì)胞，避免過(guò)度用力導(dǎo)致細(xì)胞破裂，吹打次數(shù)一般為10-15次

傳代比例控制

傳代比例根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)速度調(diào)整：生長(zhǎng)速度快的細(xì)胞（如成纖維細(xì)胞）可按1:3-1:6傳代，生長(zhǎng)速度慢的細(xì)胞（如內(nèi)皮細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞）按1:2傳代

首次傳代比例可適當(dāng)提高（如1:2），待細(xì)胞適應(yīng)體外培養(yǎng)環(huán)境后再調(diào)整為常規(guī)比例

傳代后培養(yǎng)

接種后輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶，使細(xì)胞均勻分布，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

24小時(shí)內(nèi)不要晃動(dòng)培養(yǎng)瓶，避免細(xì)胞貼壁不牢

培養(yǎng)24-48小時(shí)后觀察細(xì)胞貼壁情況，更換新鮮培養(yǎng)基，去除未貼壁的死細(xì)胞和細(xì)胞碎片
收貨與處理流程：

1. 收貨檢查

收到細(xì)胞后首先觀察T25培養(yǎng)瓶瓶身是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有異常及時(shí)聯(lián)系。

2. 細(xì)胞復(fù)蘇（僅針對(duì)凍存細(xì)胞）

將凍存管迅速放入37℃溫水中搖晃融化，時(shí)間約1分鐘

加入4-5ml完全培養(yǎng)基混勻，1000RPM常溫離心4-5分鐘

棄去上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液吹勻，移入含5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜，第二天換液并檢查細(xì)胞密度

3. 新鮮細(xì)胞處理

用75%酒精消毒培養(yǎng)瓶瓶身，拆下封口膜

放入37℃、5%CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)，穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)后再進(jìn)行后續(xù)操作

公司正在出售的產(chǎn)品：