產(chǎn)品介紹:
預(yù)期用途
本試劑盒主要用于食品、飼料、農(nóng)產(chǎn)品等樣品中轉(zhuǎn)基因成分的定性檢測(cè)。
檢測(cè)目標(biāo):Cry1A(c)基因(也稱為Bt-cry1Ac)。該基因編碼的蛋白質(zhì)對(duì)鱗翅目害蟲(如棉鈴蟲、玉米螟等)具有特異性毒殺作用。
產(chǎn)品名稱 | Cry1A(c)基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)ǎ?/span> | 貨號(hào) | AP3411 |
產(chǎn)品分類 | 熒光PCR | 規(guī)格 | 48T |
應(yīng)用領(lǐng)域:
轉(zhuǎn)基因作物檢測(cè):用于檢測(cè)轉(zhuǎn)Bt基因的棉花(如Bollgard棉花)、水稻、玉米等作物及其加工產(chǎn)品(如面粉、米粉、豆制品、植食性飼料等)。
食品安全與標(biāo)識(shí)監(jiān)管:確保食品符合轉(zhuǎn)基因標(biāo)識(shí)法規(guī),保障消費(fèi)者知情權(quán)。
農(nóng)業(yè)與環(huán)境監(jiān)測(cè):用于田間抗蟲作物的鑒定及環(huán)境安全評(píng)價(jià)。
?? 檢測(cè)原理
該試劑盒采用的是實(shí)時(shí)熒光定量PCR法(TaqMan探針?lè)ǎ?/span>
技術(shù)核心:在PCR反應(yīng)體系中包含一對(duì)特異性引物和一條特異性的TaqMan探針。該探針兩端分別標(biāo)記有熒光報(bào)告基團(tuán)(如FAM)和熒光淬滅基團(tuán)(如TAMRA)。
信號(hào)產(chǎn)生:在PCR擴(kuò)增過(guò)程中,Taq酶的5'→3'核酸酶活性會(huì)降解與模板結(jié)合的探針,使熒光報(bào)告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離,發(fā)出熒光。
實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè):熒光信號(hào)的強(qiáng)度與PCR產(chǎn)物的量成正比。通過(guò)實(shí)時(shí)熒光PCR儀(如ABI 7500、CFX96等)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)的累積情況,實(shí)現(xiàn)對(duì)Cry1A(c)基因的精準(zhǔn)檢測(cè)。
?? 核心優(yōu)勢(shì)
高特異性:TaqMan探針技術(shù)確保了檢測(cè)的高度特異性,能有效區(qū)分Cry1A(c)基因與其他類似的Bt基因(如Cry1A(b))。
高靈敏度:檢測(cè)下限極低,通??蛇_(dá) 0.1% 的轉(zhuǎn)基因含量,甚至能檢測(cè)到單拷貝基因。
結(jié)果準(zhǔn)確:通過(guò)Ct值(循環(huán)閾值)和擴(kuò)增曲線的形態(tài)(S型曲線)進(jìn)行判斷,結(jié)果客觀、準(zhǔn)確。
封閉操作:反應(yīng)在封閉的管內(nèi)進(jìn)行,減少了擴(kuò)增產(chǎn)物污染環(huán)境的風(fēng)險(xiǎn)。
?? 操作流程概覽
樣本前處理與核酸提?。簭拇郎y(cè)樣品(如植物葉片、種子、加工食品)中提取總DNA(建議參照CTAB法或商業(yè)試劑盒)。
反應(yīng)體系配制:將試劑盒中的預(yù)混液(含引物、探針、酶等)與提取的DNA模板在冰上混合配制。
上機(jī)擴(kuò)增:將反應(yīng)體系放入實(shí)時(shí)熒光PCR儀中,設(shè)置好程序(通常包括預(yù)變性95℃ 10分鐘,隨后40個(gè)循環(huán)的95℃ 15秒、60℃ 1分鐘)。
結(jié)果判讀:
陽(yáng)性:擴(kuò)增曲線呈明顯的“S”型,且Ct值小于或等于設(shè)定閾值(如Ct≤36)。
陰性:無(wú)擴(kuò)增曲線,或曲線為直線/輕微斜線,Ct值大于設(shè)定閾值(如Ct≥40)。
可疑:Ct值介于兩者之間(如36<Ct<40),需重復(fù)實(shí)驗(yàn)確認(rèn)。
?? 注意事項(xiàng)與局限性
對(duì)照設(shè)置:每次實(shí)驗(yàn)必須設(shè)置陰性對(duì)照(無(wú)模板對(duì)照)和陽(yáng)性對(duì)照(含Cry1A(c)基因的質(zhì)?;駾NA),以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性。
防污染:由于靈敏度極高,必須嚴(yán)格分區(qū)操作(試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)),防止氣溶膠污染導(dǎo)致假陽(yáng)性。
DNA質(zhì)量:樣品中殘留的PCR抑制劑(如多糖、多酚、蛋白質(zhì))或DNA降解可能導(dǎo)致假陰性結(jié)果。
儀器依賴:必須使用帶有熒光檢測(cè)功能的實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀。
儲(chǔ)存條件:試劑盒通常需在-20℃條件下避光保存,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
GTP酶IMAP家族成員5抗體 | H3N1 hemagglutinin 流感病毒H3N1血凝素抗體 |
富含亮氨酸α2糖蛋白抗體 | 脯氨酸二肽酶抗體 |
mouse Ly-49C/F/H/I/FITC FITC標(biāo)記小鼠Ly-49C/F/H/I單克隆抗體 | DENV-2 E 登革熱病毒包膜糖蛋白E抗體 |
肌球蛋白8抗體 | 丙酮酸激酶PK測(cè)試盒測(cè)組織、血清 50管/48樣 紫外比色法 |
Nck1 NCK銜接蛋白1抗體 | 人蛋白ATP1B4(ATP1B4)核酸檢測(cè)試劑盒 |
ZNF816A 鋅指蛋白816A抗體 | 大鼠血管生成素樣蛋白2(ANGPTL2)PCR檢測(cè)試劑盒 |
CoREST2蛋白抗體 | 小鼠骨保素(OPG)PCR檢測(cè)試劑盒 |
CGREF1 細(xì)胞生長(zhǎng)調(diào)節(jié)蛋白CGREF1抗體 | 大鼠睪酮(Testosterone)PCR檢測(cè)試劑盒 |
磷酸化蛋白激酶B2抗體 | 蜥蜴17羥孕酮(17-OHP)核酸檢測(cè)試劑盒 |
RANTES T細(xì)胞特異性趨化因子抗體 | 皮質(zhì)酮(CORT)含量試劑盒(HPLC) |
2號(hào)染色體開放閱讀框53抗體 | 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)PCR檢測(cè)試劑盒 |
EAR1 嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白抗體 | 大鼠白介素13(IL-13)PCR檢測(cè)試劑盒 |
原肌球蛋白4抗體 | 人水通道蛋白-1(AQP1)PCR檢測(cè)試劑盒 |
小鼠腦脊髓炎病毒(EV)抗體(IgG)PCR檢測(cè)試劑盒 | Cry1A(c)基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)ǎ?/span>猴超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)PCR檢測(cè)試劑盒 |
大鼠酶原顆粒膜糖蛋白(GP2)PCR檢測(cè)試劑盒 | 小鼠氨酰tRNA合成酶復(fù)合多功能相互作用蛋白1(AIMP1)PCR檢測(cè)試劑盒 |
人Seryl- tRNA合成酶,細(xì)胞質(zhì)(SARS/SERS)核酸檢測(cè)試劑盒 | 脂肪組織蛋白提取試劑盒48T |
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)操作規(guī)范
嚴(yán)格分區(qū)操作:試劑配制區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)需物理隔離,防止氣溶膠污染。
每次實(shí)驗(yàn)需設(shè)置陰性對(duì)照(無(wú)模板DNA)、陽(yáng)性對(duì)照(已知PAT基因樣本)及空白對(duì)照(僅緩沖液)。
加樣時(shí)避免過(guò)量或不足,推薦低容量反應(yīng)管以提高熱傳導(dǎo)率。
污染防控
定期監(jiān)測(cè)實(shí)驗(yàn)室空氣、加樣槍及儀器表面污染,可通過(guò)擦拭采樣后擴(kuò)增驗(yàn)證。
擴(kuò)增產(chǎn)物需在專用區(qū)域處理,避免開蓋時(shí)形成氣溶膠污染。
關(guān)鍵字: Cry1A(c);基因 ;核酸檢測(cè)試劑盒;PCR-熒光探針?lè)?
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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、 華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。
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