產品介紹：

檢測原理與目的

檢測原理：基于 實時熒光定量 PCR（qPCR） 技術，采用 TaqMan 熒光探針法。試劑盒中含有針對 DAS44406-6 品系特異性設計的引物和探針。在 PCR 擴增過程中，隨著目標 DNA 片段的指數級擴增，探針被酶切降解，釋放出熒光信號（通常為 FAM 通道）。儀器實時監(jiān)測熒光信號的累積，并根據 Ct 值（循環(huán)閾值） 判定結果。

核心目的：用于食品、飼料、農作物植株等樣品中 DAS44406-6 轉基因大豆品系 的高特異性檢測和定量分析。

特異性鑒定：專一性地檢測樣品中是否含有 DAS44406-6 品系。

定量分析：通過建立標準曲線，計算樣品中 DAS44406-6 品系的拷貝數或占總大豆基因組的百分比。

?? 產品核心參數與組成

項目  詳細信息

檢測方法  實時熒光定量 PCR (TaqMan 探針法)

檢測靶標  轉基因大豆品系 DAS44406-6

產品規(guī)格  48T (即 48 次測試)

檢測限  最低檢測限可達 0.1% (部分產品可達 1×103 copies/mL)

主要組分  A-44406-6-P (引物探針混合液)、NG-P (陰性對照)、PG-44406-6-P (陽性對照)

??? 操作流程

樣本處理：提取待測樣本（如大豆葉片、豆粉、飼料等）的基因組 DNA。

試劑準備：在冰上將引物探針混合液與 qPCR 預混液按比例混合。

加樣：將 DNA 模板、陰性對照（無菌水）和陽性對照（試劑盒提供）加入到反應體系中。

qPCR 擴增：將反應板放入熒光定量 PCR 儀（如 ABI 7500、CFX 96 等）中，運行兩步法程序：

預變性：95℃ 10 分鐘

擴增循環(huán)：95℃ 15 秒 → 60℃ 1 分鐘 (采集熒光)，40-45 個循環(huán)。

結果分析：儀器自動分析擴增曲線和 Ct 值。

?? 結果判讀標準

結果類型  判讀標準  解釋

陽性 (+)  擴增曲線呈典型“S”型，且 Ct 值 ≤ 36-40。  樣品中檢測到 DAS44406-6 基因片段，判定為含有轉基因大豆品系 DAS44406-6。

陰性 (-)  無 Ct 值，或 Ct 值 ≥ 閾值，無指數增長期。  樣品中未檢測到 DAS44406-6 基因片段，判定為陰性。

無效  陽性對照未擴增，或陰性對照出現(xiàn)擴增。  實驗失敗（可能存在試劑污染或失效），結果無效。

?? 注意事項

防止污染：由于該方法靈敏度極高，建議在獨立的潔凈區(qū)域進行操作，并使用帶濾芯的槍頭。

避光保存：反應液中的熒光染料對光敏感，試劑應避光保存和使用。

內源基因對照：為了確保檢測結果的準確性（排除假陰性），建議同時使用 大豆內源基因檢測試劑盒（如大豆 Lectin 基因）對樣本進行檢測，以確認樣本 DNA 提取成功且無 PCR 抑制物。

標準依據：該檢測方法通常參照《GB/T 19495.3-2004 轉基因產品檢測 核酸提取純化方法》等相關標準進行。

公司正在出售的產品：

實驗操作規(guī)范

嚴格分區(qū)操作：試劑配制區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)需物理隔離，防止氣溶膠污染。

每次實驗需設置陰性對照（無模板DNA）、陽性對照（已知PAT基因樣本）及空白對照（僅緩沖液）。

加樣時避免過量或不足，推薦低容量反應管以提高熱傳導率。

污染防控

定期監(jiān)測實驗室空氣、加樣槍及儀器表面污染，可通過擦拭采樣后擴增驗證。

擴增產物需在專用區(qū)域處理，避免開蓋時形成氣溶膠污染。