產(chǎn)品介紹:
本試劑盒主要用于食品、飼料、藥品及化妝品中豬源性成分的定性檢測(cè)。
檢測(cè)目標(biāo):豬源性特異性基因片段(通常針對(duì)豬的線(xiàn)粒體細(xì)胞色素b基因或D-loop區(qū)等高度保守區(qū)域)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 豬源性成分核酸檢測(cè)試劑盒(恒溫?zé)晒夥ǎ?/span> | 貨號(hào) | AP3459 |
產(chǎn)品分類(lèi) | 熒光PCR | 規(guī)格 | 48T |
應(yīng)用領(lǐng)域:
清真/猶太食品認(rèn)證:用于檢測(cè)食品或藥品中是否含有違禁的豬源成分。
肉類(lèi)摻假鑒別:檢測(cè)肉制品(如香腸、肉松)中是否摻入了廉價(jià)的豬肉。
飼料安全檢測(cè):檢測(cè)飼料中是否違規(guī)添加了動(dòng)物源性成分(如肉骨粉)。
藥品與化妝品:檢測(cè)明膠膠囊、護(hù)膚品等是否含有豬源性原料。
?? 檢測(cè)原理
該試劑盒采用的是恒溫?zé)晒夥ǎㄍǔ?/span>LAMP或類(lèi)似技術(shù))。
技術(shù)核心:設(shè)計(jì)針對(duì)豬源性基因特異性序列的多組特異性引物(通常為4-6條),在恒定溫度(通常為63℃)下進(jìn)行擴(kuò)增。
信號(hào)產(chǎn)生:利用熒光染料(如SYTO-9或特異性探針)嵌入雙鏈DNA后發(fā)出熒光的原理。如果樣品中含有豬源性DNA,擴(kuò)增反應(yīng)會(huì)迅速產(chǎn)生大量雙鏈DNA,熒光信號(hào)隨之增強(qiáng)。
結(jié)果判定:通過(guò)恒溫?zé)晒鈾z測(cè)儀實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)的變化。
?? 核心優(yōu)勢(shì)
操作簡(jiǎn)便:無(wú)需復(fù)雜的熱循環(huán)(不像PCR需要反復(fù)升降溫),只需在恒溫設(shè)備(如水浴鍋、金屬浴或恒溫?cái)U(kuò)增儀)中反應(yīng)即可。
快速高效:通常在 45-60分鐘 內(nèi)即可完成檢測(cè)并出結(jié)果,比傳統(tǒng)PCR法更快。
高靈敏度:檢測(cè)下限極低,根據(jù)相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)(如SN/T 3730.8-2013),檢出限可達(dá) 0.1% 的豬源性成分含量。
高特異性:由于使用多組引物識(shí)別多個(gè)靶點(diǎn),特異性極強(qiáng),不易產(chǎn)生假陽(yáng)性。
肉眼判讀:部分恒溫?zé)晒庠噭┖性诜磻?yīng)結(jié)束后可通過(guò)熒光染料的顏色變化(如藍(lán)光燈下觀察)進(jìn)行肉眼判讀,無(wú)需復(fù)雜儀器。
?? 操作流程概覽
樣本前處理與DNA提?。簭拇郎y(cè)樣品(肉糜、飼料粉、膠囊內(nèi)容物等)中提取總DNA。
試劑配制:將試劑盒中的反應(yīng)液、酶液等按比例混合(通常在冰上操作)。
加樣:向反應(yīng)管中加入提取的DNA模板。
恒溫?cái)U(kuò)增:將反應(yīng)管放入恒溫?zé)晒鈾z測(cè)儀(如Genie II、Dhelix等)或普通恒溫設(shè)備中,在 63℃ 條件下反應(yīng) 45分鐘。
結(jié)果判讀:
陽(yáng)性(含豬源):儀器顯示“陽(yáng)性”,或擴(kuò)增曲線(xiàn)呈明顯的“S”型,或肉眼觀察熒光顏色發(fā)生顯著變化(如變綠)。
陰性(不含豬源):儀器顯示“陰性”,或無(wú)擴(kuò)增曲線(xiàn),或熒光顏色無(wú)變化(如保持橙色)。
?? 注意事項(xiàng)與局限性
防污染:恒溫?cái)U(kuò)增效率極高,極易產(chǎn)生氣溶膠污染,必須嚴(yán)格分區(qū)操作(試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)),嚴(yán)禁開(kāi)蓋分析。
DNA質(zhì)量:樣品中殘留的PCR抑制劑(如油脂、多糖)可能影響擴(kuò)增效率,導(dǎo)致假陰性。
儀器兼容性:雖然對(duì)儀器要求低,但仍需恒溫?zé)晒鈾z測(cè)儀或至少具備熒光檢測(cè)功能的設(shè)備;若使用普通熒光PCR儀,需調(diào)整程序(如設(shè)置63℃恒溫循環(huán))。
儲(chǔ)存條件:試劑盒通常需在-20℃或-70℃條件下避光保存,避免反復(fù)凍融。
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應(yīng)用場(chǎng)景與產(chǎn)品選擇建議
科研領(lǐng)域:
常規(guī)PCR試劑盒。
臨床診斷:
探針?lè)╭PCR試劑盒(如牛白血病病毒,靈敏度100拷貝/反應(yīng))。
現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè):
恒溫?cái)U(kuò)增試劑盒(如LAMP法,90分鐘出結(jié)果)
關(guān)鍵字: 豬;源性成分 ;核酸檢測(cè)試劑盒;恒溫?zé)晒夥?
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