細(xì)胞簡介：
人羊膜間充質(zhì)干分離自胎盤羊膜組織；胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層，與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似，含有眼表上皮細(xì)胞，包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長所需要的物質(zhì)，其光滑，無血管、神經(jīng)及淋巴，具有一定的彈性；在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成，均具有多分化潛能，可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元，且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能。
產(chǎn)品名稱 | 人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞 | 組織來源 | 羊膜 |
英文名稱 | Human Amniotic Mesenchymal Stem Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 |
貨號 | XG-X4707 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品信息:
產(chǎn)品名稱 人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞
組織來源 羊膜
默認(rèn)種屬 人
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡介 實(shí)驗(yàn)室分離的人羊膜間充質(zhì)干采用 - 膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測 實(shí)驗(yàn)室分離的人羊膜間充質(zhì)干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3-5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
1. 細(xì)胞復(fù)蘇
運(yùn)輸與接收：細(xì)胞以液氮凍存形式運(yùn)輸，收到后立即用75%酒精噴灑消毒細(xì)胞瓶，置于超凈臺內(nèi)無菌操作。
復(fù)蘇操作：將細(xì)胞瓶放入37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置3-4小時穩(wěn)定狀態(tài)，顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和密度，記錄初始狀態(tài)（建議40x、100x、200x各拍一張照片）。
2. 細(xì)胞傳代
傳代時機(jī)：當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)80%匯合度時進(jìn)行傳代。
操作步驟：
棄去舊培養(yǎng)基，用無鈣鎂PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分鐘，顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓脫落。
加入5 mL完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打使細(xì)胞完全脫落。
離心（1000 RPM，5分鐘），棄上清，用1-2 mL培養(yǎng)基重懸。
按1:2比例分瓶傳代（如T25瓶分至兩個T25瓶），補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基至5 mL。
換液頻率：每2-3天換液一次。
3. 細(xì)胞凍存
凍存液：使用無血清凍存液。
凍存步驟：細(xì)胞傳代后，用胰蛋白酶消化并離心，重懸于凍存液，緩慢降溫至-80℃，最終轉(zhuǎn)入液氮長期保存。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔毛囊細(xì)胞 Rabbit Hair Follicle Cells | 11-β-羥基類固醇脫氫酶3抗體 |
786-O細(xì)胞 | 組織肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶II（CARNITINE PALMITOYL－TRANSFERASE II）活性比色法定量檢測試劑盒 |
細(xì)胞對氧磷酶2（PON2）活性比色法定量檢測試劑盒 | 組織磷脂酶A2（Phospholipase A2）活性比色法定量檢測試劑盒 |
冰凍切片組織線粒體復(fù)合物IV蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒 | 胞漿內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測試劑盒 |
直接細(xì)胞克隆兩步法逆轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒 | 癌基因RAS相關(guān)蛋白Rab25抗體 |
真菌/酵母醛酮還原酶（aldo-keto reductase）總活性比色法定量檢測試劑盒 | LYSMD3蛋白抗體 |
環(huán)指蛋白61抗體 | FITC標(biāo)記人CD62P單克隆抗體 |
過氧化物酶體生物合成因子19抗體 | 貝萼皂苷元-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 104513-86-2 |
組蛋白去乙?；笍?fù)合亞基SAP30抗體 | 草酸鈣563-72-4 |
外生性骨疣樣蛋白2抗體 | (+)使君子氨酸52809-07-1 |
磷酸化蛋白激酶B抗體 | 人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞石杉堿甲102518-79-6 |
組織堿性磷酸酶活性比色法定量檢測試劑盒 | 小鼠前列腺成纖維細(xì)胞 Mouse Prostate Fibroblast Cells |
微型RNA（miRNA）表達(dá)載體細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒 | EBC-1細(xì)胞 |
產(chǎn)品注意事項(xiàng)：
無菌操作是生命線：所有操作必須在生物安全柜內(nèi)嚴(yán)格無菌進(jìn)行，使用專用試劑和耗材，防止交叉污染。
消化是關(guān)鍵步驟：
控制時間：使用胰蛋白酶或TrypLE Express消化時，嚴(yán)格控制在1-2分鐘內(nèi)。顯微鏡下觀察到細(xì)胞變圓、邊緣松動即可終止，避免過度消化導(dǎo)致細(xì)胞損傷。
消化液選擇：部分供應(yīng)商推薦使用0.25%胰蛋白酶，也有使用TrypLE Express或0.25% EDTA胰酶的，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室條件和細(xì)胞反應(yīng)選擇。
培養(yǎng)基與生長因子：
基礎(chǔ)培養(yǎng)基：推薦使用專用培養(yǎng)基（如EGM-2 MV BulletKit）。若使用DMEM/F12等基礎(chǔ)培養(yǎng)基，需補(bǔ)充10-20%胎牛血清（FBS）及抗生素（如青霉素/鏈霉素）。
生長因子：為促進(jìn)生長，可添加VEGF、FGF等內(nèi)皮細(xì)胞生長因子。傳代后可嘗試對比培養(yǎng)（一瓶用原裝完全培養(yǎng)基，一瓶用自配培養(yǎng)基）。
細(xì)胞密度與傳代：
最佳傳代密度：建議在細(xì)胞匯合度達(dá)70%-80%時進(jìn)行傳代，避免過度生長導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)下降。
生長不均處理：若細(xì)胞生長不均，成島狀分布，可將細(xì)胞消化后重新打散，加入新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)]^。
污染監(jiān)測與處理：
定期檢查：定期觀察細(xì)胞有無支原體、細(xì)菌等污染跡象。
污染處理：若發(fā)現(xiàn)污染，需根據(jù)污染程度決定。輕度污染可嘗試用含高濃度抗生素的培養(yǎng)液反復(fù)清洗，但嚴(yán)重污染時建議棄置細(xì)胞。
關(guān)鍵字： 人羊膜間充質(zhì);干細(xì)胞;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實(shí)驗(yàn)室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù)，包括實(shí)驗(yàn)室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學(xué)、檢驗(yàn)檢測、化工材料、科研院所、政府機(jī)構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實(shí)驗(yàn)室完整解決方案。本著幫助用戶實(shí)現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實(shí)驗(yàn)室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活，能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。