大鼠氣管上皮細胞

細胞簡介 ：

大鼠氣管上皮分離自氣管組織；氣管（Trachea），呼吸器官的一部分；為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣，與環(huán)狀軟骨相連；向下至第四、五胸椎體（相當胸骨角平面）交界處，分左、右主支氣管，分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構成，有彈性，軟骨為“C”字形的軟骨環(huán)，缺口向后，各軟骨環(huán)以韌帶連接起來，環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接，保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜，表面覆蓋纖毛上皮，粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒，纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出，以凈化吸入的氣體。氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線，不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細胞，還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細胞因子從而參與氣道炎癥及免疫反應。體外培養(yǎng)的原代氣管上皮細胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結構和功能活動上存在很大的相似性，因此，在基礎及臨床研究中極為重要。

產(chǎn)品信息：

產(chǎn)品名稱 大鼠氣管上皮細胞

英文名稱 Rat Tracheal Epithelial Cells

組織來源 氣管

默認種屬 大鼠

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠氣管上皮細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

方法簡介 公司實驗室分離的大鼠氣管上皮采用-混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測 公司實驗室分離的大鼠氣管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)操作方法：

核心特點

高度生理相關性：保留了體內(nèi)來源組織的結構、功能和基因表達特征。

有限壽命：與無限增殖的腫瘤細胞系不同，原代細胞增殖能力有限，經(jīng)過一定次數(shù)的分裂后會進入衰老期，這更符合正常細胞的生理狀態(tài)。

異質(zhì)性：初始培養(yǎng)物通常是多種細胞類型的混合物，有時需要通過差速貼壁等方法進行純化。

操作要求高：對培養(yǎng)環(huán)境、試劑質(zhì)量和無菌操作的要求極為嚴格，培養(yǎng)難度大于永生化細胞系。

組織塊培養(yǎng)法

取材與剪切

在無菌條件下取出組織，用Hanks液或PBS清洗，去除血污和脂肪、結締組織等非目標成分。

用眼科剪將組織剪切成 0.5-1 mm3 的小塊。

接種

用吸管將組織塊均勻地貼附在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶的內(nèi)表面，各組織塊之間保持一定間距（約0.5 cm）。

吸去多余液體，將培養(yǎng)器皿翻轉，放入 37℃、5% CO 的培養(yǎng)箱中，靜置 1-3小時，讓組織塊牢固貼壁。

加液培養(yǎng)

待組織塊貼壁后，輕輕翻轉培養(yǎng)瓶，從一側緩慢加入足量的培養(yǎng)液，使組織塊浸沒在液體中，注意不要讓液體直接沖擊組織塊，以免沖起。

繼續(xù)在培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。通常 3-5天 后可觀察到細胞從組織塊邊緣長出。

公司正在出售的產(chǎn)品：

視天氣狀況和運輸距離遠近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。

1) 1mL凍存細胞懸液裝于  1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸；收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng)，如無法立刻進行復蘇操作，凍存細胞可在-80℃的條件下保存 1個月。

2) T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進行常溫運輸；收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過 85%請立即進行傳代操作，如懸浮的細胞較多，請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。