細胞簡介：
大鼠主動脈外膜成纖維分離自主動脈血管外膜組織；血管外膜是由疏松結(jié)締組織組成，其中含螺旋狀或縱向分布的彈性纖維和膠原纖維。血管壁的結(jié)締組織細胞以成纖維細胞為主，當(dāng)血管受損傷時，成纖維細胞具有修復(fù)外膜的能力。有的動脈中膜和外膜的交界處，有密集的彈性纖維組成的外彈性膜。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的血管外膜成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質(zhì)透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。血管外膜成纖維細胞是血管外膜的主要組成細胞之一，其主要生理功能合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠主動脈外膜成纖維細胞 | 組織來源 | 主動脈組織 |
英文名稱 | Rat Aortic Adventitia Fibroblast Cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 |
貨號 | XG-X4740 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品信息:
產(chǎn)品名稱 大鼠主動脈外膜成纖維細胞
組織來源 主動脈組織
默認種屬 大鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡介 公司實驗室分離的大鼠主動脈外膜成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測 公司實驗室分離的大鼠主動脈外膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
大鼠主動脈外膜成纖維細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)步驟：
1. 細胞復(fù)蘇
運輸與接收：細胞以液氮凍存形式運輸，收到后立即用75%酒精噴灑消毒細胞瓶，置于超凈臺內(nèi)無菌操作。
復(fù)蘇操作：將細胞瓶放入37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置3-4小時穩(wěn)定狀態(tài)，顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和密度，記錄初始狀態(tài)（建議40x、100x、200x各拍一張照片）。
2. 細胞傳代
傳代時機：當(dāng)細胞密度達80%匯合度時進行傳代。
操作步驟：
棄去舊培養(yǎng)基，用無鈣鎂PBS潤洗細胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分鐘，顯微鏡下觀察細胞變圓脫落。
加入5 mL完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打使細胞完全脫落。
離心（1000 RPM，5分鐘），棄上清，用1-2 mL培養(yǎng)基重懸。
按1:2比例分瓶傳代（如T25瓶分至兩個T25瓶），補充新鮮培養(yǎng)基至5 mL。
換液頻率：每2-3天換液一次。
3. 細胞凍存
凍存液：使用無血清凍存液。
凍存步驟：細胞傳代后，用胰蛋白酶消化并離心，重懸于凍存液，緩慢降溫至-80℃，最終轉(zhuǎn)入液氮長期保存。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人滑膜細胞 Human Synovial Cells | 體液WNV（WEST NILE）病毒定性檢測試劑盒 |
LK-2細胞 | C. glabrata RFLP基因分析試劑盒 |
組織鈣（CALPAIN）活性熒光定量檢測試劑盒 | 腸集聚型大腸埃希菌（Enteroaggregative E. coli）鑒定 |
胚胎干細胞內(nèi)胚層（endoderm）細胞分化熒光檢測試劑盒 | 細胞CASPASE-1蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒 |
DNA清除試劑盒 | 流感病毒H3N1血凝素抗體 |
小鼠抗人CD90單克隆抗體 | 單核細胞趨化誘導(dǎo)蛋白1抗體 |
活性依賴的神經(jīng)保護肽抗體 | 血漿激肽釋放酶輕鏈抗體 |
高爾基復(fù)合體CFR1抗體 | 松苓新酸Dehydrotrametenolic acid |
腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)相互作用蛋白3抗體 | 葛花苷58274-56-9 |
死亡相關(guān)蛋白5抗體 | 新女貞苷96382-91-1 |
FITC標(biāo)記人CD40單克隆抗體 | 大鼠主動脈外膜成纖維細胞蔓性千斤拔素A140366-64-9 |
人血液脂蛋白A（lipoprotein A）免疫比濁法定量檢測試劑盒 | 人睪丸白膜上皮細胞 Primary human testicular white membrane epithelial cells |
果汁阿拉伯多糖比色法定量檢測試劑盒 | U87MG人腦星形膠質(zhì)母細胞瘤 |
產(chǎn)品注意事項：
無菌操作是生命線：所有操作必須在生物安全柜內(nèi)嚴格無菌進行，使用專用試劑和耗材，防止交叉污染。
消化是關(guān)鍵步驟：
控制時間：使用胰蛋白酶或TrypLE Express消化時，嚴格控制在1-2分鐘內(nèi)。顯微鏡下觀察到細胞變圓、邊緣松動即可終止，避免過度消化導(dǎo)致細胞損傷。
消化液選擇：部分供應(yīng)商推薦使用0.25%胰蛋白酶，也有使用TrypLE Express或0.25% EDTA胰酶的，可根據(jù)實驗室條件和細胞反應(yīng)選擇。
培養(yǎng)基與生長因子：
基礎(chǔ)培養(yǎng)基：推薦使用專用培養(yǎng)基（如EGM-2 MV BulletKit）。若使用DMEM/F12等基礎(chǔ)培養(yǎng)基，需補充10-20%胎牛血清（FBS）及抗生素（如青霉素/鏈霉素）。
生長因子：為促進生長，可添加VEGF、FGF等內(nèi)皮細胞生長因子。傳代后可嘗試對比培養(yǎng)（一瓶用原裝完全培養(yǎng)基，一瓶用自配培養(yǎng)基）。
細胞密度與傳代：
最佳傳代密度：建議在細胞匯合度達70%-80%時進行傳代，避免過度生長導(dǎo)致細胞狀態(tài)下降。
生長不均處理：若細胞生長不均，成島狀分布，可將細胞消化后重新打散，加入新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)]^。
污染監(jiān)測與處理：
定期檢查：定期觀察細胞有無支原體、細菌等污染跡象。
污染處理：若發(fā)現(xiàn)污染，需根據(jù)污染程度決定。輕度污染可嘗試用含高濃度抗生素的培養(yǎng)液反復(fù)清洗，但嚴重污染時建議棄置細胞。
關(guān)鍵字： 大鼠主動脈外膜;成纖維細胞;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領(lǐng)域，利用互聯(lián)網(wǎng)、數(shù)據(jù)分析及自動化技術(shù)，包括實驗室固定資產(chǎn)、儀器設(shè)備、生物樣本、化學(xué)品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學(xué)產(chǎn)品、技術(shù)服務(wù)、免疫學(xué)和分子學(xué)產(chǎn)品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學(xué)、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構(gòu)多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現(xiàn)“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學(xué)服務(wù)更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產(chǎn)品領(lǐng)域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構(gòu)通用性高、適應(yīng)性好、模塊搭配靈活，能快速響應(yīng)客戶需求的產(chǎn)品。