產(chǎn)品介紹:
H10 亞型流感病毒核酸檢測(cè)試劑盒是一種專門用于體外定性檢測(cè)甲型流感病毒 H10 亞型(Influenza A Virus, H10)核酸的分子診斷工具。該試劑盒主要基于實(shí)時(shí)熒光 RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù),通過(guò)特異性擴(kuò)增病毒的血凝素(HA)基因,實(shí)現(xiàn)對(duì) H10 亞型病毒的精準(zhǔn)識(shí)別。
產(chǎn)品名稱 | H10 亞型流感病毒核酸檢測(cè)試劑盒 |
產(chǎn)品分類 | 熒光PCR |
規(guī)格 | 50T |
貨號(hào) | AP3042 |
檢測(cè)原理
該試劑盒的核心原理是TaqMan 熒光探針?lè)▽?shí)時(shí)熒光 RT-PCR:
逆轉(zhuǎn)錄 (RT): 將樣本中提取的病毒 RNA 逆轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)的 DNA (cDNA)。
PCR 擴(kuò)增: 利用針對(duì) H10 亞型 HA 基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)的特異性引物和熒光標(biāo)記的探針(通常標(biāo)記為 FAM 熒光素)進(jìn)行擴(kuò)增。
信號(hào)檢測(cè): 在擴(kuò)增過(guò)程中,隨著目的基因片段的指數(shù)級(jí)增加,熒光信號(hào)也隨之增強(qiáng)。儀器實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào),從而判斷樣本中是否存在 H10 亞型病毒核酸。
?? 典型性能參數(shù)
參數(shù)指標(biāo) 典型數(shù)值/范圍 說(shuō)明
檢測(cè)目標(biāo) H10-HA 基因 特異性識(shí)別 H10 亞型血凝素基因
檢測(cè)方法 熒光 RT-PCR (探針?lè)? 即開(kāi)即用,特異性高
檢測(cè)限 1×103 拷貝/mL 最低可檢測(cè)濃度
檢測(cè)范圍 2×103 ~ 1×10? 拷貝/mL 具有良好的線性關(guān)系
特異性 高 不與 H1-H9、H11-H16 等其他亞型及常見(jiàn)呼吸道病原體交叉反應(yīng)
檢測(cè)時(shí)間 約 1.5 - 2 小時(shí) 包含核酸提取和上機(jī)擴(kuò)增全過(guò)程
?? 樣本類型
禽類樣本: 禽類咽喉拭子、泄殖腔拭子(H10 亞型在水禽中較為常見(jiàn))。
環(huán)境樣本: 活禽市場(chǎng)環(huán)境涂抹物、污水、遷徙鳥(niǎo)類棲息地水樣等。
臨床樣本: 咽拭子、痰液、肺泡灌洗液(用于疑似人感染 H10 病例的排查和監(jiān)測(cè))。
?? 操作流程簡(jiǎn)述
樣本采集與保存: 使用無(wú)菌采樣拭子采集樣本,置于病毒保存液中,4℃保存并盡快送檢;長(zhǎng)期保存需置于 -70℃。
病毒 RNA 提?。?使用配套的病毒 RNA 提取試劑盒(如磁珠法或柱提法)提取核酸。
配置反應(yīng)體系: 將提取的 RNA、PCR 反應(yīng)液、酶、引物/探針混合液按比例加入 PCR 反應(yīng)管。
上機(jī)檢測(cè): 將反應(yīng)管放入實(shí)時(shí)熒光 PCR 儀(如 ABI 7500、DA7600 等),設(shè)置好熒光通道(通常為 FAM)。
結(jié)果分析: 根據(jù)擴(kuò)增曲線的 Ct 值(通常閾值設(shè)為 35-40)進(jìn)行判讀。
?? 注意事項(xiàng)
生物安全: H10 亞型流感病毒屬于潛在的感染性生物因子。操作應(yīng)在生物安全二級(jí)(BSL-2)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行,涉及病毒培養(yǎng)或高濃度樣本操作需在加強(qiáng)型 BSL-2 或 BSL-3 實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行。操作人員需穿戴適當(dāng)?shù)膫€(gè)人防護(hù)裝備(口罩、手套、防護(hù)服)。
防污染: PCR 檢測(cè)極其靈敏,必須嚴(yán)格分區(qū)操作(試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR 擴(kuò)增區(qū)),防止擴(kuò)增產(chǎn)物氣溶膠污染導(dǎo)致假陽(yáng)性。
試劑保存: 試劑盒中的酶和探針通常需在 -20℃ 避光保存,避免反復(fù)凍融。
臨床意義: H10 亞型主要在禽類中流行,但具有跨種屬傳播的潛力。該試劑盒主要用于禽流感的監(jiān)測(cè)與防控、環(huán)境風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估以及人畜共患病的早期預(yù)警。檢測(cè)結(jié)果需結(jié)合流行病學(xué)史和臨床癥狀綜合判斷。
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V-Set 和含有跨膜結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì) 1抗體 | CDX2 尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2抗體 |
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注意事項(xiàng):
1?、嚴(yán)防污染?
?分區(qū)操作?:必須在獨(dú)立的生物安全柜內(nèi)進(jìn)行樣本處理、試劑配制和加樣,避免氣溶膠交叉污染。
?專用耗材?:使用無(wú)核酸酶的槍頭、EP管等,建議使用帶濾芯槍頭。
?規(guī)范操作?:加樣后立即蓋緊管蓋,避免試劑外濺。
?2、保證質(zhì)量?
?樣本處理?:樣本采集后應(yīng)立即冷藏(2-8℃),長(zhǎng)期保存需置于-70℃以下,避免反復(fù)凍融。
?試劑保存?:嚴(yán)格按照說(shuō)明書要求的溫度(通常是-20℃或2-8℃)保存試劑,避免反復(fù)凍融。
?對(duì)照設(shè)置?:每次實(shí)驗(yàn)必須設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照和空白對(duì)照,監(jiān)控實(shí)驗(yàn)有效性。
3?、注意安全?
?生物安全?:陽(yáng)性樣本需按生物安全三級(jí)標(biāo)準(zhǔn)處理,實(shí)驗(yàn)人員需佩戴個(gè)人防護(hù)裝備(PPE)。
?廢棄物處理?:所有廢棄物(包括耗材、樣本)需經(jīng)121℃高壓滅菌30分鐘后方可丟棄
關(guān)鍵字: H10; 亞型流感病毒;檢測(cè)試劑盒;
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)是一家化學(xué)、生化和材料科學(xué)等領(lǐng)域的科研用研發(fā)產(chǎn)品的制造商和供應(yīng)商, 我們的產(chǎn)品在相當(dāng)寬的基礎(chǔ)科學(xué)領(lǐng)域得到廣泛的應(yīng)用??蛻舭▽W(xué)術(shù)界、工業(yè)界和政府的研究和開(kāi)發(fā)實(shí)驗(yàn)室以及制藥,生物技術(shù),化工/石化行業(yè)等具商業(yè)規(guī)模的企業(yè)。
上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)除包括化學(xué)、分析化學(xué)、生命科學(xué)和材料科學(xué)阿凡提(affandi)產(chǎn)品線外。 質(zhì)量是所有產(chǎn)品和服務(wù)最關(guān)鍵的組成部分,我們通過(guò)質(zhì)量和實(shí)力贏得客戶的信賴。產(chǎn)品的質(zhì)量是企業(yè)的生命。
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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司(Shanghai Fusheng Industrial Co., Ltd.,China)先后與天津中醫(yī)學(xué)院、復(fù)旦大學(xué)、上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院、上海交通大學(xué)、 華東師范大學(xué)、第二軍醫(yī)大學(xué)、南京大學(xué),暨南大學(xué),南京工業(yè)大學(xué),曙光醫(yī)院、華山醫(yī)院、瑞金醫(yī)院、上海有機(jī)研究所、中科院上海分院等多家單位建立了良好的合作關(guān)系。
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